178342. lajstromszámú szabadalom • Eljárás magas-protein tartalmú bio-anyagok előállítására
3 178342 4 lesz, míg folyékony közegben történő tenyésztéskor, bizonyos körülmények között, a pseudomyceláris forma dominál, amely az átlátszatlan redős sejteknek felel meg. Spórát nem képez. A fentiek alapján a törzset a Candida nemzetséghez tartozónak találtuk, J. Lodder, ed.: The Yeasts: a taxonomic Study, 1970. osztályozása alapján. Az SP M 180 cc törzset a Northern Regional Research Center of Peoria törzsgyűjteményében deponáltuk, Y 11 062 szám alatt. A törzs fiziológiai jellemzői az alábbiak : 1. Néhány szénforrás hasznosítása : D-glükóz + D-galaktóz — Szacharóz — Maltóz — Trealóz-Laktóz — 2. Növekedés: D-glükóz + D-galaktóz — 1-szorbóz — Szacharóz — Maltóz-Cellobióz + Trealóz-Laktóz — Melibióz — Raffinóz-Melezitóz — Inulin _ Keményítő — D-xilóz + 1-arabinóz + D-arabinóz — D-ribóz + (gyenge) 1-ramnóz — etanol + glicerin — eritritol — ribitol + galaktikol — D-mannit + D-glucit 4-Laktánsav — borostyánkősav — Citromsav — Inozit — Nitrát — Vitamin nélkül — 37 °C-on 4- (gyenge). Az SP N 180 cc törzs fiziológiai tulajdonságainak összehasonlítása az előbb említett Lodder tanulmány, ban felsoroltakkal, valamint a „A new Key to the Yeasts” című J. A. Barret and R. J. Pankhurst, 1974. kiadványban említettekkel, azt mutatta, hogy az SP M 180 cc törzs az összes fajtától különbözik, mely ezekben a könyvekben le van írva. A műszaki és szabadalmi irodalom eddig is sok élesztőfajtát tett közzé, mely képes metanolt felhasználni (cf. C. L. Cooney and D. W. Levine a „Single-Cell Protein II — MIT Press, 1975. című munkában), de az SP M 180 cc törzs tulajdonságai a feltalálók által ismert összes törzsekétől különböznek. A törzs „sui generis” tulajdonsága, hogy a metanolt hatékonyabban asszimilálja, mint az etanolt. A törzs mind szakaszos, mind folyamatos tenyészetben alkalmazható, azonban a folyamatosan tenyésztett törzsek tulajdonságai jobbak. Ráadásul pseudomycelium-képzése következtében olyan tenyészetet nyerünk, mely igen könnyen ülepszik : ez a tulajdonsága úgy használható ki, hogy a táptalajt visszatáplált vagy reciklizált bio-anyagon vezetjük keresztül, ennek eredményeként időegység alatt nagyobb a hozam. A jó ülepedés egyszerűbbé és könnyebbé teszi a bio-anyag összegyűjtését. A gyakorlatban úgy járunk el, hogy az esszenciális elemeket (N, P, K, Mg, Fe, Ca), a növekedési faktort (élesztőkivonat és biotin), ásványi nyomelemeket és szén- és energiaforrásként metanolt tartalmazó táptalajt beoltunk az SP M 180 cc törzzsel. A táptalajt keverés mellett 20 és 35 °C közötti hőmérsékleten, előnyösen 30—33 °C-on inkubáljuk, a pH-t 2,5 és 6,5 között, előnyösen 4—4,5 között tartjuk, és folyamatosan oxigéntartalmú gázelegyet, például levegőt táplálunk be. A felszaporodott élesztősejteket ülepítéssel és szűréssel elválasztjuk, vízzel mossuk, és melegítéssel szárítjuk. Az így nyert bio-anyagok önmagukban táplálék- és takarmány protein-adalékként használhatók, vagy például proteinek, aminosavak és nukleosavak nyerhetők ki belőlük. A találmányt az alábbi példákban részletesen ismertetjük. 1. példa 500 ml-es Erlenmeyer lombikokba az alábbi 50 ml térfogatú táptalajt töltjük: kh2po4 2,0 g/liter NaH2P04.H20 2,0 g/liter (NH4)2so4 5,0 g/liter MgS04.7 H20 0,2 g/liter FeS04.7 H20 2,0 mg/liter CaCl3 2,0 mg/liter ZnS04.7 H20 2,0 mg/liter Élesztőkivonat 200,0 mg/liter Biotin 25,0 {xg/litei Nyomelem-oldat 1 ml/liter. A nyomelem-oldat, melyet híg sósavval készítettünk (1 ml tömény HC1 egy liter vízben), az alábbi összetételű: CuS04.5 H20 200 mg/liter H3BO3 500 mg/liter MnS04.H20 500 mg/liter KJ 10 mg/liter CoCl2.6 H20 10 mg/liter M0O3 10 mg/liter A táptalaj pH-ját 5,0-ra állítjuk be, a lombikot 116 °C-on 20 percig sterilizáljuk. Két lombikba 0,75 ffl* (1,9 térfogatszázalék) metanolt adunk, majd a loffl' bikok tartalmát beoltjuk Candida NRRL Y 110® 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
