180723. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fáldalomcsillapító hatású pentapeptid-származékok előállítására
9 180723 10 10 percig 0 Cr hőmérsékleten kevertetjük az elegyet, majd hozzáadunk egymás után az itt megadott sorrendben 37,1 g (0,1 mól) N5-tercier-butoxi-karboniI-0-benzil-L-tirozint, 13,5 g (0,1 mól) 1-hidroxi-benzotriazolt és 20,6 g (0,1 mól) N,N'-diciklohexil-karbodiimidet. 3 órán át 0 C" hőmérsékleten, majd további 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyet. Utána 0 C° hőmérsékletre hütjük, kiszűrjük a kivált csapadékot, majd a szűrletről csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert. Etil-acetátban feloldjuk a maradékot és 1 normál nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, utána vízzel, majd hideg, 0,75 normál citromsav-oldattal, végül megint vízzel mossuk az oldatot. Vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk az etil-acetátos oldatot, majd ledesztilláljuk róla az oldószert. Etanolban melegen feloldjuk a maradékot, lehűléskor kikristályosodik a termék. Egyszeri etanolos átkristályosítás után 41,5 g (80%) tiszta terméket nyerünk, op.: 121—123 C°. Analízis a C30H36N2O6 képlet alapján (520,53): számított: C 69,2í%: H 6,97%; N 5,38%; talált: C 68,99%: H6,75%; N 5,17%. C) NQ-Tercier-butoxi-karbonil-0-benzil-L-tiroziI-D-alanin 200 ml tetrahidro-furán és 20 ml víz elegyéhez hozzáadjuk a B) pontban leírt módon nyert terméket. 0 C“ hőmérsékletre hűtjük az oldatot, és lassan hozzáadunk 13,2 ml (1,1 egyenérték) 5 normál nátrium-hidroxid-oldatot. Keverés közben engedjük az elegyet szobahőmérsékletre melegedni. 5 óra múlva víz és dietil-éter között megosztjuk az elegyet, szilárd citromsav adagolásával 2-re állítjuk be az elegy pH-ját, majd etil-acetáttal kirázzuk. Vízzel mossuk, majd vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk az etil-acetátos oldatot, és a szárítószer kiszűrése után dietil-éterrel hígítjuk. Kiszűrjük a kivált csapadékot, ily módon 17,7 g (67%) terméket nyerünk, op.: 160—162 CG. Analízis a C24E13ÜN206 képlet alapján (442,51): számított: C 65,14%; H 6,83%;; N6,63%; talált: C 64,73%; H6,70%;: N 6,20°%. D) N^-Tercier-butoxi-karbonil-O-benzil-L-tirozil-D-alanil-glicin-benzil-észter 70 ml vízmentes dimetil-formamidhoz hozzáadunk 6,74 g (0,02 mól) glicin-benzil-észter-p-toluol-szulfonátot. 0 C° hőmérsékletre hűtjük az elegyet, és hozzáadunk 2,24 g (0,02 mól) diaza-biciklo-oktánt. Néhány perces keverés után hozzáadunk először 8,84 g (0,02 mól), a C) pontban leírt módon nyert terméket, majd 2,7 g (0,02 mól) 1-hidroxi-benzotriazolt, és végül 4,12 g (0,02 mól) N,N'-diciklohexil-karbodiimidet. 2 órán át 0 Cc hőmérsékleten, majd 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyet. 0 Cc hőmérsékletre hűtjük az ily módon nyert szuszpenziót, kiszűrjük a csapadékot, és csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert a szűrletről. Etil-acetátban feloldjuk a maradékot, és 1 normál nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel, hideg, 0,75 normál citromsav-oldattal, majd végül megint vízzel mossuk az etil-acetátos oldatot. Vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, majd csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert. Etanolból kristályosítjuk a maradékot, ily módon 10,8 g (92%) tiszta terméket nyerünk, op.: 145—147 C°. Analízis a C33H3gN307 képlet alapján (589,69): számított: C 67,22%; H 6,67%; N7,13%; talált: C 67,32%; H 6,83%; N6,91%. E) Na-Tercier-butoxi-karbonil-L-tirozil-D-alanil-glicin 60 ml dimetil-formamidhoz hozzáadunk 10,5 g (0,018 mól) a D) pontban leírt módon nyert terméket, majd 2,5 g 5%-os csontszenes palládium dimetil-formamidos szuszpenzióját. Nitrogénnel kiöblítjük az elegyet tartalmazó edényt, majd egy elosztófejes gázbevezetőcsövön át 3 órán keresztül atmoszferikus nyomáson hidrogéngázt vezetünk bele az elegybe. Utána kiszűrjük a katalizátort, és csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert a szűrletről. A maradékot dietil-éterrel eldörzsölve 5,4 g (75%) terméket nyerünk amorf, szilárd halmazállapotú anyag formájában. Analízis a C26H26N2Os képlet alapján (446,65): számított: C 69,94%; H 5,87%; N 6,27%; talált: C 70,08%; H 5,82%; N 6,16%. F) N°-Tercier-butoxi-karboniI-N“-metiI-L-metionil-amid 17,2 g (0,04 mól) Na-tercier-butoxi-karbonil-L-metionin-diciklohexil-ammóniumsót eíil-acetát és hideg 0,75 normál citromsav-oldat kétfázisú elegyében feloldjuk. A szerves fázist elválasztjuk, vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, és csökkentett nyomáson ledesztilláljuk róla az oldószert. 80 ml vízmentes tetrahidro-furán és 10 ml dimetil-formamid elegyében feloldjuk az olajos maradékot, és az oldathoz hozzáadunk 0,5 g 18-korona-6-étert. Az ily módon nyert elegyhez hűtés és keverés mellett, félóra alatt, 0,12egyenértéknyi mennyiségű kálium-hidrid szuszpenzióját adagoljuk. Ezután 2,49 ml (0,04 mól) metil-jodidot adunk hozzá, majd 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyet. Utána lehűtjük a reakcióelegyet, 0,75 normál citromsav-oldattal pH = 3-ra savanyítjuk, majd feloldjuk víz és dietil-éter kétfázisú elegyében. Vízzel többször mossuk a dietil-éteres fázist, majd 1 normál nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal kirázzuk. Egyesítjük a vizes extraktumokat, pH = 2-re savanyítjuk, majd etil-acetáttal kirázzuk. Vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk az etil-acetátos oldatot, majd csökkentett nyomáson ledesztilláljuk róla az oldószert. Ily módon 8,4 g terméket nyerünk, amelynek NMR-spektruma összhangban áll a kívánt, N-metilezett termék szerkezetével. 8=2,92, N—CH3; 8 = 2,11, S—CH3: 8=1,6, C(CH3)3. Ezután 60 ml dimetil-formamidban feloldjuk a fenti módon nyert 8,4 g (körülbelül 0,034 mól) olajos terméket, 0 C° hőmérsékletre hűtjük az oldatot, majd 4,69 g (0,035 mól) 1-hidroxi-benzotriazolt, utána pedig 7,0 g (0,034 mól) N,N'-diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá. 2 órán át 0 C° hőmérsékleten keverjük az elegyet, majd 45 percen át egy gázelosztócsövön keresztül vízmentes ammóniát vezetünk bele. Ezután megszűrjük a reakcióelegyet, és csökkentett nyomáson ledesztilláljuk a szűrletről az oldószert. Egy 3 x 50 cm méretű, szilikagéllel (60—200 mesh) töltött oszlopra visszük fel a 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
