180484. lajstromszámú szabadalom • Eljárás stabil, nagy mértékben immunogén, egy/vagy két jellemzőjében mutált, legyengített salmonella-baktérium mutánsok előállítására élő oltóanyagokhoz

15

180 484

16

utolsó antigén-beadás után 14 nappal történt az oriális terhelése 1.105 S. dublin (81) vadtörzs-csirá - val. A kísérleti adatok alapján az P-teszttel számított szignifikancia-küszöbércékeket szintén megadtuk a táblázatban. A táblázat adatai azt mutatják, hogy a kísérleti állatok az oriális úton beadott

oltótörzset igen jól tűrik; az immunizálási időt valamennyi állat túlélte. Kétszeri antigén-beadás esetén már 1010 csírának megfelelő adagokkal, négyszeri antigén beadás esetén pedig már 107 csírának 5 megfelelő adagokkal igen jó oltási védelem votl elérhető az egereimé1 *.

IV. Táblázat

Kétjellemzős Salmonella mutáns inununogenitása

Oltótörzs

Immunizáló

adag

Az immunizált

egerek száma

Az immunizálás folyamán elhullott egerek száma

A fertőzött egerek száma

A fertőzött egerek letal itása

Szignifikanciaküszöb a kontroli-csoporttal összehasonlítva

2-szer 1 • 1010

25

0

25

6

= 24%

<*<1,0%

2-szer 1 • 109

25

0

25

10- 40%

<*>5,0%

S. dublin

2-szer 1 • 108

25

0

25

7

= 28%

a<5,0%

(81)

2-szer 1 • 107

25

0

25

11

= 44%

a >5,0%

pur [ade]“

4-szer 1 • 1010

25

0

25

3

= 12%

<*<0,1%

tia“

4-szer 1 • 103 * * * 50 * * * * 55 * * * * 60 * * * * 65

25

0

25

5

= 20%

<*< 1.0%

4-szer 1 • 10"

25

0

25

6

= 24%

<*<1,0%

4-szer 1 • 107

25

0

25

6

= 24%

<*<1,0%

Kontroll

73

43

= 58,9%

Az V. táblázatban a kétjellemzős Salmonella dublin (81) pur[ade]“tia~ kétjellemzős mutánstörzzsel négyhetes borjakon elért immunizálás eredményeit foglaltuk össze. A borjakat négyhetes korban orálisan immunizáltuk a fenti törzzsel, majd 2—3 héttel azután orálisan terheltük az állatokat Salmonella dublin (81) virulens törzzsel :

V. táblázat

Kétjellemzős Salmonella mutáns immunogenitása

Immunizáló variánsok Kontroll

S. dublin (81) pur[ade]~tia“ S. dublin (81)

kétszer 25.109 élő egyszer 5.10° egyszer 5.1011

csírával orálisan élő csírával elő csírával

3 napos időközzel orálisan orálisan

2+/16 6 4/27 " 114-/15

(4- : elhullott állat)

A vadtörzselválaSztása az oltótörzsi ől

Az oltótörzsnek élő oltóanyagok alkalmazása esetén szükséges elválasztása az egyéb eredeti vadtörzsektől könnyen keresztülvihető, amint ezt az alábbi táblázat adatai mutatják. A táblázatban a Salmonella dublin (81) pur[ade]“tia“ oltólörzsnek vadtörzsekből, valamint az egyik jellemző tekintetében reverált törzsektől való elválasztását szén- - lélt etjük:

Amint a VI. táblázat adatai mutatják, a két jellemzőnek, a tiamin-auxotrófiának és a puiirauxotrófiának egyidejű kimutatása, illetőleg a két genetikai jellemző csupán egyikének meghatározása lehetővé teszi az oltótörznnek a vadtörzsektől való elválasztását. Minthogy az oitótörzs nem képez

esillókat, azonosítása lehetséges még a monospecifikus Hp-szérumban hiányzó H-agglutináció alap- 30 ján is.

VI. táblázat

Salmonella dublin elválasztása

J ellemző

Oltótörzs

Rever' jellemző: Vadtörzs táns

purin

tiamin

Tiamin--auxotrófia

4-— — 4-Adenin-auxotrófia

4-— 4- —

2b. példa

Salmonella typhi-murium S-alak his“155 pur

[ade]-4

1. jellemző: S-alak bis“ 155 (legyengítés ko-mutáció

50 útján) i. p. LD50 egéren: ~106’7 csira; a virulenciához való reverzió gyakorisága (lásd fentebb) :

<10“7 (reverzióprototrófiához ~10“8).

2. jellemző: pur[ade]“, (legyengítés metabolit korlátozott nyújtásával in vive, valamint pleiotrop

55 hatással); kapcsolva: (S-alak his“l554-purin-dependenciával i. p. LI)50 egéren: >108 csíra;

reverzió-gyakoriság pur[ade]“ prototrófiához:

~10“8 pur[ade]“ csíra.

Az S. typhi-murium his“155 pur[ade]“4 oltó-60 törzs mindkét jellemzőben való egyidejű reverziójának gyakorisága <10“15 nagyságrendű elméletiig-Az oltótöizs immunogenitását, valamint az 1.

legyengítő jellemzőnek az oltótörzsben való jelen-65 létét — a letális vádiörzs-fertőzéssel szembeni védő-8