176142. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tisztított albumin kinyerésére vérplazmából
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 176142 £ Bejelentés napja: 1978.1. 20. (NO—225) Elsőbbsége Dánia: 1977.1. 21. (258/77) Nemzetközi osztályozás: A 23 J 1/06 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI Közzététel napja: 1980. VI. 28. ~i U - J HIVATAL Megjelent: 1981. VII. 31. Feltaláló : Szabadalmas : Hansen Jorgen Frederik, vegyész, Rodovre, Dánia Nordisk Insulinlaboratorium, Gentofte, Dánia Eljárás tisztított albumin kinyerésére vérplazmából 1 A találmány tárgya új eljárás tisztított albumin kinyerésére vérplazmából. Az ismert eljárások szerint az albumint alkoholokkal, például etanollal alacsony hőmérsékleten végzett frakcionált kicsapással különítik el a vérplazmából, vagy pedig a kicsapást fiziológiás sóoldatban hajtják végre, például ammóniumszulfát fokozatos hozzáadásával. Ezeknek az ismert eljárásoknak több hátrányuk is van. így az etanollal végzett kicsapások során a fehérje könnyen denaturálódik, és ennek következtében csökken a termelés. A fiziológiás sóoldatban végrehajtott kicsapásoknál az elválasztás nem éles, és így szenynyezett termék képződik. A 3 415 804 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás fehérjeelegyek frakcionált kicsapását ismerteti. A kicsapást polietilénglikol jelenlétében hajtják végre, mivel az gátolja a fehérjék diszpergálhatóságát. Ezt az eljárást emberi vérplazma frakcionálására is alkalmazták, azonban a kapott frakciókat — ezek egyike albuminfrakció volt — ß-globulin és más fehérjék szennyezték. Ennek következtében ez az ismert eljárás nem szolgáltat gyógyászati célokra alkalmazható, megfelelően tisztított albumint. Az 1252/75 számú dán szabadalmi leírás eljárása szerint az albumint úgy különítik el a vérből és hasonló termékekből, hogy az albumint tartalmazó folyadékot valamely alkohol és albumin-stabilizáló anyagok jelenlétében hevítik. Erre a célra különféle stabilizáló anyagokat sorolnak fel, s például kaprilsav-származékokról 2 tesznek említést. Ezzel az ismert eljárással sem sikerült azonban teljesen kiküszöbölni az etanolnak vagy más hasonló alkoholoknak azt a hátrányát, hogy a fehérjéket denaturálják. 5 Ismeretes továbbá a 134 425 számú publikált dán szabadalmi bejelentésből, hogy albumin termokoagulálással is előállítható. Az albumint tartalmazó oldatot, például placentát vagy emberi vérplazmát, kaprilsav ionjai jelenlétében, 52—64 °C közötti hőmérsékleten és 10 4,8—5,25 közötti pH-értéken kezelik. A termokoagulálásnál hemoglobin, denaturált albumin és idegen fehérjék válnak ki. A tisztított albumin oldatban marad, amelyből azután kinyerhető. Ez az utóbbi ismert eljárás is meglehetősen szennye- 15 zett terméket szolgáltat. A termék tisztasága fokozható ugyan olyan módon, hogy a termokoagulálás előtt frakcionált kicsapást hajtanak végre, például triklórecetsavval és etanollal, azonban gyógyászati célokra alkalmas tiszta termék még ilyen módon sem nyerhető. 20 A termokoagulálás a 739 024 számú nagy-britanniai szabadalmi leírásból is ismert, azonban ennél az ismert eljárásnál nem végeznek előzetes leválasztást polietilénglikollal. A technika állásának a vizsgálata során megállapít- 25 ható, hogy az ismert eljárások alapján előállított albuminban a következő szennyezések fordulnak elő: 1. Egyéb proteinek, amelyek döntő részének az elkülönítése kielégítő mértékben megtörténik és a megmaradó rész eltávolítása már nem indokolt. 176142
