180210. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és berendezés enzimszubsztrátum koncentrációjának folyamatos meghatározására
180210 reagáltatjuk, és az oldatban ezáltal létrehozott változást mértjük egy merőka mrábanj az eljárást az jellemzi, hogy a meghatározandó mintát tartalmazó pufferoldat-áramot felváltva egyszer a mérőkararán egy referenciajel előidézése közben és egyszer először az immobilizált enzimen és utána a mérőkamrán egy mérőjel előidézése közben vezetjük át. A találmány szerinti eljárás mindig akkor alkalmazható előnyösen, ha az előállított mérőjel egy alapjelet illetve egy alapjel-vonalat igényel, és az alapjel-vonal nem állandó, hanem bizonytalan vagy ingadozó. Az eljárás egyik előnyös kiviteli alakja szerint csupán a sorrendet, amelyben a mintát tartalmazó oldat az immobilizált enzimen és a mérőkamrán áthalad, fordítjuk meg szabályos, lehetőleg rövid időközönként. A találmány szerinti eljárás 3orán ugyanazzal a mérőkamrával, például (^-elektróddal, ionérzékeny elektróddal vagy vezetőképességméréssel, csak időben eltolódva, mérjük az immobilizált enzim előtt a mérés által regisztrált anyagnak a tény-leges koncentrációját, amelyet az enzim is mindig befolyásol, és az immobilizált enzimmel történt érintkezés után a meghatározandó anyag reakciója által megváltozott tartalmat a merőanyagra, tehát például az oxigéntartalmat a vércukor oxidáció-' ja előtt és után. Egy anyag koncentrációjának folyamatos meghatározására szolgáló isjnert eljárásokkal szemben a találmány révén lehetséges, hogy folyamatosan egy bázismérővonalat kapjunk, és ezáltal a homérsékletváltozások, nyomásváltozások vagy áramlási sebesség-változások befolyásait is kiküszöböljük. Tehát szabà» lyos időközönként ismételten mindig rendelkezésre áll a bázismérővonal méréstechnikai vonatkoztatás céljára. A találmány eljárása az enzimszubsztrát-koncentrációnak a szó szoros értelmében véve nem a folytonos meghatározását teszi lehetővé, hanem folyamatos, de intermittáló meghatározást. Enzimszubsztrátum alatt értünk minden enzimetikus analitikai eljárással mérhető anyagot. Az "immobilizált enzim" fogalmat itt szokásos jelentésében használjuk. Hordozóhoz kötött enzimeket, kovalensen vagy adszorptive, zárványként, ragasztással vagy bepolimerizálással, térhálósitással immobilizált enzimeket és hasonlókat értünk alatta. Az immobilizált enzim por, granulátum vagy hasonló formában lehet, vagy•membránokon, rostokon vagy formatestek felületén lehet kötve. Az immobilizált enzim két előnyös alkalmazási, módja a pufferőIdatáramban elhelyezett, granulált, enzimatikusan aktiv anyaggal töltött enzimoszlop vagy az enzimszakasz, vagyis egy enzimatikusan aktiv felülettel rendelkező csővezeték. Az utóbbi esetben például olyan müanyagtömlök vagy csövek alkalmazhatók, amelyek például poliamidbol készültek, és amelyek felületén az enzim kovalens kötéssel vagy ragasztással van immobilizálva. 1 A találmány szerinti eljárás során mintaként például fiziológiás oldatok, vér vagy vizelet vagy kísérleti oldatok alkalmazhatók. Az eljárás különösen anyagcserefolyamatok ellenőrzésére és folyamatos áramok, például mikroorganizmusok táptalajai stb. összetételének ellenőrzésére alkalmas. A meghatározandó szubsztrátumot tartalmazó mintát előnyösen folytonosan az áramló pufferoldatba vezetjük. lehetséges azonban intermittáló bevezetést is .végezni, amelynek során a mintatérfogat löketszerűen vándorol a pufferoldatáramban. Egy erre a célra szolgáló berendezés például a 21 30 308 sz. német? 3
