177750. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vérnyomást csökkentő hatású tioacil-L-aminosav-származékok előállítására
7 177750 8 sósavoldattal megsavanyítjuk, és újra extraháljuk 100 ml etil-acetáttal. A második etíl-acetátos extraktumot vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban szárazra pároljuk. Á maradékot egy szilíkagél-oszlopon kromatografáíjufc benzoles ecetsav elegyével, így 0,47 g N-(3-merkapto-propíonil)-L-fenilalanint kapunk, amelynek olvadáspontja 106—107°. 7, példa NM3-Benzoi!tiO"propioníl)-L-arginm 8,7 g L-argínínt oldunk 50 ml 1 n nátrium-hidroxid oldatban, és az oldatot keverés közben jeges fürdőben lehűtjük. Egymás után 25 ml 2 n nátrium-hidroxid oldatot és 8,5 g 3-bróm-propionil-kloridot adunk hozzá, és a jeges fürdőt eltávolitva szobahőmérsékleten 2 órát keverjük; hozzáadjuk 10 ml vízben 7,5 g tiobenzoesav és 2,4 g kálium-karbonát keverékét, és az elegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük ; hozzáadunk 100 ml Dowex 50 polísztirol-szulfonsav típusú ioncserélő gyantát [Mikes, Laboratory Handbook of Chromatographic Methods, Van Nostrand, 1961.256. old.], és a szuszpenziót egy 300 ml ugyanilyen gyantával töltött oszlopba töltjük. A savas jellegű anyagok vízzel végzett kimosása után az N*-(3-bcnzoiltio-propioniÍ)-L-arginint 6,5 pH-jú pirídin-cectsav-vfz. puiferrai cluáljuk. A kívánt anyagot tartalmazó frakciókat egyesítjük, szárazra pároljuk, és a maradékot éterrel eldörzsölve 7 g anyagot kapunk, amely 345 -on bomlik. 8. példa NM3-Mcrkapt<?-pr<ipio(it!j-L-arginin l g N*-(3-benzoiitin-propkwi!)-L-arginint élénk keverés közben feloldunk 5 ml víz és 5 ml tömény ammónittm-hidroxid clegyébcn. Az oldatot egy óra múlva 20 ml etil-acctáttat extraháljuk, és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 85 ml DEAE Sephadexszel [dextrán alapú ankmeserélö. (Id. Mikes előbb idézett müve, 328. oldal] töltött oszlopon kromatografáijuk 0,005 mólos ammónium-hidrogén-karbonát puffernd. Az Na-(3- -merkapto-propù'ntt)-L-arginint tartalmazó frakciókat (amit pozitív tiol- és Sakaguehi-reakcióval mut;itunk ki) egyesítjük, és tiotiüzálássat eltávolítjuk az ummónium-hidrogén-karbonátot. tgy 200 mg anyagot kapunk, amelynek olvadáspontja 230 ' (200-ott bomlani kezd). 9, példa N*(3-fkftzoíltio-propbnH)-szarkozin Az I. példa szerinti eljárásban az L-alanint 4,45 g szarko/tnnul helyettesítve 7,9 g N-(3-bcnzoiltio-propiontl)*sz,trkozint kapunk, atnelvnek olvadáspontja 139— 140'. 10. példa N-(3-Merkapto-propionil)-szarkozin A 2. példa szerinti eljárásban az N-(3-benzoiltio-propionil)-L-alanint 2,8 g N-(3-benzoiltio-propion il)-szarkozinnal helyettesítve 1,65 g nyers N-(3-merkapto-propionil)-szarkozint kapunk. Ezt diciklohexil-ammóniumsóvá alakítva 2,7 g, 157—158° olvadáspontú anyagot kapunk. A tisztított sót etil-aeetáttal és 10%-os kálium-hidrogénszulfát oldattal kirázva alakítjuk vissza a szabad savvá. 11. példa N7-(3-Acetiltio-2-metil-propionil)-L-argirtin 2,61 g L-argínint 3,2 g nátrium-karbonát és 30 ml víz elegyében oldunk, és az oldatot jeges fürdőben lehűtjük. Hozzáadunk 2,7 g 3-acetiltio-2-metil-propionil-kloridot, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 1,5 órát keverjük. Hozzáadunk 50 ml AG 50 W ioncserélő gyantát, és a szuszpenziót 80 ml ugyanilyen gyantával töltött oszlopba töltjük. Vízzel történő mosás után az N*-(3- acetiltio-2-metíl-propionil)-L-arginint 6,5 pH-jú píridin-ecetsav puiferrai eluáljuk. Az oldószert vákuumban ledesztilláljuk, a maradékot metanolban oldjuk, és éterrel kicsapva 3,86 g N“-(3-acetiltio-2-metíl-propionil)-L-arginint kapunk, amelynek olvadáspontja 133°. 12. példa N*-(3-Merkapto-2-metii-propionil)-L-arginin 1 g NM3-acetiltio-2-metil-propionil)-L-arginint oldunk 5 ml víz és 5 ml tömény ammónium-hidroxid oldat elegyében. Az oldatot egy óra szobahőmérsékleten való állás után vákuumban (melegítés nélkül) 3 ml-re bepároljuk, és AG—50 W ioncserélő gyantát adunk hozzá, amíg a PH körülbelül 4 lesz. A szuszpenziót ugyanilyen gyantával töltött oszlopra öntjük, és az N*-(3-merkapto-2-metil-propionil)-L-arginínt 6,5 pH-jú piridin-acetát puiferrai eluáljuk. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot liofilizáljuk. Kihozatal; 0,86 g; olvadáspont: 100°. 13. példa 3-Acetiltio-2-benzil-propionii-klorid 8,1 g 2-benzil-akfilsuvat és 5,3 g tioecet-S-savat elegyítünk, és forró vízfürdőn egy órán át melegítjük. Szobahőmérsékletre hűtés után 9,75 g tionil-kloridot adunk hozzá, és az elegyet éjszakán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. A tionil-klorid feleslegét vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot desztilláljuk. A 3-acetiltio-2-benzil-propionil-klorid 0,05 Torr nyomáson 120— 122 C-on forr. 14. példa Na-(3-Acetiltio-2-benzil-propionil)-L-arginin All. példa szerinti eljárásban a 3-acetiItio-2-metil-propi onil-klorídot 3-acetiltio-2-benzil-propioniI-kloriddal helyettesítve Na-(3-acetiltio-2-benzíl-propioníl)-L-arginint kapunk, amelynek olvadáspontja 253—295 °€. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
