176105. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új trifenil-alkanol származékok előállítására

3

176105

4

In vivo vizsgálatok

A vizsgálatokat nőstény, szűz, CFY patkányokkal végeztük. Az állatok 50 napos korukban, egy hét különbséggel kétszer 10 mg DMBA-t kaptak szájon át oleum heliathiban oldva 0,5 ml/állat volumenben. Az emlőtumorok az indukciót követő 5—6. héttől kezdtek kialakulni. Tumorosnak azokat az állatokat tekintettük, amelyeknek jól körülhatárolt, legalább babnyi (kb. 500 mm3) tumoruk volt. Ilyen állatokon kezdtük el a kezelést. A kísérleti periódus 3 hónapjából 2 hónapig tartott a heti háromszori kezelés és 1 hónapig a kezelés-mentes megfigyelési idő. A tumorok nagyságát és számát 10—14 naponként határoztuk meg. A kezeletlen állatokban a tumorok egyenletesen nőttek, a tumorok száma a 4—8-at is elérte. A tumorok lokális és általános hatásai 3—4 hónap alatt vezettek a kezeletlen állatok pusztulásához. A kezelés hatékonysága a növe- 5 kedés elmaradásában és új tumorok kialakulásának gátlásában mérhető fel.

Az I. sz. táblázatban foglaltuk össze eredményeinket, melyeket P. Griswold és mtsai: „Induced Mammary Carcinoma in the Female Rat as a Drug Evaluation 10 System” [Cancer Research 26. 2169—2180 (1966)] módszere szerint határoztunk meg. Ennek megfelelően megadjuk a különböző időpontokban meghatározott átlagos tumortömeget, átlagos tumorszámot, az életben levő állatok számát, az objektív hatást, a gyógyult állatok 15 számát, valamint a mellékhatásokat.

I. táblázat

A és ß vegyületek hatása indukált patkány mammaadenocarcinomán

A

B

Kontroll

Tamoxifen

IV

Dózis mg/kg

1

20

20

2

2

20

vivőanyag

20

20

Kezelés

po.

se.

po.

se.

se.

se.

se.

se.

0 nap

Átm. mg

855

524

598

483

515

820

653

500

Átsz.

2,2

2,2

1,0

1,4

1,2

1,5

1,0

1,2

Ász.

5

5

5

5

5

6

6

5

Átm. mg

2162

334

2660

5243

880

24 965

2747

1 3000

30 nap

Átsz.

1,8

0,8

2,0

2,2

1,0

3,5

1,0

1,2

Ász.

5

5

5

5

5

6

5

5

Átm. mg

1717

340

3894

8182

262

41 103

814

2 750

60 nap

Átsz.

1,0

0,4

3,0

3,3

1,7

3,5

0,5

1,0

Ász.

5

5

5

3

3

4

5

5

90 nap

Átm. mg

2734

2680

kíséf

befejezi

et

5dött

856

39 297

1481

10 500

Átsz.

1.8

1,6

1,7

4,0

1,8

1,0

Ász.

5

5

3

3

5

3

Obj. hatás

5/5

5/5

3/5

3/5 :

5/5

0/6

5/6

3/5*

Gyógyult

2/5

4/5

1/5

2/5

3/5

0/6

3/6

0/5

Mellékhatás, testsúly csökkenés

0

0

0

' 0

0

Kísérlet közepétől súlycsökkenés

0

0

Átm.: átlagos tumortömeg; Átsz.: átlagos tumorszám; Ász.: élő állatok száma IV=l,2-difenil-l-(p-hidroxi-fenil)-but-en

* =A hatás a tumor átmenetileg változatlan állapotában nyilvánult meg.

In vitro vizsgálatok

Megvizsgáltuk a vegyületeknek ösztrogén receptorokhoz való kötődését. A receptorokat L. Terenius: European J. Cancer 9.291—294 (1973) módszere szerint izoláltuk.

A módszer lényege, hogy izolált, oldható ösztrogén receptorokat összehozunk 10~9 M BH-ösztradioIlal [2,4,6,7(n>3H-ösztradiol, spec, aktív. 93 Ci/mM; Amersham, Anglia] és 10-7, illetve IQ-5 M vizsgálandó vegyülettel. Folyadék szcintillációs mérések alapján ki-55 számoltuk, hogy vizsgált vegyületeink hány %-ban gátolják a jelzett ösztradiol receptor-kötődését.

Eredmények

60 10~s M A 72,4%-ban gátolta a 10“9 M BH-ösztradiol kötődését

10-3 M fi 87,9%-ban gátolta a 10~9 M 3H-ösztradioI kötődését ,,,

10~7 M A 40,7%-ban gátolta a 10~9 M 3H-ösztradiol 65 kötődését

2