180210. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és berendezés enzimszubsztrátum koncentrációjának folyamatos meghatározására
130210 marad. A vénából jövő, oxigénszegény hemoglobin azonban azonnal oxigént vesz fel, amint abban a helyzetben lesz. Ez bizonyára a dializátorban megtörténik, mivel ott a raérőkörben oxigénnel telitett folyadék van, és a dializátoron belül a mérőköri oldalból a mintakor! oldal felé Og-diffuzió lép.fel. Ennek következtében a folyadék oxigénben elszegényedik. A hemoglobin blokkolása vagy oxigénnel történő telítése, mielőtt a dializátorba jut, a fennálló ráfordításokkal alig érhető el, mive'l a dializátorba való belépésnél az oldott oxigén koncentrációjának egyenlőnek kell lennie az adagolókor! pufferben lévővel. Egészen hasonló problémák, mint az előbb példaként említett esetben, számos más meghatározásnál szintén fellépnek, ha ezeket folytonosan végezzük. Alapjában véve fennáll az a lehetőség, hogy ezt a problémát kiiktassuk egy második detektor alkalmazásával, amely o rendszer meghatározandó komponensét a tulajdonképpeni analitikai reakció előtt méri. Számtalan esetben raeghiuául azonban ez azon a nehézségen, hogy két tökéletesen egyforma detektort állítsanak elő. Már a spektrofotometriában azon fáradoznak ezért, hoijy komplikált elrendezésekkel egy kétsugaras készülék mindkét fenyutját lehetőleg ismét egy érzékelőre irányítsák, jóllehet fotocellák még könnyebben összehangolhotók, mint más mérőkészülékek. Ez a probléma különösen ionérzékeny elektródoknál, oxigénelektródoknál, vezetőképesség-mé— róeeknél lép fel, valamint általában minden olyan detektornál, amelyek gyakorlatilag teljes pontossággal nem reprodukálhatók, mivel egy detektor a legnagyobb gondossággal történő gyártás esetén is mutat bizonyos különbségeket a többitől. De akkor is ha ez lehetséges, az az előnye lenne, hogy erre az összehangolásra igényelt ráfordításokat elkerülhetnénk. Ezt az oxigóneloktród példáján közelebbről meg kell magyarázni. Az ilyenfajta elektródok tulajdonságai a katód előtti membrán különböző C^-diffuziós ellenállásával változnak. így ezek feszültségről feszültségre különbözők, és a tapasztalat azt mutatja, hogy egyedül emiatt a jelnagyság 50 %-ig terjedő változásai léphetnek fel. További változások lépnek fel a többnyire poli-tetrafluor-etilénből álló membrán mikropórusainak szennyezések által való elzáródása miatt. Szerepet játszanak továbbá áramlásoktól függő különbségek a katód előtti határréteg-viszonyokban, az átfolyó kamrák kísérletről kísérletre változó gyártási eltérései vagy az elektródnak a kamrában egyik szerelésről a másikra változó elhelyezései. Végül különbségek lépnek fel a jel. a nullaáram, a meredekség linearitásában is, valamint dinamikus lökéscsillapitásban vagy telitési átmeneti karakterisztikában. Ehhez jön még az, hogy két különálló erősitővol rendelkező két detektor alkalmazása esetén a két erősítő közötti eltérések szintén növelik a hibanagyságot. A találmány feladatának alapjául szolgál, hogy a fent vázolt problémákat elhárítsa, és egy egyszerű eljárást és olyan » berendezést biztosítson, amely nagy apparativ vagy gyártási költségek nélkül lehetővé teszi egy enzimszubsztrát-koncentráció folytonos nyomonkövetését. * A találmány szerint ezt a feladatot egy enzimszubsztrátum koncentrációjának vizes folyadékban történő folyamatos meghatározására szolgáló olyan eljárással oldjuk meg, hogy a meghatározandó szubsztráturaot tartalmazó mintát egy pufferoldat-árambo vezetjük be, a szubsztrátumot egy immobilizált enzimen 2
