176636. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Nindex 4-es(fönt)-acil-1ß-D-arabinofuranozil-citozin-foszfát-származékok előállítására
5 176636 6 A kapott nyers reakcióterméket oszlopkromatográfiával [szilikagél és 1000 térfogat kloroform/metanol elegy a reakciótermék-súlyegységre vonatkozóan] vagy átkristályosítással [10-20 térfogat dioxán/víz elegy, etanol, stb. a nyerstermék súlyegységére vonatkozóan] tisztíthatjuk. A reakciótennék elemzését ultraibolya és infravörös abszorpciós spektruma, mágneses magrezonancia spektruma és elemi analízise útján végezzük el. Az ultraibolya abszorpciós spektrum az N4-acil■citozin-rész jelenlétét és az infravörös abszorpciós spektrum az N4-acil-amid és a foszfát-észter abszorpcióját mutatja ki. Az 5’-foszfátcsoport jelenléte a mágneses magrezonancia spektrum útján mutatható ki annak a ténynek köszönhetően, hogy a kiindulóanyag S’-metiléncsoportjának mágneses erőtéreltolása mintegy 0,5 ppm-mel alacsonyabb. A fentiek szerint előállított I általános képletű vegyület foszfátcsoportja bázissal sót képez ami a találmány szerinti vegyületet vízoldhatóvá teszi és ezzel farmakológiai hasznosíthatósága növekszik. Közelebbről az I általános képletű vegyület könynyen átalakítható nem mérgező fémsókká, így nátrium-, kálium-, kalcium- vagy alumíniumsóvá, nem mérgező ammóniumsóvá, vagy nem mérgező szubsztituált ammóniumsókká, mint trialkil-amin, pr okain, dibenzil-amin, N-benzil-|3-fenetil-amin, N,N’-dibenzil-etilén-diamin, dehidroabietil-amin, N-kisszénatomszámú alkil-piperidin, arginin, lizin, kolin stb. sóivá. Az I általános képletű vegyület nem toxikus sóit úgy állítjuk elő, hogy az I általános képletű vegyületet a fém, ammonium, vagy amin ekvimolekulárís mennyiségű hidrogén-karbonátjával, hidroxidjával vagy savaddíciós sójával reagáltatjuk vizes oldószerben, majd az oldószert eltávolítjuk. Az I általános képletű vegyület említett fémsói, ammóniumsői és szubsztituált ammóniumsói vízben oldhatók. így a találmány szerinti I általános képletű vegyület vizes oldatához szükség esetén izotóniás közeget, fájdalomcsillapító, baktériumölő szert és/vagy gombásodásgátló anyagot adva a találmány szerinti I általános képletű vegyület injiciálásra alkalmas vizes készítményét állíthatjuk elő, amely például intravénás, szubkután, intramuszkuláris, intraperitoneális vagy intramedulláris injekció útján adagolható. A találmányt részletesebben ismertetjük néhány, a találmány oltalmi körét nem korlátozó példával. Más megjelölés hiányában a műveleteket légköri nyomáson hajtjuk végre. 1. példa Jeges hűtés közben, egymás után 0,97 ml piridint és 0,49 ni metanolt adunk 2,20 nd foszforil-(trijklorid 10 ml dioxánnal készült oldatához, majd a fenti hőmérsékleten 3,30 g N4-sztearoil-l-0- -D-arabinírfuranozil-citozint adunk az oldathoz és az elegyet 4 óráig keveijük. A reakéóflegyet keverés közben 6 g nátrium -hidrogén-karbonátot tartalmazó 100 xri jeges vízhez adjuk, és a képződött csapadékot centrifugálással (15 perc, 3000 fordulat/perc) tömörítjük. A csapadékot 100 ml vízhez adjuk, az elegyet keveijük és a csapadékot ismét centrifugálással összegyűjtjük. Ezt a műveletet még háromszor megismételjük, a kapott csapadékot feszüljük, vízzel mossuk és vákuumban megszárítjuk. 5 A szilárd maradékot metanolból átkristályosítva 3,01 g N4-sztearoil-l-j3-D-arabmofuranozil-citozin-5’-foszfátot kapunk fehér amorf anyag alakjában. Elemi analízis a C27H4809N3P képlet alapján: számított: C =54,99% H=8,21%, N = ' 7,13%, talált: C =54,16%, H =8,42%, 15 N = 7,08%. ■ UV abszorpciós spektrum (metanol) Ámax = 248 m/i és 299 mp . NMR-spektrum (piridin-ds): §0,86, 1,0-2,0 20 HCH2)1s-], 2,61 (—COCHs), 4,4-5,1 [cukorgyűrű proton (cp)], 6,90 (l’-CH), 7,60 (5-CH), 8,61 (6-CH) ppmf. Olvadáspont: 215—2J8 °C (bomlás). ? . ^ A termék egy.ráizét (50 mg) ß ml vizfes ammó.'25 ' ráa ’és 10 nff mltanoí efegyéhéz adjuk, ' p 1,68 g nátriüm-jűdrogén^carbbriát hozzáadása után az efegyet élénken keveijük, amíg homogén kolloid oldat képződik. Az elegyet liofilizálva 1,14 g fehér szilárd N4 - s z t earoil-1 -/3-D-árbinofuranozil-citozin-5 30 -foszfát-mononátriumsót kapunk. A fenti vegyületet alkálifémsó formájában állíthatjuk elő, ha a fenti eljárásban víz és etanol helyett csak vizet használunk, például 1,10 g hí4- - szte ar o il -1 -(3-D-arabmofuranozil-citozin-5 ’-foszfátét 35 200 ml vízben szuszpendálunk és 0,16 g, nátam»-hidrogén-karbonátot adva a szuszpenzióhoz 30 percig 60 °C-on keveijük. Az oldatot leszűrve és liofi^ zálva 118 g fehér, szilárd N4 -sztearoil-1 -ß-D-arabinofuranozil-citozin-5’- foszfát-mononátriumsót kapunk. .40 Elemi analízis a C^HL^OgNsPNa képlet alapján: számított: C = 52,93%, H = 7,73%, 45 N = 6,86%, talált: C = 52,24%, H = 7,56%, N = 6,33% W abszorpciós spektrum (víz): Xm8x=247 és 50 299 vm . 0,168 g nátrium -hidrogén-karbonát helyett 0,487 g 50%-os, vizes kolinoldatot vagy 0,122 g etanol-amint használva 1,2 g N4-sztearoil-l<ß-D- 55 -arabinofuranozil-citozin-monokolin-, illetve 1,15 g •etanol-amin-sót kapunk. Hasonló módon 1,10 g N4 -sztearoií-l -0-D-arabinofuranozil-citozin- 5’-foszfátot 70 ml víz és 35 ad 60 etanol elegy ében szuszpendáíunk, majd 0,336 g nátrium-hidrogén-karbonát hozzáadása után az. elegyet 50 °C-on 3 óráig élénken keverve homogén kofioii oldatot kapunk. Az oldatot liofilizálva 1,18 g fehér, szilárd N4 -sztearofl-1 ^-D-arabtoftOTóoaÉ-dto- 55 zin-5’-foszfát-dinátriumsót állítunk -e». 3
