180722. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dimer indol-dihidroindol-karboxamid-származékok előállítására
13 180722 14-amint, majd éjszakán át a 3. példában leírt reakciókörülmények között szobahőmérsékleten kevertetjik a reakcióelegyet. Utána egyszer vízzel mossuk, majd megszárítjuk az oldatot, és ledesztilláljuk róla az oldószert. Szilikagél oszlopon, eluensként metilén-klorid, metanol 5 és etil-acetát 1:1:1 arányú elegyét használva kromatografáljuk a maradékot. Egyesítjük a megfelelő frakciókat, és csökkentett nyomáson ledesztilláljuk róluk az oldószert. 50 mg anyag felhasználásával meghatározzuk jellemző fizikai állandóit: infravörös spektrumának jel- 10 lemzö maximumai: 3670, 3550, 3470, 1730, 1670 cm'1; NMR-spektrumában (CDCI3-ban mint oldószerben felvéve) a jellemző csúcsok a következő értékeknél jelennek meg: 8=2,80, 3,34, 3,58 és 3,77; tömegspektrumának jellemző csúcsai: 811, 825 (transzmetilezés), 780, 752, 15 571, 470, 353, 154, 124 és 122; 66%-os vizes dimetil-formamídban mint oldószerben túráivá a két titrálható csoport pKa-értéke: 5,35 és 7,38. A fizikai állandók meghatározása után fennmaradó anyagból a szokásos módon szulfátot készítünk. Termelés: 1,8 g. 20 17. példa A sók előállítása 25 A fentiekben leírt szulfátoktól eltérő sók, így a szervetlen savakból levezethető aminokat tartalmazó sók, mint például kloridok, bromidok, foszfátok, nitrátok és hasonlók, valamint a szerves savakból levezethető ami- 30 nokat tartalmazó sók, mint például az acetálok, klóracetátok, triklór-acetátok, benzoátok, alkil- vagy aril-szulfonátok és hasonlók előállítására a találmány értelmében az 1, példában a szulfátok előállítására leírt módszerrel analóg módon járunk el, és a találmány sze- 35 rinti amid bázisokból állítjuk elő őket, az 1. példában említett 2%-os vizes kénsav-oldat helyett az adott savnak valamely megfelelő oldószerrel készült oldatát használva. 1. táblázat Vegyület neve Daganat Dózis (mg/kg) x kezel és tartama, nap Százalékos gátlás Vinblasztin-3-karboxamid-szulfát ROS 0,1-0,5x10 23—84 GLS 0,05-0,8x8 47—100 4-Dezacetil-vinblasztin-3-karboxamid-szulfát GLS 0,15-1,0x10 79—100 ROS Pl534 (J) 0,15—0,4 x 10 49—100 4-Dezacetil-vinblasztin-3-N-(2'-butiriloxi-etil)-karboxamid(S. C.) 0,2-0,25x10 36—37-szulfát ROS 0,2x10 100 4-Dezacetil-vinblasztin-3-N-(2'-acetoxi-etil)-karboxamid-GLS 0,1-0,2x10 72—100-szulfát ROS 0,2 x 10 100 4-Dezacetil-vinblasztin-3-N-(2'-dimetoxi-etil)-karboxamid-GLS 0,05 x 0,2 x 10 37—100-szulfát GLS 0,1-0,2x7 83—100 4-Dezacetil-vinbIasztin-3-N-(2'-acetaldehid)-karboxamid-P388 0,05x10 40-szulfát P388 0,4 x 10 48 GLS 0,1-0,4x7—9 84—100 Amint ez a szakemberek élőit nyilvánvaló, ezen indol-dihidrolidol-származékok további észter- és/vagy amidcsoportjainak jelenléte miatt különösen óvatosan kell a sókat elkészíteni, nehogy az esetlegesen magas hőmérsékleten vagy szélsőséges pH-értékek mellett végzett műveletek során nemkívánatos mellékreakciók, például hidrolízis, átészterezés vagy más reakció játszódjék le. A vizsgálatok azt mutatták, hogy a találmány szerinti vegyületek hatékonyak in vivo körülmények között, egerekre átültetett daganatok ellen. így például a 4- -dezacetil-vinblasztin-3-N-(2'-butiriloxi-etil)-karboxamid-szulfát, a 4-dezacetiI-vinbIasztin-3-N-(2'-merkapto-etil)-karboxamid-szulfát, a 4-dezacetiJ-vinblasztin-3- -N-(2-dimetoxi-etil)-karboxamid-szulfát, a 4-dezacetiI-\inb]asztin-3-N-(2'-acetaldehid)-karboxamid-szulfát és a 4-dezacetil-vinbIasztin-3-N-(2'-akriliIoxi-etil)-karboxamid, valamint a találmány szerinti más vegyületek is ilyen hatást mutatnak. E hatás kimérésére általában intraperitoneális úton, a különböző dózisszinteken adagoltuk az egyes vegyületeket, a tumorral való beoltást követő 7—10 napon át. Az alább következő 1. táblázatban adjuk meg azon kísérleteink eredményeit, amelyek során átültetett daganatokkal fertőzött egereket sikeresen kezeltünk a találmány szerinti vegyületekkel. A táblázatban az első oszlopban feltüntettük az illető vegyület nevét, a 2. oszlopban az átültetett daganat fajtáját, a harmadik oszlopban a dózisszintet, ill. a dózisszint tartományát, és a vegyüld adagolásának időtartamát napokban kifejezve, és a negyedik oszlopban a daganat növekedésének százalékos gátlását, vagy a túlélési idő százalékos megnövekedését. Az alkalmazott rövidítések: ROS: Ridgeway ösztrogén-szarkóma GLS: Gardner limfoszarkóma B16: malanóma P388: limfocitás leukémia Pl533: leukémia 7
