177098. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új peptidil ng-karboxi-L-arginin-aldehid-származékok előállítására
H 177098 12 roléterrel mossuk és levegőn szárítjuk. 9,3 g (76%) cím szerinti terméket kapunk. Rf 0,52-0,62. 3. lépés: benzoil -D-allo-izoleucil-L-prolil-NG - -benziioxikarbonil-L-arginin-aldehid 9,2 g (15 mmól) védett tripeptid-laktámot (4. példa, 2. lépés) feloldunk 40 ml tetrahidrofuránban, és -20°C-on hozzáadunk keverés közben 0,427 g (11,27 mmól) lítium-alumínium-hidridet tetrahidrofuránban oldva. A reakcióelegyet 1 n sósavval pH 2-re savanyítjuk, majd 80 ml vízzel hígítjuk. Az oldatot 30 ml n-hexánnal mossuk, majd háromszor 50 ml metilén-kloriddal kirázzuk. Az egyesített metilén-kloridos oldatokat kétszer 10 ml 10%-os nátrium-karbonát-oldattal, majd kétszer 10 ml vízzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfáton történő szárítás után csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 30 ml benzolban feloldjuk és bepároljuk. A benzolos oldást és bepárlást megismételjük. Az így kapott maradékot 30 ml dietiléterrel eldörzsöljük, szüljük, dietiléterrel mossuk és tömény kénsav mellett vákuum exszikkátorban szárítjuk. 6,7 g (72%) cím szerinti terméket kapunk. R| 0,47—0,57. 4. lépés: benzoil-D-allo-izoleucil-L-prolil-NG-karboxi-L-arginin-aldehid 6,2 g (10 mmól) védett tripeptid-aldehidet 4. példa, 3. lépés az 1. példa 4. lépésében leírt módon hidrogénezünk és izolálunk. Liolfilizálás után 4,05 g (81%) cím szerinti terméket kapunk. Rf 0,4—0,5. [aJü° = —42,6 ± 1°. (c=l, sósavval 7 pH-ra állított vizes oldatban). Aminosav analízis: allô—Ile = 0,97, Ile = 0,02, Arg—H = 0,95 (NH3-ként mérve), Pro = 1,00 (vonatkoztatási alap). Mólsúly az aminosav analízis alapján = 590. Kénsavval felszabadítható C02% = 9,5, báriumkarbonátként leválasztható C02% = 2,0. 5. példa d-Fenil-D-laktil-L-prolil-NG-karboxi-L-arginin-aldehid előállítása (I képletben X jelentése hidrogénatom, Y jelentése d-fenil-D-tejsav-csoport és Pro jelentése L-prolin-csoport) 1. lépés: O-terc-butiloxikarbonilamido-ß-fenil-D-laktil-L-prolin 15,1 g (40 mmól) O-terc-butiloxikarbonilamido-ß-fenil-D-tejsav-N-hidroxi-szukcinimidésztert [Kisfaludy és munkatársai: Acta Biochim. Biophys. Acad. Sei. Hung., 6, 393 (1972)] feloldunk 50 ml piridinben, és hozzáadunk 4,7 g (40 mmól) L-prolínt, valamint 5,6 ml (40 mmól) trietilamint. A reakcióelegyet oldódásig keveijük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 100 ml víz és 100 ml dietiléter elegyében feloldjuk. A vizes fázist 30 ml dietiléterrel, az egyesített éteres fázisokat 30 ml vízzel mossuk. A vizes fázisokat egyesítjük, 3 n sósavval 2-es pH-ra savanyítjuk, és háromszor 50 ml etilacetáttal kirázzuk. Az egyesített etilacetátos oldatokat kétszer 20 ml vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. 9,85 g (65%) cím szerinti terméket kapunk. Rf 0,4-0,5. 2. lépés: O-terc-butiloxikarbonilamido-ß-fenil-D-laktil-L-prolil-NG-benziloxikarbonil-L-arginin-laktám 11.2 g (28',6 mmól) terc-butiloxikarbonil-NG-benziloxikarbonil-L-arginin-laktámot (1. példa, 1. lépés) 25 mi etilacetátban szuszpendálunk és 5 °C-on, keverés közben hozzáadunk 50 ml 4 mólos etilacetátos sósav-oldatot. A reakcióelegyet 30 percig jeges vízhűtés mellett keveijük, majd 130 ml hűtött etilacetáttal hígítjuk, a kivált csapadékot kiszűijük, etilacetáttal mossuk és kálium-hidroxid mellett vákuumban szárítjuk. Az így nyert NG-benziloxikarbonil-L-arginin-laktám-klórhidrátot feloldjuk 25 ml dimetilformamidban, és —10°C-ra történő lehűtés után hozzáadunk 8,1 ml (57,8 mmól) trietilamint. A keletkező szuszpenziót az alábbi vegyes anhidridhez adjuk. Az 5. példa 1. lépésében előállított 9,85 g (26 mmól) 0-terc-butiloxikarbonilamido-j3-fenil-D-laktil-L-prolint 33 ml dimetilformamidban oldjuk, lehűtjük —15 °C-ra, és ezen a hőmérsékleten keverés közben hozzáadunk 2,89 ml (26 mmól) N-metil-morfolint és 3,43 ml (26 mmól) klórszénsav-izobutilésztert, majd 10 perc keverés után a fenti dimetilformamidos szuszpenziót. A reakcióelegyet szükség szerint 8—9-es pH-ra állítjuk trietilaminnal, és a keverést 1 órán át —15 °C-on és 1 órán át 0°C-on folytatjuk. Ezt követően a reakcióelegyet hígítjuk 60 ml benzollal, a kivált sókat kiszűijük és kétszer 30 ml benzollal mossuk. A szűrlethez 70 ml vizet adunk, a fázisokat elválasztjuk, és a vizes fázist háromszor 30 ml benzollal mossuk. Az egyesített benzolos oldatokat rendre háromszor 40 ml 10%-os nátrium-karbonáttal, háromszor 40 ml vízzel, kétszer 40 ml 0,1 n sósavval és végül kétszer 40 ml vízzel mossuk. Vízmentes nátrium-szulfáton történő szárítás után a benzolos oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk. A párlási maradékot 50 ml petroléterrel eldörzsöljük, szüljük, petroléterrel mossuk, majd levegőn szárítjuk. 10,3 g (60%) cím szerinti terméket kapunk. Rf 0,65-0,70. 3. lépés: 0-terc-butiloxikarbonilamido-|3-fenil-D-laktil-L-prolil-NG-benziloxikarbonil-L-arginin-aldehid 10.2 g (15 mmól) védett tripeptid-laktámból (5. példa, 2. lépés) kiindulva az 1. példa 3. lépésében leírt módon járunk el azzal az eltéréssel, hogy a feldolgozás végén a párlási maradékot 30 ml 1:1 ará-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
