177885. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polién makrolidok N-glükozil-származékai N-metil-glükominsóinak előállítására
5 177885 6 Polién makrolidok N-glükozil-származékainak nátriumsóit, továbbá TRISZ-szel (2-amino-2-hidroximetil-1,3-propándiol) és imidazollal alkotott sóit az 1 387 187 számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban ismertetik. A TRISZ- és az imidazolsókat jellemzőik miatt gyógyászati célokra nem használják, míg a polién makrolidok N-glükozil-származékai nátriumsóinak injektálható oldatok formájában való alkalmazása nehéz ezen oldatok magas pH-jára való tekintettel. Sőt, e nátriumsók vizes oldatokban éppen a magas pH következtében labilisak, és a megfelelő gyógyászati készítmények biológiai aktivitása magához a megfelelő N-glükozil-származékhoz képest csökkent mértékű. A nátriumsó infravörös spektrumában a laktongyűrű jelentős mértékű bomlása észlelhető. E nátriumsókhoz képest a polién makrolidok N-glükozil-származékai N-metil-glükaminsóinak vízben való oldékonysága jobb, ugyanakkor vizes oldataik stabilak és pH-juk is alacsonyabb, miként ez az alábbi VI. táblázatból is kitűnik. VI. táblázat Polifungin N-glűkozilszármazékának nátriumsója Polifungin N-glükoziiszármazékának N-metil-glökamirísója pH 1%-os vizes oldatban 9,9 8,9 infravörös spektnincs abszorpció nincs eltérés rum a polifungin a standardspektrumára hoz képest biológiai aktivitás U/mg-ban jellemező 1704 cm~1 hullámszámnál 1860 2365 Oldékonyság vízben 4—10% >15% A polién makrolidok N-glükozil-származékainak N-metil-glükaminsói felhasználhatók például a Candida albicans, Cryptococcus neoformans, Aspergillus, Geotrichum vagy Torulopsis gombák okozta felületi vagy szisztemikus gombafertőzések kezelésére jól ismert gyógyászati készítmények, például aeroszolok, infúziós oldatok, vaginálisan beadható tabletták, sajtolt termékek, cseppek és paranterálisan beadható oldatok formájában. A találmányt közelebbről az alábbi kiviteli példákkal kívánjuk megvilágítani. 1. példa 20 g polifungint és 6 g glükózt 100 ml dimetíl-formamidban szuszpendálunk, majd a kapott szuszpenziót 18 órán át 36 °C-on állni hagyjuk. A kapott oldatot szűrjük, majd a szűrlethez 400 ml 5%-os vizes ammónium-szulfát-oldatot adunk, és az így kapott elegyet 4 °C-on 2 órán át állni hagyjuk. A kivált csapadékot kiszűrjük, majd vízzel mossuk és ezután 800—800 ml metanollal háromszor extraháljuk. Az egyesített meíanolos extraktumhoz 6 g N-metil-glükamin 60 ml vízzel készült oldatát, majd 1000 ml n-butaaolt adunk. A reakcióelegyet ezt követően 45 °C-on és csökkentett nyomáson bepároljuk a metanol és a víz eltávolítása céljából. A maradékot 4 °C-on kristályosodni hagyjuk, majd a kivált csapadékot kiszűrjük, és először n-butanollal, majd petroléterrel mossuk és szobahőmérsékleten szárítjuk. így 16,5 g mennyiségben az N-glükozil-polifungin N-metil-glükaminsóját kapjuk. A só jellemzői a következők: Ej^°m = = 560 304 nm-nél; IC50=0,42 'j.g/ml. összehasonlításképpen a polifungin megfelelő jellemzői: Ej °°m~ 660 304 nm-nél; IC50=0,16 ug/ml. 2. példa 100 ml dimetil-formamidban feloldunk 20 g nisztatint és 6 g glükózt, majd a továbbiakban az 1. példában ismertetett módon járunk el. így 18 g mennyiségben az N-glükozil-nisztatin N-metil-glükaminsóját kapjuk. A só jellemzői a következők: E}^m=560 304nm-nél; IC50= =0,45 fig/ml. Összehasonlításképpen a nisztatin megfelelő jellemzői a következők: E|j?m=790 304 nm-nél; IC50=0,18 jjig/ml. 3. példa 200 ml dimetil-formamidban szuszpendálunk 20 g amfotericin B-t és 6 g glükózt, majd a kapott szuszpenziót 18 órán át 35 °C-on állni hagyjuk Az így képződött oldatot azután szűrjük, majd a szűrlethez 500 ml 5%-os vizes ammónium-szulfát-oldatot adunk, és a kapott elegyet 4 °C-on 2 órán át állni hagyjuk. A kivált csapadékot kiszűrjük, majd vízzel mossuk. A csapadékhoz ezután 50 °C hőmérsékleten 1500 ml metanolt, majd 6 g N-metil-glükamin 60 ml vízzel készült oldatát adjuk. A reakcióelegyet ezután 30 percen át keverjük, majd 1 liter n-butanolt adunk hozzá. A kapott oldatot 45 °C hőmérsékleten és csökkentett nyomáson bepároljuk, míg a metanolt és a vizet eltávolítjuk. A maradékot 4 °C-on kristályosodni hagyjuk, majd a kivált csapadékot kiszűrjük, először n-butanollal, majd petroléterrel mossuk és szobahőmérsékleten szárítjuk. így 18 g mennyiségben az N-glükozil-amfotericin B N-metil-glükaminsóját kapjuk. A só jellemzői a következők: Ej^m=l 140 380 nmnél: ICJO=0,l ;i.g/ml. 4. példa 100 ml dimetil-formamidban feloldunk 20 g polifungint és 6 g glükózt, majd a továbbiakban az 1. példában leírtak szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy 100 ml n-butanol helyett 800 ml n-amilalkoholt használunk, így 16,3 g mennyiségben az N-glükozil-polifungin N- metil-glükaminsóját kapjuk, amelynek E|^m értéke 572 304 nm-nél és IC50 értéke 0,45 pg/ml. Összehasonlításképpen a kiindulási anyagként használt polifungin megfelelőjellemzői:E]j?m = 790304 nm-nél és ICJ(, -0,18 p.g/ml. 5. példa 50 ml dimetil-formamidban 5 g polifungint és 1,5 g fruktózt szuszpendálunk, majd ezután az 1. példában ismertetett módon járunk el. így 4,4 g mennyiségben az N-glükozil-polifungin N-metil-glükaminsóját kapjuk 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
