176105. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új trifenil-alkanol származékok előállítására
176105 6 10~7 M B 71,5%-ban gátolta a 10'9 M sH-ösztradiol kötődését A bemutatott in vitro és in vivo adatok azt bizonyítják, hogy A és B vegyületek nagyfokú gátló, illetve gyógyító hatást fejtettek ki az egyébként igen rezisztens és kemoterápiára alig reagáló kísérlete., emlőkarcinómára. A vegyülettípus orálisan is hatékony. A hatás mindig tartós és az állatok végleges gyógyulását, vagy 2—3 hónapos remissziót eredményez. Rendkívül fontos hatása a vegyületeknek, hogy a legtöbb esetben meggátolták újabb tumorok kifejlődését. A vegyületek hatásukat az ösztrogén receptorokhoz való erős kapcsolódás útján fejtik ki. A és B vegyületek ösztrogén (1) és antiösztrogén (2) hatásának vizsgálata. 1. A vegyületek ösztrogén hatását egér és patkány uterusz teszten [Edgren, R. A. és mtsai: Steroids 2. 319 (1957)] vizsgáltuk. Infantilis állatok a vizsgálati anyagot emelkedő dózisokban, naponta egy alkalommal s. c., 0,1 ml volumenben, 1% Tween 80-at tartalmazó vizes szuszpenzióban, 3 napon át kapták. A vizsgálat 4. napján az állatokat megöltük és az uteruszok súlyát tisztítás után torziós mérlegen mértük. A 2,5-szeres uterusz súlynövekedést okozó dózisokat az alábbi táblázat tartalmazza : 5 Dózis Vizsgálati ; Egér ! Patkány anyagok j___________________|_______________ ! [xg/áüat/nap { mg/kg/nap [ se. 1 se. A 2,5 0,5 B 10,0 U Ösztradiol 0,00043 0,0017 2. A vegyületek antiösztrogén hatását Harper, M. J. K. és mtsai: J. Repród. Fért. 13. 101 (1967) szerint vizsgáltuk egereken és patkányokon. Infantilis állatok a vizsgálati anyagokat a fentiekben ismertetett módon 3 napon át s. c. kapták. Az egereket egyidejűleg napi 0,03 pg, a patkányokat pedig napi 0,3 fxg ösztradiol-benzoáttal kezeltük. Az ösztradiol okozta uterusz súlynövekedést az egyidejűleg adott antiösztrogén hatású vegyület dózistól függően csökkenti. A gátlást, azaz az antiösztrogén aktivitás mértékét %-ban adjuk meg. Vizsgálati anyag Dózis (ig/állat/nap sc. Gátlás % Tamoxifen 0,3 22,5 (ICI) 1,0 23,5 3,0 39,2 10,0 46,2 EGÉR A 1,0 24 3,0 26 10,0 42 B 3,0 14 10,0 21 30,0 30 Dózis: mg/kg/nap se. 5 Tamoxifen 1 1,0 63,5 (ICI) 3,0 63,9 10,0 70,5 PATKÁNY A \ 1,0 0 10 10,0 20,0 B 1,0 0 10,0 34,6 Irodalomból ismert [Harper, M. J. K. és mtsai J. Repród. Fért. 13. 101 (1967)], hogy a Tamoxifen 15 [Z-l,2-difenil-l-(p-)2-(dimetilaminoetoxi)-fenil(-l-buten)-citrát] egerekben gyenge ösztrogén, magasabb dózisokban enyhe antiösztrogén, patkányokban azonban erős antiösztrogén hatást mutat. A és B jelzésű vegyületek mindkét állatfajban az 20 ösztradiolhoz képest gyenge ösztrogén hatást mutatnak. Antiösztrogén hatásuk egerekben nagyságrendileg megközelíti a Tamoxifen hatását, patkányokban azonban attól elmarad. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek 25 felhasználhatók gyógyászati készítmények előállítására oly módon, hogy az I általános képletű trifenil-alkanolszármazékot nem toxikus, gyógyászatilag alkalmas, közömbös hígítószerekkel és/vagy hordozókkal együtt gyógyászati készítménnyé alakítjuk. 30 A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi kiviteli példákat adjuk meg: 1. példa 35 IR, 2R + 1S, 2S—2-etil-l-fenil-l-(4-hidroxifenil)-feniletanol (I képletben X=H, Y=OH) 7,78 g Magnézium-forgácsot 120 ml vízmentes THF- 40 ban 31,6 ml (300 mM) brómbenzollal reagáltatva a szokásos módon fenilmagnéziumbromid oldatot készítünk. Az oldathoz keverés közben, a hőmérsékletet 35—40 C° között tartva, 24,03 g (100 mM) l-(4-hidroxifenil)-2- -fenil-l-butanon 40 ml vízmentes THF-os oldatát ada- 45 góljuk 30 perc alatt, majd a kapott oldatot 1 órán keresztül visszafolyató hűtő alatt forraljuk, végül hűtés k őzben — a hőmérsékletet 20—25 C°-on tartva — 400 ml 10%-os ammóniumklorid oldattal egyesítjük. A kapott keveréket háromszor 100 ml kloroformmal extraháljuk. 50 Az egyesített kloroformos fázisokat 50 ml 10%-os ammóniumklorid-oldattal mossuk, majd magnéziumszulfáttal szárítjuk. Az oldatot vákuumban bepároljuk és a desztillálást 100 ml benzol beadagolása után tovább folytatjuk. A kapott olajos maradékot 200 ml hexánnal 55 jól elkeverve az olaj kikristályosodik. Egy órai állás után a kristályokat szűrjük, majd 50 ml hexánnal mossuk. Ily módon 28,8 g (90,5%) cím szerinti terméket kapunk (op.: 117—123 C°), amelyet éterhexán elegyből kristályosítunk át. Hozam: 21,42 g (67,5%), op.: 119— 60 121 C°. Elemzési eredmények C22H2202 képletre (ms. 318,42): számított: C=83,00%; H=6,95%; talált: C=83,17%; H=6,78%. A kiindulási anyagként használt l-(4-hidroxifeniI)-2- 65 -fenil-l-butanont az 1 013 907 sz. nagy-britanniai sza-3
