179599. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a C-15003 P-4 antibiotikum előállítására
5 179599 6 (G) kalcium-malát agar: G: közepes, halvány elefántcsont (2 ca )1 2 és szalmasárga (2 ea)1 közötti színű, korémiára emlékeztető alakzatok képződnek AM: közepes, fehér és halvány elefántcsont (2 ca)1 közötti színű SP: nincs (H) élesztőkivonat-malátakivonat agar: G: közepes, borostány (3 le)1 és élénk sárga (3 la)1 közötti színű, korémiára emlékeztető alakzatok képződnek AM: közepes, fehér és halvány elefántcsont (2 ca)1 közötti színű SP: nincs (I) zabliszt agar: G: közepes, halvány elefántcsont (2 ca)1 és gyarmati sárga (2 ga)1 közötti színű, korémiára emlékeztető alakzatok képződnek AM: gyér, fehér és halványsárga közötti színű SP: nincs (J) pepton-élesztőkivonat-vas agar G: közepes, gyarmati sárga (2 ga)1 színű AM: nincs SP: gyarmati sárga (2 ga)1 színű (K) tirozin agar: G: közepes, halvány elefántcsont (2 ca)1 és halvány sárgadinnye (3 ea)1 közötti színű, korémiára emlékeztető alakzatok képződnek AM: közepes, fehér és halvány elefántcsont (2 ca)1 közötti szinű SP: teveszínű (3 ie)1 1. = a színkódokat a Container Corporation of America amerikai egyesült államokbeli kiadó gondozásában negyedik kiadásként 1958-ban megjelent „Color Harmony Manual” című könyv alapján adtuk meg. 4. Fiziológiai jellemzők A törzs fiziológiai jellemzőit az alábbi 2, táblázatban adjuk meg. Növekedési hőmérséklettartományként ugyan 12—38 °C-t tüntetünk fel, ISP No.2 jelzésű agaron azonban kielégítő mértékű aeriális növekedés csak 20-35 °C hőmérséklettartományban megy végbe. 2. táblázat A C—15003 törzs fiziológiai jellemzői növekedési hőfoktartomány: 12-38 °C aeriális növekedési hőfoktartomány: 20-35 °C zselatin elfolyósítása: pozitív keményítő hidrolízise: pozitív nitrátok redukálása: pozitív tej peptonizálása: pozitív kazein elbontása: pozitív melanoid pigmentek elbontása: negatív (pepton-élesztőkivonat-vas-agar) pozitív (tirozin agar) xantin elbontása: pozitív hipoxantin elbontása : pozitív lysozymmel (könnyenzimmel) szembeni tolerancia: pozitív nátrium-kloriddal szembeni tolerancia: 2%. 5. Különböző szénforrások hasznosítása A különböző szénforrások hasznosítását Pridham és Gottlieb által ismertetett táptalajt [Journal of Bacteriology, 56, 107 (1948)], valamint azonos összetételű, de még 0,1% élesztőkivonatot is tartalmazó alapkompozíciót használva végezzük. A kapott eredményeket a 3. táblázatban adjuk meg. 3. táblázat Különböző szénforrások hasznosítása a C—15003 törzs által Szénforrás Növekedés Szénforrás Növekedés D xilóz + ++* raffinóz ± ±* Li-arabinóz 4-4-melibióz + + D glükóz 4-4-4-4-i-inozit — — D gal aktóz 4-+ D-szorbit — — D fruktóz + 4-+ ++ D-mannit 4-4-■HL ramnóz + 4-glicerin — + D mannóz +++ ++ oldható kemény 4-4 szacharóz ++ 4-4-kontroll — — laktóz — — maltóz ± 4-trehalóz + ++ *0 ,1% élesztőkivonatot tartalmazó alapkompozíció **' : burjánzás : jó növekedés ♦ növekedés ± : gyenge növekedés- : nincs növekedés 6. Egyéb jellemzők A sejteket a fenti 2. pontban ismertetett módon elkülönítjük, majd Marmur, J. és munkatársai [Journal of Molecular Biology, 3, 208 (1961)] módszerével analóg módon DNA-t preparálunk ki. A DNA G—C (guanin-citozin) tartalma vizsgálataink szerint mintegy 71 mól%. E törzs vegetatív micéliumának Gram-megfestése pozitív eredménnyel jár. A C-15003 törzs fentiekben ismertetett jellemzőit összehasonlítottuk Waksman, S, A. („The Actinomycètes”, 2. kötet, megjelent a The Williams and Wilkins Co. kiadó gondozásában 1961-ben), továbbá Buchanan, R. E. és Gibbons, N. E. („Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology”, 8. kiadás, megjelent 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65