176827. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorgátló, nitrogéntartalmú poliszacharidok előállítására coriolus nemzetségbeli gombák vizes extrakciójával
3 176827 4 ból, a 170/1976 számú japán szabadalmi leírásban (FERM—P 1758 szám alatt deponálva), Rhodophyllus muraii (Berk, et Curt.) Sing. (FERM— P 1753 szám alatt deponálva) és R. salmoneus (Peck) Sing. a Crepidotaceae családból, a 171/1976 számú japán szabadalmi leírásban, Suillus granulatus (Fr.) Kuntze (FERM—P 1759 szám alatt deponálva) a 173/1976 számú japán szabadalmi leírásban. Ezekről az eljárásokról összefoglalóan megállapíthatjuk, hogy az átlagos kitermelésük igen alacsony, mindössze 2,1%. Másrészt a 17161/1976, 17163/1976, 17164/1976, 17169/1976, 17170/1976 és 17171/1976 számú japán szabadalmi leírások vonatkoznak a lejjebb felsorolt gombáknak olyan vizes oldattal történő extrakciójára, ahol az extrahálószer kevés savat, bázist vagy szerves oldószert tartalmaz, és az extrakciót 100 °C-nál alacsonyabb hőfokon végzik. Az alkalmazott gombák: Daedaleopsis styracina (P. Henn. et Shir) a Polyporaceae családból (FERM—-P 1724 szám alatt deponálva) a 17161/1976 számú japán szabadalmi leírásban, Trametes sanguinea (Fr.) Lloyd (FERM—P 751 szám alatt deponálva), T. gibbosa Fr., T. orientalis (Yas.) Imaz., T. cinnabarina Fr., T. albida (Fr.) Bourdot et Galzin és T. dickinsii Berk, a 17163/1976 sz. japán szabadalmi leírásban, Lenzites betulina Fr. (FERM—P 1726 szám alatt deponálva) a Polyporaceae családból a 17164/1976 számú japán szabadalmi leírásban, Favolus alveolarius (Fr.) Quél. (FERM—P 1731 szám alatt deponálva) a Polyporaceae családból, a 17169/1976 számú japán szabadalmi leírásban, Phellinus gilvus (Fr.) Pat. a Mucronoporaceae családból (FERM—P 1734 szám alatt deponálva) a 17170/ 1976 sz. japán szabadalmi leírásban, és Gyrophana lacrymans (Fr.) Pat. (FERM—P 1808 szám alatt deponálva a Coniophoraceae családból a 17171/1976 számú japán szabadalmi leírásban. Az átlagos kitermelés ezekben az esetekben is mindössze 2,3%. Amint látható, a nitrogén-tartalmú poliszacharidoknak a fent felsorolt gombákból, a fent említett ismert módszerekkel történő elkülönítésekor a hozam igen alacsony, mintegy 2%, és ez az alacsony hozam jelenti az ismert eljárások fő hátrányát. A találmány szerint az ismert módszerek fent felsorolt hátrányait kívánjuk kiküszöbölni. Kísérleteink során azt tapasztaltuk, hogy ha a Basidiomycetes osztályba tartozó Coriolus nemzetségbeli gombákat atmoszferikusnál nagyobb nyomáson, 120 °C és 200 °C közötti hőmérsékleten extraháljuk vizes oldószerekkel 5—360 perc extrakciós idővel, akkor kiváló hozammal különíthetünk el nitrogén-tartalmú poliszacharid-típusú, erős tumorgátló hatással rendelkező vegyületeket. A Coriolus nemzetségbe tartozó gombák közül előnyösen használhatjuk a Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2412), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2413), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2414), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2415), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2416), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2417), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2418), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2419), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2420), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2421), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2422), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2423), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2424), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2425), Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM—P 2426), Coriolus consors (Berk.) Imaz. (FERM—P 988), Coriolus hirsutus (Fr.) Quél. (FER M— P 2711) és Coriolus pargamenus (Fr.) Pat. (FERM—P 2712) gombákat. A következőkben a találmány szerinti eljárást részletesen ismertetjük. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy valamely, a Coriolus nemzetségbe tartozó gombát 1,8 kg/cm2 és 20 kg/cm2 közötti nyomáson, 120 °C és 200 °C közötti hőmérsékleten vizes oldószerrel extrahálunk 5—360 percen át. Mindeddig azt tételezték fel, hogy ha a Basidiomycetákat magas hőmérsékleten (például 120—200 °C-on) extrahálják, a gombában levő hatóanyagok bomlást szenvednek, így — noha a hőmérséklet növelésével esetleg fokozható is lenne az extrakció hatásfoka — a kívánt tumorgátló hatóanyag hozama ezzel a módszerrel nem növelhető. Kísérleteink során azt tapasztaltuk, hogy e feltételezéssel ellentétben a kívánt tumorgátló hatóanyagokat igen jó hozammal különíthetjük el, ha az extrakciót a fent ismertetett hőmérséklethatárok között, atmoszferikusnál nagyobb nyomáson végezzük. Az extrakciós műveletet a találmány értelmében úgy hajthatjuk végre, hogy a kiindulási anyagot, azaz a Coriolus nemzetségbeli gomba micéliumait és/vagy termősejtjeit, továbbá a vizes oldószert nyomásálló edénybe, például szakaszosan üzemeltethető autoklávba vagy átáramlásos típusú csöves extraktorba mérjük be, majd a hatóanyagot 120 °C és 200 °C közötti hőmérsékleten kivonjuk. Az extrakciót a tartályban levő vizes oldószer össz-gőznyomásával egyenértékű nyomáson hajtjuk végre. Az extrakciót 20 kg/cm2-nél alacsonyabb, célszerűen 16 kg/cm2-nél alacsonyabb nyomáson végezzük, a nyomás értéke azonban nem lehet kisebb 1,8 kg/cm2-nél. Az extrakció ideje a hőmérséklettől függően változik; az extrakció rendszerint körülbelül 5—360 percet vesz igénybe. Ha az extrakciót 120 °C-nál alacsonyabb hőmérsékleten végezzük, nem biztosíthatunk megfelelő hatásfokot, míg ha a hőmérsékletet 200 °C-nál nagyobb értékre növeljük, a hatóanyag bomlást szenvedhet, ami rontja az eljárás hozamát. Meg kívánjuk még jegyezni, hogy 5 percnél rövidebb ideig tartó extrakció esetén a hatóanyagot csak kis hatásfokkal különíthetjük el, míg ha az extrakció ideje meghaladja a 360 percet, a hatóanyag bomlást szenvedhet. Ennek megfelelően az extrakció idejét az adott (120 °C és 200 °C közötti) hőmérséklet figyelembevételével célszerűen 5 perc és 360 perc közötti értékre állítjuk be. A találmány szerinti eljárás végrehajtása során az extrakciós műveletet a fent ismertetett körülmények között többször is megismételhetjük. Eljárhatunk úgy is, hogy a kiindulási anyagként felhasznált, Coriolus-nemzetségbeli gombát az extrakció megkezdése előtt 100 °C- nál alacsonyabb hőmérsékletű vizes oldószerben áztatjuk, vagy a kapott extraktumot 100 C°-nál alacsonyabb hőmérsékletű vizes oldószerrel mossuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
