179041. lajstromszámú szabadalom • Eljárás C-076 vegyületek és azokat tartalmazó féregírtószerek előállítására
5 179041 6 oldható pigment: világosbarna zselatin elcseppfolyósodás: jó Zselatin darabok: vegetatív növekmény: barna gyűrű légmicélium: nincs oldható pigment: zöldes barna zselatin elfolyósodása: teljes Fölözött tej agar vegetatív növekmény : sötétbarna légmicélium: nincs oldható pigment: sötétbarna kazein hidrolízise: jó 5 10 15 20 Lakrnusz tej vegetatív növekmény: légmicélium: szín: koaguláció és/vagy peptonizálás, lúgossá válik (pH = 8,1) sötét barna gyűrű növekmény qincs sötétbarna 25 Fölözött tej vegetatív növekmény: sötétbarna gyűrű növekmény légmicélium: nincs oldható pigment: sötétbarna koaguláció és/vagy peptonizálás: teljes peptonizálás, lúgossá válik (pH = 8,0) 30 35 Hőmérsékleti intervallum: (élesztő extraktum-dextróz + sók agar) 28 °C jó vegetatív növekedés és légmicéliumok 40 37 C jó vegetatív növekedés és légmicéliumok 50 °C nincs növekedés oxigén szükséglet: „stáb” tenyészet élesztő extraktum-dextróz+ sók agarban, aerob. 45 Az értékeket három hét után jegyeztük fel 28 C-on, hacsak nincs másképp feltüntetve. Valamennyi közeg pH-ja hozzávetőlegesen semleges (6,8—7,2). A színek számmal való jelölése a Color Harmony Manual, 1958, 4. kiadás Container Corpo- 50 ration of America, Chicago, Illinois-kézikönyvből származik. Ha a fenti adatokat összevetjük például a Bcrgcy’s Manual of Determinative Bacteriology (8. kiadás) adataival azt látjuk, hogy az ott leírt mikro- 55 organizmusok tulajdonságai lényegesen eltérnek és így a jelen mikroorganizmust új speciesnek kell definiálni. Ennek alapján az új mikroorganizmust Streptomyces avermitilisnek neveztük el. A fenti leírás a Streptomyces avermitilis törzs 60 jellemzőit tartalmazza, amely a C-076 vegyületek előállításához használható. A találmány kiterjed a fenti mikroorganizmus mutánsainak alkalmazására is. Így például a C-076 termelő mutánsok felhasználása melyeket természetes szelekcióval vagy különböző 65 módon, például Röntgen sugárzással, ultraibolya besugárzással, nitrogén mustárral vagy hasonló kezeléssel kapunk, is beletartoznak a találmány körébe. Az egyik ilyen organizmus például a Streptomyces avermitilis MA 4848 törzs, amelyet Streptomyces avermitilis MA 4680 ultraibolya fénnyel való besugárzása után izolálunk. A törzs liofilizált tenyészetét tartalmazó kémcsövet és megfagyott ampullát az American Type Culture Collection állandó gyűjteményében deponáltuk és a 31 272 és a 31 271 deponálási számot kapták. Kissé nagyobb fermentációs termelést kaptunk, ha ezt a megfagyott törzsoldatot használjuk inoculumként. C—076 vegyületeket kapunk, ha megfelelő vizes táptalajokat a következő feltételek mellett aerob fermentálunk Streptomyces avermitilis termelő törzs segítségével. A C-076 előállítására sok más antibiotikum előállításánál használt vizes táptalaj alkalmas. Az ilyen táptalaj olyan szén- és nitrogénforrást tartalmazhat, melyeket a mikroorganizmus képes asszimilálni és általában kevés szervetlen sót is tartalmaz. Ezen felül a fermentációs közeg a mikroorganizmus növekedéséhez szükséges fémnyomokat is tartalmazhat. Ezek rendszerint kielégítő koncentrációban vannak jelen a szén és nitrogén komplex forrásokban, melyek táptalaj forrásként szolgálnak, de természetesen kívánt esetben külön is hozzáadhatok a táptalajhoz. A táptalaj asszimilálható szén forrásai rendszerint szénhidrátok, például cukor, dextróz, szacharóz, maltóz, laktóz, dextrán, cerelóz, stb. és a keményítők. A táptalajban hasznosított szénforrás pontos mennyisége részben attól függ, hogy milyen más komponensek vannak jelen a táptalajban, de rendszerint azt találjuk, hogy a szénhidrát előnyösen 0,5-5 súly% mennyiségben van jelen a táptalajban. A szénforrásokat vagy külön, vagy kombinálva alkalmazhatjuk egy táptalajon belül. Nitrogénforrásként használhatunk élesztő hidrolizátumokat, élesztő autolizátumokat, szójabablisztet, kazein hidrolizátumokat, élesztő extraktumokat, kukoricalekvárt, desztillációs maradékot, gyapotmag lisztet, hús extraktumot stb., amelyeket a Streptomyces averiritilis könnyen asszirrilál a C-076 vegyületek előállításakor. A különböző nitrogénforrásokat egyedül vagy kombinációban használhatjuk 0,2-6 súly% mennyiségben. A táptalajban alkalmazható táp szervetlen sók a szokásos sók, amelyek nátriumot, káliumot, magnéziumot, ammóniumot, kalciumot, foszfátot, szulfátot, kloridot, karbonátot és hasonló ionokat szolgáltatnak. Nyomelemek lehetnek például kobalt, mangán, vas stb. Meg kell jegyezni, hogy a következőkben leírt táptalajok csak példaképpen szolgálnak és nem korlátozó jellegűek. A C-076 vegyületek előállítására alkalmas Streptomyces avermitilis törzsek tenyésztéséhez megfelelő táptalajok: A táptalaj kukoricaliszt 20,0 g desztillációs maradék 10,0 g szójabab üszt 15,0 g nátrium-citrát 4,0 g 3
