176422. lajstromszámú szabadalom • Eszköz elsősorban élmiszerek bakteriális szennyezettségének illetve a baktériumok enzimtevékenységének laboratóriumi szintű gyorsdiagnosztikai megitélésére
3 176422 4 számának mérésével, a keményítőbontó aktivitást az A táptalajra káliumjodidos jódoldatot cseppentve, és a színtelen telepek számának megállapításával, a fehérjebontó aktivitást a B táptalajt savas higanyklorid-oldattal kezelve és a színtelen telepek számának mérésével, a zsírbontó aktivitást pedig a B táptalajra etanolos indoxilbutirát-oldatot cseppentve, a kék telepek számából határozzuk meg. A Nagy-Britanniában kidolgozott ún. deep-slide elv alkalmazásával végeztek már vizeletvizsgálatokat, e módszert azonban más célokra nem használták. A találmány szerinti eszköz egy védőburokból, egy, a védőburokba beillő záródugaszból, valamint a táptalajokat tartalmazó, a dugaszhoz erősített idomból áll. Az eszköz egy célszerű és helyszíni vizsgálatra igen alkalmas kiviteli alakját az 1. ábra szemlélteti: az la. ábra a készülék elölnézetét, az lb. ábra oldalnézetét mutatja, az le. ábra a készülék felülnézete, az ld. ábra pedig az I-I metszet képe. Az eszköz védőburka célszerűen egy átlátszó üveg- vagy műanyag henger (1), mely egyik végén zárt, másik végébe pedig egy jól záró dugasz (2) illeszkedik. A dugasznak a hengerbe nyúló feléhez műanyag, vagy egyéb sterilizálható anyagból készült lemez (3) csatlakozik, mely célszerűen mindkét oldalán peremmel van ellátva, a táptalajöntés egyszerűsítésére. A táptalajoknak (4) a lemezre történő felvitele és megszüárdulása után a hengert (1) és dugaszt (2) összeillesztjük, és alkalmas módon, például UV-fénnyel vagy ionizáló sugárral sterilizáljuk. Készíthetjük az eszközt természetesen úgy is, hogy az előre sterilizált dugasz-lemez egységre steril körülmények között viszünk fel steril táptalajt, majd az így kapott idomot egyesítjük az ugyancsak sterilizált hengerrel. A csíraszám meghatározására bármely ismert, előnyösen az élelmiszer bakteriológiai szabványban vagy útmutatóban előírt táptalajt használhatunk. Az enzimtevékenység meghatározására célszerűen olyan speciális táptalajokat használunk, melyek valamely, az illető enzim számára alkalmas szubsztrátumot tartalmazzák. Ilyen esetben az enzimtevékenység meghatározására csak a pozitív reakciót mutató telepek számát vizsgáljuk. Ilyen célra alkalmas táptalajok például a következők: Bacto pepton (fehérje hidrolizátum) 20,0 g (más peptonnal helyettesíthető) NaCl 5,0 g Agar-agar 20,0 g Répacukor 10,0 g (vagy más vizsgálandó cukor) Oldható keményítő 5,0 g Fenolvörös indikátor 0,02 g (5 ml 0,4%-os oldat) Húslé 100 ml-re (vagy „Oxoid” Lab-Lemco beef extr.) A táptalajt kb. 8-as pH mellett, gőzben felolvasztjuk, szükség esetén szűrjük, és a pH-értéket 7,2-re állítjuk be, a táptalaj piros színű lesz. Ez a táptalaj a baktériumok cukor- és keményítőbontó aktivitásának meghatározására szolgál. A cukorbontó telepek közül az indikátor színe sárgába csap át. A kenyítőbontó telepek meghatározásánál a táptalaj felületére lúgoldatot cseppentünk, az aktív telepek körül nem jelentkezik a kék szín. (A lúgoldat összetétele: 1,3 g jód, 2,5 g KJ, desztillált vízzel 10 ml-re hígítva). Másik előnyös táptalaj a következő: Bacto pepton (fehérje hidrolizátum) 20,0 g (más peptonnal helyettesíthető) NaCl 5,0 g Agar-agar 20,0 g Zselatin (vagy más, vizsgálni kívánt fehéije-jellegű anyag) 20,0 g Húslé (vagy „Oxoid” Lab-Lemco beef extr.) 100 ml-re A táptalajt gőzben felolvasztjuk kb. 8-as pH mellett, és szükség esetén szűrjük. A végleges pH 7,2. A zsírbontó telepek meghatározására a táptalajra 0,25%-os etanolos indoxilbutirât oldatot csepegtetünk, illetve a szubsztrátumot alkalmas nagyságú szűrőpapírra itatva a telepre helyezzük. Két percen belül jelentkező intenzív kék szín a megfelelő telepek körül erős észteráz-termelő baktériumok jelenlétére utal. A fehérjebontás (zselatinbontás) meghatározására a táptalajra szublimátoldatot csepegtetünk, vagy az egész táptalajt szublimátoldatba mártjuk. A fehérjebontó telepek körül színtelen udvar marad. (A szublimátoldat összetétele: 15,0 g Hga2, ce HC1 20,0 g, deszt. víz 100g-ra). Az eszköz egy előnyös kiviteli változata szerint a táptalajt tartalmazó lemez mindkét oldala peremmel ellátott, és a lemez két oldalára célszerűen az előzőekben említett két különböző táptalajt visszük fel. Az összcsíraszám a lemez bármely oldalának tapasztalati standarddal történő összehasonlításával leolvasható, az egyes enzimtevékenységek pedig az előbb ismertetett módon meghatározva nemcsak az enzim jelenlétére és az azt tartalmazó mikroorganizmusok számára, hanem a vizsgálatot végző szakember számára egyben a mikroorganizmus fajára nézve is útmutatást adnak. Nyilvánvaló, hogy az eszköz formája és kivitele nem korlátozódik a fenti kiviteli alakokra, hiszen mind a burkolórész, mind pedig a táptalajt tartalmazó idom eltérő alakú lehet, így például nemcsak két, hanem több táptalajt is tartalmazó eszköz is 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
