177555. lajstromszámú szabadalom • Homológ biológiai sebfedő anyag és eljárás előállítására
7 177555 8 végezzük' oly módon, hogy az üledék köbtartalmának 70O/o-a szubcelluláris elem és fehérje legyen. A centrifugált üledéket desztillált vízzel ötször felöntve mentesítjük a szabad hemoglobintól. A derivátumot anapartes plazmával elegyítve rekalcifikálással vagy trombin-alvasztással formába dermesztjük. A fibrinpolimerizáció és retrakció befejeződésével nyerhető rugalmas alvadékot desztillált vizes mosás után liofilizáljuk, majd a szántott fibrinvázas terméket a kívánt nagyságra vágjuk, csomagoljuk és sugársterilezzük. 4. példa A vörösvértest-koncentrátumot pH = 4,6 értékre beállított desztillált vízzel 1:12 arányban keveijük el, és a hemolizátumot +3 C° hőmérsékleten ülepítjük. A centrifugálást 250 g értékkel végezzük, a felhasználandó üledékben a szubcelluláris elem és fehéije mennyisége 70%. Az üledéket desztillált vízzel ötször felöntjük, és így a szabad hemoglobintól mentesítjük. A derivátumot desztillált vízzel térhálósított 1,5 g/v %-os agar-agar főzettel 30 C°-on anapartes elkeverjük. A homogenizált keveréket paraffin olajjal víztaszítóvá tett formába öntjük oly módon, hogy az anyag dermedés utáni vastagsága körülbelül 2 mm legyen. A megdermedt öntvényt 1 g/v %-os agar-agar főzetbe mártott műanyag tüllszövettel megerősítjük, majd a buborékképződést elkerülve, az agar-agar főzetet rögzítőrétegként a tüllszövetre öntjük. Ennek a rétegnek a vastagsága mintegy 1 mm. Az egyenletes száradás érdekében az öntvényeket megnedvesített vászonnal takarjuk be. Célszerű a fedőanyagot rögzíteni. A szárítást 37 C°-on végezzük, infrasugárzók segítségével. A szárítás időtartama körülbelül 16 óra. A folyamat végén a törékeny lemezeket 3 percig tartó desztillált vizes áztatással részlegesen rehidráljuk, a fedővásznat eltávolítjuk és a fölös vizet leöntjük. A maradék hemoglobint és egyéb zavaró anyagokat tartalmazó víz eltávolítása után 70 v/v %-os etanollal fixálást végzünk körülbelül 20 percig. A kezelést ezután 96 v/v %-os etanolban megismételjük, mintegy 3 perc időtartamig. A rugalmas lapokat a fürdőből kiemelve 40 C° hőmérsékleten sík lapokká szárítjuk. A szárítás közben az anyagra rácsszerű nehezéket helyezünk. 5. példa A vörösvértest-koncentrátumot pH = 4,5 értékre beállított desztillált vízzel keveijük el 1:10 arányban. A hemolizátumot +4C° hőmérsékleten ülepítjük. A centrifugálást 250 g értékkel végezzük, amíg a felhasználandó üledék szubcelluláris elem és fehéije-tartalma körülbelül 70% lesz. Az üledéket ezután desztillált vízzel ötször felöntjük és a szabad hemoglobintól mentesítjük. A derivátumot a 4. példában említett agar-agar főzettel anapartes elkeverjük. A keverést úgy végezzük, hogy a száradás utáni állapotra átszámítva 2/, súlyrész kicsapott szubcelluláris frakciójusson. A keverést 45 C -on végezzük. A keveréket úgy öntjük a víztaszító formába, hogy a dermedés utáni vastagság körülbelül 3 mm legyen. A tüllszövettel az előző példában ismertetett módon történő bevonás után a rögzítőréteget 2 mm vastagságúra készítjük. A szárítást 56 C -on végezzük 8 órán át. A desztillált vizes áztatást 6 percig végezzük, és ezután a 70 v/v %-os etanolban 25 percig kezeljük az anyagot, a 96 v/v %-os etanolban a fixálást 4 percig végezzük. A végső szárítás hőmérséklete 47 Cc. 6. példa A vörösvértest-koncentrátumot 4,3 pH-értékre beállított desztillált vízzel keverjük 1:20 arányban. A hemolizátumot + 5 C°-on ülepítjük le, és a centrifugálást 300 g értékkel végezzük. A centrifugálással az üledék szubcelluláris elem és fehérjetartalmát 75%-ra állítjuk be. A derivátumhoz az agar-agar főzetet 45 C°-on keverjük oly módon, hogy száradás utáni állapotra % súlyrész kicsapott szubcelluláris frakció jusson. Az első réteg vastagságát 5 mm-re választjuk. A tüllréteg elhelyezése után ezúttal is rögzítőréteget hozunk létre. Ennek vastagsága ez esetben 5 mm. A szárítást 48 C°-on végezzük 12 órán át. A lemezeket desztillált vízben 5 percig áztatjuk, majd 90 v/v %-os etanolban 5 perces fixálást végzünk. A végső szárítást 56 C°-on végezzük, majd a terméket csomagoljuk és sugársterilezzük. A példákban bemutatott eljárások során a sebfedőanyag készítése a sterilezés módjától függően kétféle lehet. Végezhetjük a gyártást nyílt rendszerben, tömeggyártást szolgáló üzemi körülmények között, ez esetben a készítményeket sugársterilezéssel kell fertőtleníteni. Ha a sebfedőanyagokat nyílt és zárt rendszer kombinálásával végezzük, a nyílt rendszerben végzett műveleteket aszeptikus laboratóriumi körülmények mellett kell végezni és az eljárás végén kétfázisú alkoholfürdőt kell alkalmazni. Ilyen megoldásokat mutattunk be a 4. és 5. példákban. A felhasznált anyagok kiválasztásánál a Transzfúziós Szabályzat, illetve törzskönyvi készítményeknél a VI. Magyar Gyógyszerkönyv előírásai érvényesek. Kiindulási anyagként tehát felhasználható minden olyan 21 napnál már idősebb, de még nem autolizált, fehérvérsejt réteget („buffy coat”) is tartalmazó vörösvértest koncentrátum, amelyet előzetesen Australia-antigén kizárására megbízható módszerrel megvizsgáltak. Tekintettel arra, hogy az eljárás során minden egyéb, például izoimmunizációs kockázatot jelentő antigén megsemmisül, a termék univerzálisan felhasználható. A gyógyszerkönyvi minőségű Gelidium-agar (agaragar) a sebészeti gyakorlatban régen ismert — protézisek és tapaszok készítésére felhasznált — szövetbarát poliszacharid. (Rátóti J.. Romvári V. : „Gyógyító növények”, 259. oldal, Medicina, 1974). A termék szárazanyag tartalmának közelítően 30%-át alkotó agar-agar a sebgyógyulás folyamatában közömbös tényező. Az agar-agar főzetek közvetlenül felhasználás előtt készítendők. A sok vizet tartalmazó öntvények a viszonylag gyors szárítás következtében repedezésre hajlamosak. Ez csak jól rögzített, nedves vászontakarással előzhető meg, amely egyben — a nyíltrendszerű szárítás ideje alatt — megfelelő védelmet is jelent véletlen befertőződések ellen. A kiszárított, majd részlegesen rehidrált agar, illetve agartartalmú lemezek sajátos tulajdonsága, hogy 96%-os alkohol fürdőben térhálós szerkezetük stabilizálódik és a csaknem kenőcs konzisztenciájú öntvények ezáltal jól kezelhető plasztikus lapokká merevednek. Csomagolástechnikai szempontból a kétrétegű műanyag borítás biztosit kellő védelmet. A felhasználás legfontosabb elvi szempontja a rehidrált és sebre helyezett lapok minél gyorsabb beszárítása és szárazon tartása. További fedőkötés alkalmazása szükségtelen, sőt kedvezőtlen következményekkel járhat. A találmány szerinti sebfedőanyagot felhasználásakor steril desztillált vízbe, vagy igény szerint célszerűen megválasztott kiegészítő (pl. antibiotikum) oldatba helyezzük, és 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
