176075. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új guanilhidrazon-származékok és ilyeneket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
5 176075 6 szulfonsavat adunk. Az aceton főtömegét (200 ml) lepároljuk, és a maradékhoz étert adunk. A kivált p-metil-fenoxi-acetaldehid-guanilhidrazon-meninszulfonátot aceton és éter elegyéből átkristályosítjuk. 141 C°on olvadó terméket kapunk. 4—23. példa Az előző példákban közölt eljárással állítjuk elő az 1. táblázatban felsorolt (1) általános képletű vegyületeket 5 szabad bázisok vagy savaddíciós sók formájában. 1. táblázat PéJda száma Rí R, Rj R. R. R R' Op.c 4. —H —H —H —H —H —H-H 190 (szulfát) 5. —H —Cl —H —H —H —H-H 202 (szulfát) 6. —H —H 1 —Cl —H —H —H —H 230 (szulfát) 7. —H ch3o —H 1 —H —H-H-H 172 (szulfát) 8. —H —H —h3o —H —H —H —H 193 (szulfát) 9. —CH3 —H —H —H —H —H —H 196 (szulfát) 10. —H-ch3 —H —H —H —H —H 202 (szulfát) 11. —H —H-ch3 —H —H —H-H 208 (szulfát) 12.-CH(CH3)2 —H —H —H —H-H —H 186 (szulfát) 13. —H —H —Br —H —H-H —H 226 (szulfát) 14. —H —H —F —H —H-H-H 240 (szulfát) 15. —CH3 —H —ch3 —H —H —H-H 215 (szlfát) 16. —H —ch3 —ch3 —H —H —H-H 210 (szulfát) 17. —H —ch3-ch3 —ch3 —H —H —H 239 (szulfát) 18. —Cl —H —Cl —H —H —H —H 248 (szulfát) 19.-C(CH3)3 —H —H —H-H —H —H 20. —H —H-C(CH3)3 H —H —H —H 21. —H —H —H —H-H-ch3 —H 22. —H —H —H-H-H-ch3-ch3 23. —ch3 —H —H-H —H-ch3 —H Miként már korábban közöltük, a találmány szerinti 35 eljárással előállított (1) általános képletű vegyületek értékes gyógyászati aktivitással, elsősorban mitózisgátló, vérlemezke-aggregációt gátló és monoamin-oxidáz-gátló hatással rendelkeznek. Az (I) általános képletű vegyületekkel végzett farmakológiai vizsgálatokat és a 40 vizsgálatok eredményeit az alábbiakban ismertetjük. 1. Monoamin-oxidáz-gátló hatás vizsgálata A guanilhidrazon-származékok monoamin-oxidázgátló hatását patkánymájon vizsgáltuk spektrofotometriás módszerrel. Szubsztrátumként kinuramint al- 45 kalmaztunk. A kísérletek során az egyes guanilhidrazonszármazékokat többféle koncentrációban vizsgáltuk. Azt a vegyületkoncentrációt, amely 50%-os gátló hatást biztosít, pl30-nel jelöltük. A pi30-értékeket a következőképpen számítottuk ki : 50 Minden egyes vizsgált vegyületkoncentráció esetén körülbelül tíz párhuzamos kísérletet végeztünk, és az n; számú párhuzamos kísérletben észlelt aktivitás-értékekből kiszámítottuk az adott Cj koncentrációhoz tartozó átlagos aktivitást (Yj). összesen NT=2n( kísérle- 55 tét hajtottunk végre. A további számításokhoz csak azokat a Cj koncentrációkat vettük figyelembe, amelyek esetén 15% és 85% közötti átlagos aktivitást észleltünk. Ezután a legkisebb négyzetek módszerével kiszámítottuk az Y,=f(Cj) egyenes egyenletét, majd meghatá- 60 roztuk az Y=50% ponthoz tartozó koncentráció értékét, azaz a pl^-értéket. A lineáris modell alkalmazásának helyességét statisztikai számításokkal ellenőriztük. A statisztikai számítások során az összes végzett kísérlet (NT) adatait figye- 65 lembe vettük; e számítások igazolják, hogy az aktivitás és a koncentráció között valóban lineáris összefüggés áll fenn. A pl50-érték számításához felvett egyenes egyenletét csupán az átlagos aktivitások figyelembevételével számítottuk ki; ez azt jelenti, hogy e számításokban figyelembe vettük az átlagokat befolyásoló diszperziókat. A kapott adatokból a=0,05 értékre kiszámítottuk a megbízhatósági határokat. Az 1., 2. és 4—8. példa szerint előállított vegyületek pl30-értékeit a 2. táblázatban soroljuk fel. 2. táblázat Vegyület 4. 1- : 5. i 6. ; 2. 7. ; 8. [ í ; ! 1 (példa) P* 50 4,90 4,94 ; 4,70 4,70 4,94 j 5,16 4,50 ! í 1 1 í 2. Mitózisgátló hatás vizsgálata A) Növényi sejtek növekedésére kifejtett gátló hatás vizsgálata A kísérletekben a guanilhidrazon-származékok Lipidium sativum gyökér-merisztémájának növekedésére gyakorolt gátló hatását vizsgáltuk. Ezt a vizsgálati módszert általánosan alkalmazzák vegyületek citosztatikus hatásának értékelésére. A vizsgálandó guanilhidrazon-származékot 1% metilcellulózt tartalmazó 15 ml vizes oldatban szuszpendál-3
