178084. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás natív vindolin katarantin 3,4,-anhidro-vinblastin, leurozin, és egyéb diindol alkaloidok kinyerésére vinca rosea l drogból
3 178084 4 anyalúgból iparilag hasznosítható mennyiségben lehet vindolint, katarantint, további tekintélyes menynyiségű leurozint, valamint a drogból eddig még elő nem állított 3’4’-anhidro-vinblasztint kinyerni. Az előállított 3’4’-anhidro-vinblasztin ismert módon leurozinná epoxidálható: 1 kg levéldrogból ily módon összesen mintegy 0,4-0,5 g leurozin, kb. 0,4 g katarantin és 0,8 g vindolin állítható elő. A nyeredék az eddigi eljárásokkal kinyert alkaloid mennyiséghez képest többszörös, ami az anyagok terápiás jelentőségét és világpiaci árát tekintve igen komoly előnyt jelent. À találmány tárgya új eljárás natív vindolin, katarantin, 3\4’-anhidro-vinblasztin leurozin és kívánt esetben vinkrisztin, vinblasztin, 4-dezacetoxi-vinblasztin kinyerésére, valamint az N-dezmetii-vinblasztinnak vinkrisztinné alakított formában való kinyerésére Vinca rosea L. drogból a növény leveleinek extrakciőja, az extraktum fáziscserés módszerekkel való tisztítása, majd a szerves fázis bepárlása, a bepárlási maradékból a leurozin, vinblasztin és vinkrisztin főtömegének, valamint a 4-dezacetoxi-vinblasztinnak, és N-dezmetil-vinblasztinnak szulfát-só keverék formában történő leválasztása, a sókeverék, valamint a sókeverék elkülönítésénél kapott anyalúg feldolgozása útján, oly módon, hogy a Vinca rosea L. drog extrakcjóját 1-5 szénatomos alkohol, 1—5%-os vizes kénsavvagy borkősavoldat és toluol elegyével — mely elegyben a komponensek %-os aránya előnyösen 1 :0,25 :5 vagy ettől ± 15%-ban bármely komponens tekintetében eltérő. — végezzük, adott esetben a fázisok elválasztása után a vizes fázist ismételten toluollal extraháljuk, majd a toluolos kivonatoktól az alkaloidokat ismert módon vizes savoldatba, majd adott esetben klorofill-mentesítése irtán 5,5—10 pH közötti értéken szerves oldószerbe oldjuk át, a kénsavas só formájában leválasztható alkaloidokat ismert módon leválasztjuk, majd a) a szulfátsókeverék izolálásánál nyert anyalúg pH értékét 5,5—10-re állítjuk be, ezt követően az oldatot vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel extraháljuk és az extraktumból részlegesen dezaktivált alumíniumoxidon végzett kromatografálással a vindolin, katarantin, 3’4’-anhidro-vinblasztin valamint leurozin komponenst kinyerjük, vagy b) a sókeverék izolálásánál nyert anyalúgbói 2,5-3,5 pH tartományban a vindolint, 5—6 pH tartományban pedig a katarantint, a 3’4’-anhidro-vinblasztint és a leurozint benzollal vagy benzol-homológgal extraháljuk és az utóbbi extraktumból bi)'a leurosin és 3’4’-anhidro-vinblasztin keverékét kristályosítással kinyerjük, majd e keveréket önmagában ismert módon epoxidáljuk, vagy a keveréket részlegesen dezaktivált aJumíniumoxidon kromatografálva komponenseire bontjuk és a 3’4’-anhidro-vinblasztin komponenst epoxidáljuk, továbbá a kristályos keverék elkülönítésénél nyert anyalúgból a katarantint kinyerjük vagy b2) a katarantint, a 3’4’-anhidro-vinblasztint és leurozint tartalmazó extraktumot részlegesen dezaktivált alumíniumoxidon végzett kromatografálással komponenseire választjuk szét. A találmány szerinti eljárás értelmében a levéldrogot oldószereleggyel extraháguk. Az elegy egyik komponense 1-5 szénatorhos alkanol, mint amilyen a metanol, etanol, izo- és n-propanol, butanol, stb. Előnyösen metanolt alkalmazunk. Az 1-5 szénatomos alkanolnak vizes savoldattal, célszerűen néhány %-os vizes kénsav- vagy borkősavoldattal és benzollal vagy más benzolhomológgal, előnyösen toluollal alkotott elegyével végezzük az extrakciót. Az elegy komponenseinek aránya előnyösen 1 :0,25 :5, vagy ettől ± 15%-ban eltérő. Az alkaloidokat adott esetben ismételt toluolos extrakció után a toluolból vizes savoldatba oldjuk át, majd adott esetben az alkaloidok mellől a klorofillt és egyéb színező anyagokat szerves oldószenei, előnyösen benzollal kiextraháljuk. A klorofillmentes alkaloid oldatot ezután 5,5-10 pH közötti, előnyösen 8,5—9 pH értékig lúgosítjuk. majd az alkaloidokat szerves oldószerbe, pl. benzolba vagy benzolhomológba, vagy valamely klórozott szénhidrogénbe átoldjuk és az oldatból a diindol alkaloidok főtömegét pl. a 160 967 sz. magyar szabadalmi leírás szerint savaddíciós, előnyösen kénsavaddíciós só formájában kicsapjuk. A kapott sókeverékből az egyes diindolalkaloidokat önmagában ismert módon kinyeijük. így a vinkrisztin, leurőzin és vinblasztin pl. a 160 967 sz. magyar szabadalmi leírás szerint nyerhető ki. Eljárhatunk azonban a 851 345 sz. belga szabadalmi leírás szerint úgy is, hogy diindol-alkaloidok savaddíciós sóinak, előnyösen szulfátsóinak keverékét valamely szerves oldószerben célszerűen acetonban vagy valamilyen 1—5 szénatomos alifás alkoholba, előnyösen metilalkoholban oldjuk. Az oldást 0° és 50 °C közötti, célszerűen szobahőmérsékleten végezzük. Az oldatból valamely bázissal, mint például monoetilaminnal, dietilaminnal vagy piridinnel a diindol-alkaloid-bázisokat felszabadítjuk. A leurozinbázis az oldatból 0—25 °C-on kiválik. A kivált leurozin-bázis elválasztásánál kapott anyalúgot csökkentett nyomáson bepároljuk. A bepárlási maradékot valamely szerves oldószerben, célszerűen valamely benzolsorbeli szénhidrogénben, mint például benzolban, toluolban vagy xilolban, előnyösen benzolban oldjuk,'miközben a diindol-alkaloidok felszabadításához használt szerves bázis szulfátja (monometilamin, dietilamin, piridin) az oldatból kiválik, amelyet eltávolítunk, a szüredéket 3,7-4,3, előnyösen 4 ± 0,1 pH értékű foszfát puffer-oldattal kivonatosuk. A savas vizes extraktumokat egyesítjük, majd valamely savval, előnyösen foszforsawal az oldat pH értékét 3,5-4,1, előnyösen 4,0±0,l-re állítjuk be. Az így kapott savas vizes oldatot valamely klórozott szénhidrogénnel, előnyösen metilénkloriddal extraháljuk, a metilénkloridos extraktum bepáriásával a vinblasztint kinyerjük. A vizes fázisból a pH 7,5-10-re, előnyösen 8,5-9-re való beállítása után vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel, célszerűen valamely klórozott szénhidrogénnel a vinkrisztint, N-dezmetil-vinblasztint és 4-dezacetoxi-vinblasztint extraháljuk. Az alkaloid elegyet formilezve az N-dezmetíl-vinblasztint vinkrisztinné alakítjuk és a 3 komponensűvé alakított alkaloidkeverék pH értékét 7,5-10 közötti értékre állítjuk, nugd az alkaloidokat szerves oldó5 0 *0 15 Í0 35 40 45 50 155 i60 65 2
