179344. lajstromszámú szabadalom • Eljárás androsztán-17-on-származékok előállítására
7 179344 8 10 g így előállított 24-etil-30-metoximetoxi-5-kolesztént 4 g Teginnel és 300 ml vízzel 95 °C hőmérsékleten Ultra-Turrax-készülékben (Jahnke und' Kunkel, NSZK) 10 percen át emulgeálunk. Az emulziót 20 percen át 120 °C hőmérsékleten emuige áljuk. c) 20, egyenként 85 ml steril, 2,0% kukoricalekvárt, 0,3% diammóniumhidrogénfoszfátot és 0,25% Tagat 02-t tartalmazó, 6,5 pH-értékű táptalajt a fenti Mycobacterium előtenyészet 5—5 ml-ével beoltunk. A tenyészeteket 24 órán át 30 °C hőmérsékleten 220/perc frekvenciával rázatjuk. Ezután minden tenyészethez 14 ml 24-etil-3/3-metoximetoxi-5-kolesztén-szuszpenziót adunk, amely 0,5 g vegyületnek felel meg, és a rázatás közben végzett fermentációt 120 órán át, 30 °C hőmérsékleten folytatjuk. Az ld példában leírtak szerint feldolgozva a lombikok tartalmát, 2,1 g 3/3-metoximetoxi-5-androsztén-17-ont kapunk. Op.: 130-132 °C. 3. példa a) 10,5 g sztigmaszterint az le példában leírtak szerint átalakítunk, és így 10,75 g 24-etil-30-metoximetoxi-5,22-kolesztadiént kapunk. Az acetonból átkristályosított termék 103-104 °C-on olvad. b) A 2b példában leírt módszerrel 10 g 24-etil-30-metoximetoxi-5,22-kolesztadiént emulgeálunk. c) A 2a és 2c példában leírtak szerint 85 ml Mycobacterium spec. NRRL-B-3805 tenyészetet állítunk elő, és 14 ml 24-etil-30-metoximetoxi-5,22 - kolesztadién szuszpenziót adunk hozzá, ami megfelel 0,5 g anyagnak. További 120 órás 30°C-on végzett inkubálás és rázatás után a lombik tartalmát az ld példában leírtak szerint dolgozzuk fel. Ily módon 2,3 g 30-metoximetoxi-5-androsztén-17-ont kapunk. 4. példa a) 20 g koleszterint 300 ml formaldehid-dietilacetátban oldunk, keverés közben szobahőmérsékleten 30 g szilikagélt és részletekben 15 g foszforpentoxidot adunk hozzá. Ezután az oldhatatlan részt kiszűrjük, formaldehid-dietilacetállal mossuk és az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. A maradékot 0°C hőmérsékleten kikristályosítjuk. Nátriumhidrogénkarbonát-oldat hozzáadása után a terméket lesavatjuk, vízzel mossuk és így szárítás után 22,5 g 30-etoximetoxi-5-kolesztén keletkezik. Etilacetátból átkristályosítva a vegyület 64—66 °C-on olvad. b) A 2b példában leírtak szerint 10 g 30-etoximetoxi-5-kolesztént emulgeálunk. c) A 2a és 2c eljárások szerint 85 ml Mycobacterium spec. NRRL— B—3805-tenyészetet állítunk elő, és ehhez 14 ml 30-etoximetoxi-5-kolesztén-szuszpen ziót adunk, mely megfelel 0,5 g anyagnak. További 120 órás 30°C-on rázatással végzett inkubálás után a lombik tartalmát az ld példában leírtak szerint dolgozzuk fel. Ily módon 1,5 g 30-etoximetoxi-5-androsztén-17- -ont állítunk elő, melynek olvadáspontja 121—123 °C. 5. példa a) 38,67 g koleszterint 250 ml metilénkloridban és 164,2 g formaldehid-bisz-glikolmonometiléter-acetálban (előállítását lásd a 2 405 633 számú Német Szövetségi Köztársaság-beli nyilván osságrahozatali iratban) oldunk, szobahőmérsékleten történő keverés közben 60 g szilikagélt és 30 g foszforpentoxidot adunk hozzá, és 1 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Ezután az oldhatatlan anyagokat kiszűrjük, metilénkloriddal mossuk és metanolos káliumhidroxidoldatban semlegesítjük. Az oldószer vákuumban történő ledesztillálása után a maradékot metanolban felvesszük, szűrjük, és a terméket lassú bepárlással kikristályosítjuk. így 25 g 30-(2,5-dioxahexiloxi)-5-koIesztént kapunk, 'melynek olvadáspontja 41—42 °C. b) A 2b példában leírtak szerint 10 g 30-(2,5-dioxahexiloxi)-5-kolesztént emulgeálunk. c) A 2a és 2c példában leírtak szerint 25 ml Mycobacterium spec. NRRL-B-3805 tenyészetet állítunk elő, és 14 ml 30-(2,5-dioxahexiloxi)-5-kolesztén-szuszpenziót adunk hozzá, mely 0,5 g anyagnak felel meg. További 120 órás, 30 °C hőmérsékleten és rázatással végzett inkubálás után a lombik tartalmát az ld példában leírtak szerint dolgozzuk fel. Ily módon 1,75 g 3/3-(2,5-dioxahexiloxi)-5-androsztén-17-ont kapunk. Op.: 65-67 °C. 6. példa a) 12 g koleszterint 100 ml acetaldehid-dimetilacetálban szuszpendálunk, keverés közben szobahőmérsékleten 25 g szilikagélt és részletekben 12 g foszforpentoxidot adunk hozzá, és az elegyet 45 percen át szobahőmérsékleten kevertetjük. Az oldhatatlan anyagot kiszűrjük, metilénkloriddal mossuk és az oldatot metanolos nátriumhidroxid-oldattal semlegesítjük. Az oldószert vákuumban ledesztilláljuk, majd a nyers terméket aktívszén hozzáadásával, acetonból átkristályosítjuk. Ily módon 10,2 g 30-0 -metoxietoxi)-5-kolesztént kapunk, melynek olvadáspontja 94-95 °C. b) A 2b példában leírt körülmények között 10 g 30-(l -metoxietoxi)-5-koIesztént emulgeálunk. c) A 2a és 2c példákban leírtak szerint 85 ml Mycobacterium spec. NRRL-B-3805 tenyészetet állítunk elő, melyhez 14 ml 30-(l-metoxietoxi)-5-kolesztén-szuszpenziót adunk, amely 0,5 g anyagnak felel meg. További 120 órás, 30 °C hőmérsékleten és rázatás közben végzett inkubálás után a lombik tartalmát az ld példában megadottak szerint dolgozzuk fel. Ily módon 1,89 g 30-(l-metoxietoxi)-5-androsztén-17-ont kapunk. Op.: 111—118 °C. 7. példa a) 19,33 g koleszterin 200 ml metilénkloridos oldatához 23,6 ml viniletilétert és 86 mg p-toluolszulfonsavat (vízmentes) adunk és az elegyet 1,5 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Nátriumhidrogénkarbonát-oldattal történő semlegesítés után nátriumklorid-oldattal extraháljuk, nátriumszulfáttal szárít5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
