176871. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-amino-oktahidro-oxazolo [3, 2-a]pirrolo [2, 1-e] pirazin- származékok előállítására
5 176871 6 1. példa 2-Benziloxikarbonil-amino-2-metil-5-benzil-10b-hidroxi-3,6-dioxo-oktahidro-8H-oxazolo[3,2-a]pirrolo[2,l-c]pirazin azi-formája (2S,5S,10aS,10bS) és természetes formája (2R,5S,10aS,10bS) (I általános képletü vegyület; R] = benziloxikarbonilcsoport, R2 = metilcsoport, R3=hidrogénatom, R4 = benzilcsoport, R5 = hidrogénatom) 6,1 g nyers N-(N-benziloxikarbonil-DL-a-hidroxi-alanil)-L-fenilalanil-L-prolin-p-nitrofenilésztert (készül a későbbiekben ismertetett hl, h2 vagy h3 lépések szerint) feloldunk 300 ml acetonban és hozzáadjuk 300 ml, 10%-os káliumtartarát-oldathoz (pH^=7,9). A reakciókeveréket 18 óráig szobahőmérsékleten keverjük, választótölcsérbe helyezzük, pH-értékét 10%-os borkősavoldattal 5,0-ra állítjuk, majd 3 ízben metilénkloriddal extraháljuk. A kapott nyers, részben kristályos, cím szerinti vegyületet melegen etilacetátban szuszpendáljuk. Körülbelül 2 óra hosszat hűlni és kristályosodni hagyjuk, majd szűrjük és etilacetáttal mossuk. Kisvákuumban 90°-on végzett szárítás után a cím szerinti vegyület vékonyrétegkromatográfiásan tiszta azi-formáját kapjuk. Olvadáspontja bomlás közben 206—208°. [«]“=—28° (c=0,5, metanolban). Kitermelés 34%. Az anyalúgot 0,5 liter metilénkloriddal hígítjuk, 3 ízben 400—400 ml 0,5 n nátriumkarbonát-oldattal jól kirázzuk, és a nátriumkarbonátos kivonatokat még 2 ízben metilénkloriddal extraháljuk. A metilénkloridos fázisokat szárítjuk, bepároljuk és kovasavgélen kromatografáljuk. A metilénkloriddal és 4—6% acetonitrillel eluált előfrakciókat eldobjuk. Ezután metilénkloriddal és 10—14% acetonitrillel a cím szerinti vegyület természetes formáját előállítjuk. A természetes formát alumíniumoxidon (II—III aktivitás), kromatografálva tisztítjuk és 1: 1 arányú metilénklorid-aceton eleggyel eluáljuk. Az első frakciókat vizes etilacetát és kevés diizopropiléter elegyéből kristályosítjuk. A vékonyrétegkromatográfiásan tiszta, cím szerinti vegyület természetes formáját prizmák alakjában kapjuk. Olvadáspontja 170 —172°. [a]D = +9,8° (c=l,6, etanolban). Kitermelés 2°/ */o* A cím szerinti vegyületből további azi-formát úgy kaphatunk, hogy i) a fent kapott nátriumkarbonátos kivonatot borkősavval 4—5 pH-értékre állítjuk és 2 ízben metilénkloriddal extraháljuk. A kivonatokat szárítjuk, bepároljuk és 10-szeres mennyiségű, 0,06—0,2 mm szemcseméretü kovasavgélen kromatografáljuk. Először 6% acetonitrilt tartalmazó metilénkloriddal nitrofenolt és nemdefiniált melléktermékeket eluálunk. Ezután 20% acetonitrilt tartalmazó metilénkloriddal a cím szerinti vegyület azi-formáját eluáljuk, amelyet etilacetátból kristályosítunk, és ii) a fenti kromatografálás során 14—20% acetonitrilt tartalmazó metilénkloriddal eluálunk, a frakciókat 0,5 n nátriumkarbonát-oldattal mossuk, és etilacetátból kristályosítva az azi-formát kapjuk. A kiindulási vegyületet a következő módon állíthatjuk elő. aj N-Benziloxikarbonil-L-prolin-terc-butilésztcr 200 ml vízmentes dimetilformamid 500 ml vízmentes acetonitrillel készült oldatához —20c-on keverés közben 15 perc alatt hozzácsepegtetünk 126,9 g (1 mól) oxalilkloridot. Ezután az oldatot további 15 percig —20°-on keverjük és hozzáadunk 249 g (1 mól) N-benziloxikarbonil-L-prolint. További 15 percig keverjük, majd a kapott víztiszta sárga oldathoz hozzácsepegtetjük 250 ml vízmentes terc-butanol és 200 ml vízmentes piridin keverékét úgy, hogy a reakciókeverék hőmérséklete — 15°-ot ne lépje túl. A hűtés megszüntetése után a fokozatosan vörössé váló reakciókeveréket 3 óra hosszat szobahőmérsékleten tartjuk. A feldolgozáshoz 1200 ml 2 n nátriumkarbonát-oldat és metilénklorid között megosztjuk, és a cím szerinti vegyületet a metilénkloridos fázisból lassan kristályosodó olaj alakjában kapjuk, n“ = 1,5015. b) L-Prolin-terc-butilészter (IX képletü vegyület) 267 g, a) pontban kapott nyers terméket 1,5 liter etanolban 40 g palládium-aktívszén-katalizátor (5% palládium) jelenlétében légköri nyomáson és szobahőmérsékleten hidrogénezve a cím szerinti vegyületet színtelen olaj alakjában kapjuk. Forráspontja 0,01 Torr nyomáson 43—46°. n^-1,4435 [<x£n -41,7° (c 2, etanolban). Kitermelés 72%. c) N-Benziloxikarbonil-L-fenilalanil-L-prolin-terc-butilészter (Vili képletü vegyület) 157 g N-benziloxikarbonil-L-fenilalanin 500 ml metilénkloriddal és 300 ml vízmentes dietiléterrel készült oldatához 15—18°-on 5 perc alatt hozzáadunk 85,5 g L-prolin-terc-butilésztert 100 ml dietiléterben, majd 15 perc alatt hozzáadunk 114 g N,N-diciklohexilkarbodiimidet 150 ml dietiléterben olyan ütemben, hogy a reakciókeverék hőmérséklete 18° fölé ne emelkedjen. Ezután a keveréket 1 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük, szűrjük és a maradékot éterrel mossuk. A szüredéket sorban 2 n sósavval, vízzel, káliumhidrogénkarbonáttal és vízzel feldolgozzuk és a vizes fázist 2 ízben dietiléterrel extraháljuk. A szerves fázist vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk és bepároljuk. A kapott olajat metilénkloridban feloldjuk és víztisztára szűrjük. A szüredéket szárazra bepároljuk és kisvákuumban szárítjuk, amikoris a cím szerinti vegyületet sárgás olaj alakjában kapjuk. d) L-fenilalanil-L-prolin-terc-butilészter (VI képletü vegyület) 223 g N-benziloxikarbonil-L-fenilalanil-L-prolin-terc-butilésztert a b) pontban leírtakkal analóg módon hidrogénezünk, de oldószerként etanol helyett 2100 ml vízmentes tetrahidrofuránt használunk. A cím szerinti vegyületet színtelen olaj alakjában kapjuk. Kitermelés 100%. e) N-(N-Benziloxikarbonil-D- és -L-a-metil-szeril)-L-fenilalanil-L-prolin-terc-butilészter [I és II tripeptidészter] (V képletü vegyületek) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
