178001. lajstromszámú szabadalom • Eljárás morfinszerű hatással rendelkező új pentapeptidek és származékaik előállítására
11 178001 12 dium katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. A reakció végén a katalizátort szűréssel eltávolítjuk, majd az oldatot bepároljuk. A páriási maradékot feloldjuk 2 ml etanol és 2 ml etüacetát elegyében, hozzáadunk 0,9 g (lOmmól) oxálsavat, és 50 ml etilacetáttal hígítjuk. A kivált terméket szűrjük, etilacetáttal mossuk és szárítjuk. 2,7 g (62%) cím szerinti tripeptid-etilamid-oxalátot nyerünk. Op.: 98-100°, R? 0,4-0,5. 2. lépés: Utirozü-D-me tionil-glicil-L-fenilalanil-L-prolin-etilamid 0,9 g (2 mmól) tripeptid-etilamid-oxalátot (9. példa, 1. lépés) 3 ml piridinben feloldunk, hozzáadunk 0,86 g (2 mmól) Boc—D—Met-OTCP-t és 0,56 ml (4 mmól) trietilamint, majd éjszakán át állni hagyjuk. A reakcióelegyet bepároljuk, 30 ml etilacetátban feloldjuk, 0,5 n kénsavval mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfáton való szárítás után bepároljuk. A maradékot (R* 0,80—0,85) 10 ml 3 n etilacetátos sósavval leöntjük, fél óra után az elegyet 30 ml n-heptánnal hígítjuk, és a kivált csapadékot kiszűrjük, n-heptánnal mossuk és vákuumban kálium-hidroxid mellett szárítjuk. Az így nyert terméket 5 ml piridinben feloldjuk, és hozzáadunk 1,06 g (2 mmól) Boc-Tyr-OPCP-t, vala-' mint 0,56 ml (4 mmól) trietilamint. A reakcióelegyet éjszakán át állni hagyjuk, majd bepároljuk, 50 ml etilacetátban feloldjuk, 0,5 n kénsavval mossuk, és vízmentes nátrium-szulfáton való szárítás után bepároljuk. A maradékot (Rf 0,85—0,90) 3 ml trifluorecetsavban feloldjuk, és fél órán át állni hagyjuk. A csapadékos oldatot bepároljuk, és a maradékot etilacetát-benzol 1 :1 arányú elegyével eldörzsöljük. Az így nyert terméket feloldjuk 5 ml 10%-os nátrium-karbonát és 50 ml etil-acetát elegyében, a vizes fázist 3-szor 10 ml etilacetáttal kirázzuk, majd az egyesített etüacetátos oldatokat vízmentes nátrium-szulfáton való szárítás után bepároljuk. A páriási maradékot n-heptán-etflacetát 1 :1 arányú elegyével eldörzsöljük, szűrjük, a fenti eleggyel és n-heptánnal mossuk, majd szárítjuk. 1,02 g (80%) cím szerinti pentapeptid-etilamidot kapunk. Rf 0,45-0,55. Aminosav analízis: Pro = 1,0, Gly = 1,0, Met = 0,98, Tyr = 1,02, Phe = 1 (vonatkoztatási alap). 10. példa L-Tirozil-D-metionil-glicil-L-fenilalanil-L-prolin-amid előállítása 0,96 g (3 mmól) H-Gly-Phe-Pro-OH-t (5. példa, 1. lépés) 5 ml piridinben szuszpendálunk, és 0,42 ml (3 mmól) trietüamin, valamint 1,27 g (3 mmól) Boc-D-Met-OTCP hozzáadása után oldódásig keverjük, majd éjszakán át állni hagyjuk. A reakcióelegyet a 4. példa 1. lépésében leírt módon dolgozzuk fel. A páriási maradékként kapott anyagot (R? 0,30—0,35) 10 ml 2 n etilacetátos sósavval leöntjük és keverjük. Fél óra után a reakcióelegyet n-heptánnal hígítjuk, majd szűrjük, n-heptánnal mossuk és vákuumban kálium-hidroxid mellett szárítjuk. Az így nyert terméket (Rf 0,16-0,24) 5 ml piridinben szuszpendáljuk, és 0,84 ml (6 mmól) trietilamin, valamint 1,32 g (2,5 mmól) Boc—Tyr—OPCP hozzáadása után oldódásig keverjük, majd éjszakán át állni hagyjuk. A reakcióelegyet a 4. példa 1. lépésében leírt módon dolgozzuk fel. A páriási maradékot n-heptánnal eldörzsöljük, szüljük, n-heptánnal mossuk és szárítjuk. Az így nyert Boc—Tyr—D—Met—Gly—Phe—Pro—OH-t (Rf 0,60-0,66) 5 ml dimetilformamidban feloldjuk és hozzáadunk 0,52 g (2,5 mmól) diciklohexil-karbodiimidet, valamint 0,4 g (2,5 mmól) 1-hidroxi-benzotriazol-ammónia-sót. [Utóbbi előállításánál úgy járunk el, hogy az 1-hidroxi-benzotriazol tömény vizes ammóniával készült oldatát (0,5 g/ml) acetonnal hígítjuk, majd a kivált kristályokat kiszűrjük, acetonnal mossuk és szárítjuk.] Az amidálási reakcióelegyet éjszakai állás után szűrjük, bepároljuk, a páriási maradékot metilén-kloridban feloldjuk, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonáttal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton megszárítjuk, majd bepároljuk. A páriási maradékot (Rf 0,53-0,58) 10 ml trifluor-ecetsavban feloldjuk, és 30 percig szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd bepároljuk és a maradékot (Rf 0,50—0,60) vákuumban kálium-hidroxid mellett szárítjuk. Az így nyert terméket feloldjuk 30—40 ml 3:1 arányú kloroform-n-butanol-elegyben és 5—7 ml vízben. A vizes fázist szilárd nátrium-hidrogén-karbonáttal semlegesítjük, a fenti kloroform-n-butanol-eleggyel kivonjuk, majd az egyesített szerves fázisokat bepároljuk és a maradékot n-heptánnal eldörzsöljük. 1,25 g cím szerinti terméket kapunk, amely D’Amour és Smith [J. Pharm. Ther. 72, 74 (1941)], illetve Chermat és Simon [J. Pharmacol. (Paris) 6, 489 (1975)] módszerével végzett vizsgálataink szerinti in vivo kb. ötvenszer hatásosabb, mint a morfin. Aminosav analízis: Pro =1,0, Met= 1,0, Gly = 1,0, Tyr = 0,98, Phe = 1 (vonatkoztatási alap). 11. példa L-Tirozil-D-alanil-glicil-L-fenilalanil-L-prolin-amid előállítása 2,06 g (3 mmól) Z-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Pro -OH-t (5. példa, 3. lépés) 5 ml dimetilformamidban feloldunk és hozzáadunk 0,46 g (3 mmól) 1-hidroxi-benzotriazol-ammónia-sót, valamint 0,62 g (3 mmól) diciklohexil-karbodnmidet. A reakcióelegyet éjszakán át állni hagyjuk, majd szűrjük és bepároljuk. A páriási maradékot metilén-kloridban feloldjuk, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonáttal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A páriási maradékot (Rf 0,60-0,65) 40—50 ml metanolban feloldjuk és palládium katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. A reakció végén (Rf 0,33-0,38) a katalizátort kiszűrjük, az oldatot bepároljuk és a maradékot éterrel eldörzsöljük. 1»2 g (70%) cím szerinti terméket kapunk. Aminosav analízis: Pro = 1,0, Gly = 1,0, Alá = 1,0, Tyr = 0,97, Phe = 1 (vonatkoztatási alap). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
