180718. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szalicilsavat vagy sóit és gyógyászatilag alkalmas polimert tartalmazó vegyületek előállítására
17 18071,S 18 vagy pedig nem teljesen lejátszódó reakciók következtében vannak jelen. Például a poli(vinil-acetamid) hidrolízise gyakran nem kvantitatív. Elméletileg a csekély mennyiségű hidrolizálatlan maradék később alifás aminná hidrolizálható. Hasonló módon, a hidrolizált amidok egy csekély hányada esetleg nem lép reakcióba a Schotten-Baumann reakciónál. Ezek a csoportok jól diazotálhatók, és ekkor instabil alifás diazóniumsók képződnek, amelyek reagálhatnak a jelenlevő vízzel, és így alkohollá alakulnak, vagy a jelenlevő kloridionnal léphetnek reakcióba, s alkilkiorid képződik. Az is elképzelhető, hogy a diazotálás előtt az acetanilid hidrolízise nem megy kvantitatíve végbe, és ezért aromás amidok maradnak vissza kisebb mennyiségben. Mindenképpen tény az, hogy teljes biztonsággal ismerjük a túlnyomórészt jelenlevő elsődleges ismétlődő egységet. A polimerkémiai ismeretek alapján azonban valószínű, hogy kisebb mennyiségben olyan egységek is jelen lehetnek a makromoleulában, amelyeket nem szándékosan vittünk be. Ezeknek a lehetséges egységeknek a részarányát az 1. példában vázolt módon határozhatjuk meg. Az A) és B) pontban leírt reakciókat több alkalommal megismételtük, változtatva a poli(vinil-amin-hidroklorid) molekulasúlyát (például úgy, hogy M£s= = l,2xl05 értéket érjünk el) és fémkationként káliumot használva. C) Biológiai vizsgálatok Egy sor in vitro és in vivo vizsgálatot végeztünk annak érdekében, hogy a Bj pontban kapott polimer terméknek az emlősök gyomor-bél traktusában tapasztalható viselkedését bemutassuk. A polimer terméket patkányok belének alsó részében található mikroflórával hoztuk in vitro érintkezésbe, és megfigyeltük az azo-kötés anaerob körülmények között végbemenő reduktív hasadását. Frissen leölt patkány vakbelének tartalmát eltávolítottuk, vizes puflerközegben (VPI hígítószer) szuszpendáltuk, és nitrogén atmoszférában szűrtük. 5 ml sejtszuszpenziót (I g 25 mi-ben) hozzáadtunk menetes kupakkal ellátott kémcsőbe bemért 0,5 ml (1,0 millimól) benzilviologén (1 ,r-bisz(fenilmetiI)-4,4’-bipiridinium-diklorid) vagy desztillált víz és 2,5 ml polimer végtermékoldat elegyéhez. A kémcsövekbe néhány percig nitrogéngázt vezettünk, majd lezártuk a kémcsöveket és 48 órán át inkubáltuk a tartalmukat 35 "C-on. A kémcsövekből meghatározott időközökben mintát vettünk injekcióstü segítségével, és mértük az azo-csoport redukciójának előrehaladását a Xmax-értéknél a látható hullámhossztartományban fellépő extinkció csökkenése alapján. Megfigyeltük, hogy a benzilviologén festék távollétében - ez a redox folyamatot közvetítő anyag - a polimer vegyület azo-csoportjainak mintegy 50%-a redukálódott 6 óra alatt. Benzilviologén jelenlétében a polimerek azo-csoportjai nem egész két óra alatt teljesen redukálódtak a baktériumok hatására. Megfigyeléseink összhangban vannak a polimer azo-színezékek redukciójánál szerzett korábbi tapasztalatokkal. Ezeknél az irodalomban [Brown, J. P., Reduction of polymeric azo dyes by cell suspensions of enteric bacteria, Abstr. An. Meet. Amer. Soc. Microbiol., 123. oldal (1976)]; Brown, J. P., Wilcox, A. S. és MacMillan, J. M., The redox shuttle: A novel mechanism for the extra cellular reduction of azo and nitro xenobiotics by intestinal bacteria, Abstr. XII. Inter. Cong. Microbiol, München, 117. oldal (1978)] leírt vizsgálati eredményeket az 1. táblázatban hasonlítjuk össze saját eredményeinkkel. Úgy tűnik, hogy a kis molekulasúlyú anyagcseretermékek részt vesznek az azopolimerek bélbaktériumok hatására bekövetkező, sejten kívüli redukciójában. Ez olyan lebomlási mechanizmusra mutat, amely az aromás azo-csoportoknál attól függetlenül fellép, hogy milyen szerkezetű polimer tartalmazza az azocsoportokat. 5 10 15 20 25 30 35 1. táblázat A polimerhez kapcsolt 5-amino-szalicilsav és polimer festék patkány vakbélben élő baktériumok sejtszuszpenziójával anaerob körülmények között végzett redukciójának összehasonlítása Azo-csoportot tartalmazó polimer és mennyisége kémcsövenként Időpont, óra Polimer 5- --ASA Polimer azoszinezék 1,4 [xekv.+ 14 [xekv. l,5[Jtekv. 15 [xekv. — BZV +BZV-BZV-f BZV-BZV + BZV-BZV + BZV 0 3,56* 3,56 21,36 21,36 2,63 2,63 15,78 15,78 2 2,50 0 7,4** 74** 2,48 0 4,92 4,56 4 2,10 NM 7,8** 8,1** 2,32 NM 5,16** 4,35** 6 1,82 NM 7,5** 74** 2,12 NM 4,98** 3,90** 24 * * * NM * * * * * * * * NM * * * * Megjegyzések : •+ 1,0 uekv. azo-csoport/3,05 ml ^ 0,33 millimól. * A ?.max a felülúszóban a baktériumok ülepítése után. ** a baktériumokhoz kötődő színezék. *** a baktériumokhoz túlzott mértékben kötődő színezék. NM nincs mérési adat. 9
