180287. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás a természetben előforduló ergolénvázas peptid-alkaloidok kinyerésére
180.287 A találmány szerinti eljárás értelmében maradékot valamely i-o szénatomos alkanolban oldjuk, majd hosszabb Ideig, előnyösen 20 órán át állni hagyjuk. Állas közben az ergolénvázas peptidalkaloidok. csaknem kvontltative job'oraf orgató epimerjelk alakjában, kristályosán válnak kl. A kristályokat szűrjük, mossuk, 3 zár ltjuk. Á kristályokat, amelyek még lényeges mennyiségű zsirszerxi szennyezést tartalmaznak ezután valamely zsiroldószerben szuszpendáíjuk, majd a már zsírtalanított kristályokat szűrjük, mossuk, szárítjuk. Zsiroldószerként egyaránt alkalmazhatunk valamely 2-8 szénatomszárau ketont, 4-8 szénatomszámu karbonsav-észtert vagy valamely 120 0° alatt forró szénhidrogént. Ketonként célszerűen metilizo-but i.lketont, karbonsavészterként célszerűen n-butliacetátot, szénhidrogénként előnyösen benzint vagy ciklohoxán t a 1 kaira z un k. A fentiekben leirt módon zsírtalanított jobbraforgató ergolénvázas peptid-alkaloidokat ily módon 95-99 %-os kitermeléssel, kristályos alakban kapjuk. Ergotamin tipusu drog feldolgozása esetében a találmány szerinti eljárás egy igen előnyös foganatosítás! módja szerint a drogot csak etil-acetáttal extraháljuk, majd az extralctumot minden további fázisváltás mellőzésével közvetlenül oldószernentesitjük, a maradékot valamely 1-6 szénatomos alkanolban, előnyösen metanolban oldjuk, a metanolos oldatot állni hagyjuk, majd a kristályosán kivált ergotaminlnt szűrjük, mossuk, szárítjuk, ezt követően metil-izobutil-ketonnal szuszpenzióban zsírtalanítjuk. A találmány szerinti eljárást az alábbi példák szemléltetik anélkül, hogy igényünkben ezekre korlátoznánk. A példákban megadott ergolénvázas vegyületeket az alábbiakban ismertetett analitikai módszerrel határoztuk meg. Drogextrakciói 2 g kisebb, mint 0,5 mm-es szemeseméretre őrölt anyarozshoz 25 ml etilacetátot és 1,5 ml 10 %-os ammóniumhidroxid-oldatot adunk. A rendszert 50 percig rázzuk. Az extraktumból a drogot kiszűrjük, majd az extrakciót kétszer 25 ml etilacetáttal megismételjük. Az extralctumokat egyesitjük, majd a továbbiakban a fermentlé extrakoiójánál leirt módon járunk el. Eermentlé extrakoiói 25 ml fermentlevet pH 8-8,5 értéken /lugositás tömény ammóniumhidroxid-oldattal/ 75 ml etilacetáttal 2 percig erőteljesen keverjük, majd a fázisokat ülepítő centrifugában szétválasztjuk. Az extrakciót kétszer 75 ml etilacetáttal megismételjük. Az etilacetátos fázisokat egyesítjük, majd vákuumban 50 ml-re besűrítjük. A sűrítményt vagy a drog extrakoiójánál nyert extraktumot négyszer 25 ml 5 tf% foszforsavat tartalmazó vízzel kirázzuk. A foszforsavas vizes extraktumokat egyesitjük, majd 8-8.5 pH-értéken /lugositás 10 %—os ammóniumhidroxid-oldattal/ háromszor 25 ml kloroformmal kirázzuk. A kloroformos fázist vízmentes nátriumszulfáttal megszárifcjuk, majd szárazra pároljuk. A maradékot 2 ml kloroform-metanol lil arányú elegyében oldjuk. Az oldatból az ergotamin és az ergokrisztin meghatározásánál 0,1 ml-t 5 cm széles, 20 cm hosszú szilikagél G rétegre, illetve az ergokornin és ergokriptin esetén 0,2 ml-t 60 E tipusu aluminiumoxid rétegre viszünk fel. A kromatogramot ergotamin és ergokrisztin esetén kloroform-etanol 90tl0 arányú elegyében, ergokornin és ergokriptin meghatározásánál dietiléter-n-butilacetát-i-butanol 4-,5*4-,5*0,625 arányú elegyében fejlesztjük ki. A kromatogramot szórt UV fényben ér4
