179661. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antradén-bisz- karbonilhidrazon származékok előállítáásra
J 4 179661 amelyek azután 85 “C-on egyetlen erős szingulettet adnak 3,20 értéknél deutérium-oxidban. A kvadruplett hűtéskor újra megjelenik. 24 °C-on végzett vékonyrétegkromatografálás esetén két folt észlelhető. Hasonló a helyzet a későbbiekben ismertetendő 7., 8. és 14. példák szerint előállított vegyületek esetén. A 3. és 4. példa szerint előállított vegyületek ibolyántúli fénnyel felvett abszorpciós spektruma azt mutatja, hogy az antracéngvűrűhöz-közeli .kettőskötések kiszorultak a gyűrű síkjából. Az I általános képletű vegyületek előnyös csoportját alkotják a TI általános képletű vegyületek, amelyekben m, Y, R3, RJ, R5, R6, A, B és C jelentése a fenti. A találmány szerinti eljárással előállítható I általános képletű vegyületek rendszerint sárga színű, kristályos anyagok, amelyeknek jellemző olvadáspontjuk és abszorpciós spektrumaik vannak, illetve amelyek szokásos szerves oldószerekből, például rövidszénláncú alkano,lókból, dimetil-formamidból, tetrahidrofuránból vagy metil-izobutil-ketónból végzett átkristályosítás útján tisztíthatók. A találmány szerinti .eljárással előállított szabad bázisok nem toxikus savaddíciós sókat képeznek gyógyászatilag elfogadható szervetlen vagy szerves sóképző reagensekkel. így például előállíthatok a savaddíciós sók a szabad bázis és egy vagy több mólekvivalens sav reagáltatása útján, előnyösen valamilyen közömbös oldószerben. E célra savként például kénsavat, foszforsavat, hidrogén-kloridot, hidrogén-bromidot, szulfaminsavat, citromsavat, tejsavat, almasavat, borostyánkősavat, borkősavat, ecetsavat, benzoesavat, glükonsavat vágj aszkorbinsavat használhatunk, előnyös a hidrogén-klorid. A hatás szempontjából a szabad bázisok, illetve savaddíciós sóik egymással ekvivalensek. Az említett savaddíciós sók rendszerint kristályos anyagok, vízben, 5 metanolban és etanolban viszonylag jól, míg apoláros szerves oldószerekben, például dietil-éterben, benzolban vagy toluolban viszonylag rosszul oldódnak. A találmány szerinti eljárással előállított I általános képletű vegyületek mikroba-ellenes ágensek és ugyanit akkor igen széles antibakteriális hatásspektrumúak in vitro számos különböző standard laboratóriumi mikroorganizmussal szemben, miként ez a szokásos agar-agar diffúziós módszerre! kimutatható. E módszer gyakorlati kivitelezése során a minimális gátlási koncentrációt halé tárczzuk meg a kísérleti vegyület kétszeres hígításait vizsgálva agar-agarban. Mindegyik hígításból 1—1 ml-t bemérünk egy steril Petri-csészébe, majd mindegyik csészébe 9—9 ml agar-agart adagolunk. A későbbiekben megadott mikroorganizmusok „Trypticase Soy” meg- 20 nevezésű táptalajon készült, 5 órás tenyészeteit 10-2 arányban hígítjuk a táptalajjal, majd mindegyik tenyészet hígítását a Petri-csészékben levő agar-agar felületére felvisszük Steers-típusú ismétlő adagolót alkalmazva. 37 cC-on 24 órán át végzett inkubálást követően 25 a minimális gátlási koncentrációt megállapítjuk. A minimális gátlási koncentráció (MIC) a kísérleti vegyületnek az a legalacsonyabb koncentrációja, amely tökéletesen meggátolja valamelyik mikroorganizmus makroszkopikus növekedését. Néhány jellegzetes I általános 30 képletű vegyület MTC-értékeit az alábbi I. és II. táblázatokban adjuk meg. I. táblázat Mikroorganizmus MïC-értéke [rnikrogramm/ml] (b (2) (3) (4) (5) (6) Mycobacterium smegmatis ATCC 607 1 1 50 50 10 2,5 Staphylococcus aureus Rose ATCC 14 154 25 25 — 25 25 10 Streptococcus pyogenes C203 0,5 I 25 1 5 2,5 Enterobacter aerogenes 75 — — — — — — Escherichia coli 311 25 25 —»*» — 50 Klebsiella pneumoniae AD 100 — — — — — Proteus vulgaris ATCC 9484 — — — — — — Pseudomonas aeruginosa ATCC 10 145 50 — — — — — Salmonella enteritidis K—12 10 25 — — — — (1) l,r-[9,10-antrilén-bisz-(metilidin-nitri!o)]-diguanidin-dihidroklorid (a 3. példa termékével azonos). (2) 9,10-antracén-dikarboxa!dehid-bisz-(l,4,5,6-tetrahidro-2-pirimidiniI-hidrazon). (3) 9,10-antracén-dikarboxaldehid-diszemikarbazon (all. példa termékével azonos). (4) 9,10-antracén-dikarboxaldehid-bisz-{tioszemikarbazid). (5) l,l'-[9,10-antrilén-bisz-(metilidin-nitriIo)]-bisz-(3-benzil-guanidin)-dihidrojodid (a 6. példa termékével azonos). (6) 9,10-antracén-dikarbo\aldehid-bisz-(2-imidazo!in-2-il-metilhidrazon)-dihidrojodid. II. táblázat . Mikroorganizmus MlC-érték [mikrogramm/ml] a» (2) (3) (4) (5) (6) Mycobacterium smegmatis ATCC 607 10 100 2,5 10 5 0,1 Staphylococcus aureus Rose ATCC 14 154 — — 25 — — 2,5 Streptococcus pyogenes C203 25 — 0,5 10 — 0,1 Enterobacter aerogenes 75 — — — — — 25 Escherichia coli 311 — — — — — 25 Klebsiella pnemunoniae AD * — — — — — 25 2
