176871. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-amino-oktahidro-oxazolo [3, 2-a]pirrolo [2, 1-e] pirazin- származékok előállítására
7 176871 8 7,2 g N-benziloxikarbonil-DL-a-metilszerint 9,5 g L-fenilalanil-L-prolin-terc-butilészterrel 6,8 g N,N-diciklohexilkarbodiimid jelenlétében reagáltatunk és a c) pontban leírt módon feldolgozzuk. A kapott olajat kovasavgélen 1% metanolt tartalmazó metilénkloriddal eluálva kromatografáljuk. Először az I tripeptidésztert eluáljuk. Ezt a vegyületet amorf formában kapjuk. [a]fj= —28,2° (c=2, metilénkloridban). Ezután növekvő metanoltartalmú (1—4 térfogat%) metilénkloriddal eluálva a II tripeptidésztert kapjuk, amelyet 1 : 3 arányú etilacetát-hexán elegyből kristályosítunk. Olvadáspontja 120—121°. [a]o = —48,4° (c=2, metilénkloridban). Kitermelés 33%. f) N-(N-Benziloxikarbonil-D- és -L-a-metil-szeril)-L-fenilalanil-L-prolin-diasztereoizomerek [I és II tripeptidek] (IV képletű vegyületek) /,) 1 tripeptid Az e) pontban kapott 2,2 g amorf I tripeptidésztert feloldjuk 3 ml trifluorecetsavban és 3/4 óra hosszat szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A trifluorecetsav egy részét szobahőmérsékleten kisvákuumban leszívatjuk, a kapott gyantát metilénkloridban feloldjuk és az oldatot káliumhidrogénkarbonát-oldattal meglúgosítjuk. Ezután 3 ízben metilénklorid és kevés metanol keverékével extraháljuk, a szerves fázisokat 2 ízben híg káliumhidrogénkarbonát-oldattal mossuk, a vizes fázist körülbelül 16%-os sósavval megsavanyítjuk, majd 3 ízben metilénkloriddal extraháljuk. A szerves fázisokat 1 ízben vízzel mossuk, vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk és bepároljuk. Az így kapott fehér habot metilénklorid, kevés metanol és etilacetát elegyéből kristályosítva a tiszta I tripeptidet kapjuk fehér kristályok alakjában. Olvadáspontja 134—136°. [«]d = —30,0°, (c=2, etanolban). Kitermelés 50%. f2) II tripeptid Az/,) pontban leírtakkal analóg módon eljárva és kiindulási anyagként II tripeptidésztert használva szintén fehér habot kapunk, amelyet 2 ízben 1: 1 arányú etilacetát-diizopropiléter elegyéből kristályosítva tiszta II tripeptidet kapunk (kitermelés 83%) fehér kristályok alakjában. Olvadáspontja 115—118°. [a]o = —38° (c= --1,5, etanolban). g) N-(N-Benziloxikarbonil-D- és -L-a-metil-szeril)-L-fenilalanil-L-prolin-p-nitrofenilészter [I és II tripeptid-p-nitrofenilészter] (III képletű vegyületek) gt) I tripeptid-p-mtrofenilészter 49,7 g I tripeptidsavat és 34,8 g p-nitrofenolt 200 ml metilénkloridban szuszpendálunk és körülbelül 10percig keverve oldatot kapunk. Ezután hozzácsepegtetjük 24,7 g N,N-dicikIohexilkarbodiimid 200 ml vízmentes metilénkloriddal és 50 ml vízmentes éterrel készült oldatát. A sárga oldatot 2 óra hosszat 20°-on keverjük, ezután hozzáadunk 5 ml, 40%-os ecetsavat, 10 perc múlva szűrjük és a maradékot metilénkloriddal mossuk. A sárga szüredéket 3 ízben 20%-os káliumhidrogénkarbonát-oldattal kirázzuk. Ezután a vizes fázisokat még 2 ízben metilénkloriddal extraháljuk, az egyesített szerves fázisokat vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk és bepároljuk. Sárga gyantát kapunk, amelyet 10-szeres menynyiségű, 0,2—0,5 mm-es kovasavgélen kromatografá- Iunk. Az anyagot 1: 1 arányú metilénklorid és dietiléter elegyben oldva visszük az oszlopra. Először 2% acetonitrilt tartalmazó dietiléterrel eluálunk, és a kapott frakciót félretesszük. Az I tripeptid-p-nitrofenilésztert ezután 60—90%-os tisztaságban 6% acetonitrilt tartalmazó dietiléterrel és 95—98% tisztaságban 8—10% acetonitrilt tartalmazó dietiléterrel eluáljuk. Kitermelés 68%. g2) II tripeptid-p-nitrofenilészter A II tripeptidet a gt) pontban leírtakkal analóg módon észterezve sárga gyantát kapunk, amelyet 15-szörös mennyiségű kovasavgélen (0,063) kromatografáljuk. Az anyagot 1: 1 arányú metilénklorid és dietiléter elegyben oldva visszük az oszlopra. Először dietiléterrel és 3% acetonitrilt tartalmazó dietiléterrel eluálunk, majd 3—8% acetonitrilt tartalmazó dietiléterrel eluálva körülbelül 95%, és körülbelül 98%-os tisztaságú II tripeptid-p-nitrofenilésztert kapunk sárgás hab alakjában. Aceton és hexán elegyéből átkristályosítva a II-tripeptid-p-nitrofenilésztert (kitermelés 72%) színtelen tűk alakjában kapjuk. Olvadáspontja 100—101,5°. — 70,5° (c=l, metilénkloridban). h) N-(N-Benziloxikarbonil-DL-a-hidroxialanil)-L-fenilalanil-L-prolin-p-nitrofenilészter (II képletű vegyület) h,) I tripeptid-p-nitrofenilészterből Száraz készülékbe 75 ml vízmentes benzolt és 7,5 g 4A molekulaszűrőt helyezünk. Egy óra múlva beleszórunk 5,32 g, kisvákuumban szárított ólomtetraacetátot és az oldatot fél óra hosszat keverjük. Ezután hozzáadjuk 6,18 g I tripeptid-p-nitrofenilészter (lásd gi) pontot) 50ml vízmentes benzollal készült oldatát, a reakcióoldatot azonnal felforraljuk és 10 percig visszafolyatás közben keverjük. A kapott fehér szuszpenziót jégfürdőn 15°-ra lehűtjük, szűrjük, a szüredéket benzollal mossuk, metilénkloriddal együtt választótölcsérbe helyezzük és 2 ízben jeges vízzel mossuk. Ezután még 2 ízben metilénkloriddal extraháljuk, a szerves oldatot szárítjuk, aktívszénen szűrjük, és az oldószert körülbelül 35° fürdőhőmérsékleten elpárologtatva a cím szerinti vegyületet színtelen hab alakjában kapjuk. h2) II tripeptid-p-nitrofenilészterből A cím szerinti vegyületet a fentiekkel analóg módon eljárva kapjuk II tripeptid-p-nitrofenilészterből kiindulva (g2) pont). h2) I és II tripeptid-p-nitrofenilészter elegyéből Az e),f) és g) pontokat kívánt esetben az ej pontban az I és II tripeptidészter, az f) pontban az I és II tripeptid és a g) pontban az I és II tripeptid-p-nitrofenilészter szétválasztása nélkül is végrehajthatjuk, és a h) pont szerinti vegyületet kapjuk. Az e) pontban kiindulási anyagként használt N-ben-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
