180399. lajstromszámú szabadalom • Eljárás G- és V-penicillin előállítására
180.399 anyagcserééi törzsek alkalmazásával lehetséges.A gyors primer anyagcseréjü törzsek anyagcseresebességét a fermentáció során a tápanyagok adagolásával befolyásolhatjuk, minthogy a tápanyagok adagolási sebessége ezen törzseknél gyakorlatilag megegyezik a tápanyagok felhasználásának sebességével. A gyors primer anyagcseréid törzsek ipari értékét az adja meg, hogy mekkora anyagcseresebességet képesek elviselni anél* kül, hogy repressziós jelenségek révén bioszintézisük leállna. A 166.817 sz. magyar szabadalmi leírásban védett 00111 MNG szám alatt deponált gyors primer anyagcseréjü törzs 60-70 mg/ /100ml/ó szénforrás adagolási sebesség mellett 125-140 E/ml/óra bioszintézis sebesség elérésére volt képes 90-105 órás ferment ác lókban. Eljárásunk alapját az a felismerés képezi, hogy a LAR 0190 Pénicillium chrysogenum törzsünk 120-170 mg/100 ml/óra szénforrás adagolási sebességet visel el anélkül, hogy represasziós jelenségeket mutatna, 140 órás fermentációkban 150-180 E/ml/óra átlagos bioszintézis sebességet ér el, maximális bioszintézis sebessége eléri a 250 E/ml/óra értéket. A fenti tény az ez ideig ismertnél lényegesen intenzivebb technológia megvalósítását teszi lehetővé. E-technológia jellemző vonásai a következők: a. / Az eddig ismertnél magasabb induló táptalajkoncentráció /kisebb térfogat/, amiből a következő előnyök származhatnak:- növekszik a fermentáció kezdeti - a keverés szempontjából legkritikusabb - szakaszában a bekevert energia/térfogat ;- az adagolt tápanyagok bekeverési ideje csökken;- a megnövekedett adagolt térfogat következtében az adagolások pontossága növekszik. b. / Az eddiginél magasabb táplálási sebességek fenntartása, amiből a következő előnyök származnak:- a termékképződési sebesség növekszik;- a felhasznált szénforrás/képződött termék arány javul. A LAR OI9O jelzésű törzs előállítása a következő módon történt : A Pénicillium chrysogenum U-337 törzs spóraszuszpenzióját 0,05 % mustárnitrogén oldattal 45 percen át kezeltük, majd a túlélőket 10, 12, 14, 16, 18, 20 % laktózt tartalmazó Czapek-Dox táptalajon szélesztettük és inkubáltuk. A laktóz növekvő mennyisége nem csökkentette a túlélők számát. Ugyanakkor a koncentráció növekedésével párhuzamosan egyre több telep növekedése lassult le. Azokat a telepeket izoláltuk, melyek növekedése a magas laktózkoncentráció jelenlétében sem lassult le. Az igy nyert izolátumok közül választottuk ki a legjobban termelőt, a LAR OI90 jelzésű törzset, melyet a fenti eljárással 20 % laktózt tartalmazó táptalajról izoláltunk. A Pénicillium chrysogenum LAR 0190 törzset az alábbiakkal jellemezzük: A Czapek-agaron növesztett telepek 25 C-on 8-10 nap alatt 20-40 mm átmérőjűvé fejlődnek. A telepek leírása a következő: Középső részük kiemelkedik, a kiemelkedés oldalán sugárirányú barázdák futnak le a telep pereméig. A kiemelkedés központi része kráter-szerűen besüllyedt. A telepeket fehér micéliumsav szegélyezi, mely az inkubá» 2
