175948. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nitrogént tartalmazó poliszacharidok nagyüzemi előállítására
5 175948 6 1. táblázat Színreakció Szín Eredmények o-naftol-kénsavas reakció szacharidok (Molish reakció) bíbor jelenléte indol-kénsavas reakció szacharidok (Disch reakció) barna jelenléte antron-kénsavas zöldesszacharidok reakció kék jelenléte fenol-kénsavas szacharidok reakció barna jelenléte triptofán-kénsavas bíborszacharidok reakció barna jelenléte Lowry—Folin reakció kék peptid-kötések jelenléte sósavas hidrolízis, bíbora-aminosavak majd ninhidrinkék jelenléte-reakció Az 1. táblázatban felsorolt adatok azt igazolják, hogy a találmány szerinti eljárással előállított termék egy nitrogéntartalmú poliszacharid. A termék ultracentrifugás módszerrel meghatározott molekulasúlya 5000 és 300 000 közötti érték, súlyarányos molekulasúlya pedig 10 000 és 100 000 közötti érték. Az egyéb mérési módszerekkel, például ultraszűrő membránon végzett frakciónál ássál meghatározott molekulasúly-értékek minden esetben 10 000 és 100 000 közötti számnak adódtak. Nagy valószínűséggel állíthatjuk tehát, hogy a találmány szerinti eljárással kapott termék molekulasúlya 10 000 és 100 000 közötti érték. A találmány szerinti eljárással előállított nitrogéntartalmú poliszacharid egereken intraperitoneális és orális adagolás esetén egyaránt igen jó tumorgátló hatást fejt ki, ennek megfelelően ez a termék a gyógyászatban igen kedvezően használható fel orálisan adagolható daganatellenes hatóanyagként. A találmány szerint előálított termék további kedvező hatása, hogy ellensúlyozza a gazdaszervezet csökkent immunitását. Ennek megfelelően a találmány szerint előállított terméket nemcsak a rák kemoterápiás kezelésére, az akkor fellépő kedvezőtlen mellékhatások visszaszorítására és a sugárterápiás kezelés hatékonyabbá tételére használhatjuk fel, hanem a beteg fizikai erőnlétének vagy immunitásának fokozására is alkalmazhatjuk. Miként ismert, sebészeti beavatkozások vagy vértranszfúziók esetén jelentős mértékben csökken a beteg fizikai erőnléte és immunitása, így a betegek baktérium- vagy vírusfertőzésekkel szemben fogékonyabbá válnak. A találmány szerinti eljárással előállított termék adagolásával ezt a kedvezőtlen hatást ellensúlyozhatjuk. A találmány szerinti eljárásai előállított tennék orális adagolás esetén igen nagy mértékben javítja a májfunkciót, fokozza a beteg étvágyát, gyógyítja a bélrendszeri rendellenességeket és fokozza a vizeletkiválasztást. A találmány szerinti eljárással kapott termék a lepra kezelésére is alkalmas. A találmány szerinti eljárást az oltalmi kör korlátozása nélkül az alábbi példákban részletesen ismertetjük. Amennyiben egyebet nem közlünk, a példákban megadott százalékos értékeken mindig súly%-ot értünk. 1—5. példa 2 m3 űrtartalmú függőleges fermentorba 1600 liter, 10% glükózt, 1,5% élesztőkivonatot, 0,1% kálium-dihidrogénfoszfátot és 0,1% magnéziumszulfát-heptahidrátot tartalmazó vizes táptalajt töltünk, és a táptalajt 20 liter oltótenyészettel oltjuk be. Az oltótenyészetet Coriolus versicolor (Fr.) Quél FERM—P—2414 gombafaj rázott tenyésztésével állítjuk elő. A tenyésztést 7 napon át 26 °C-on, 0,5 liter/perc/liter közeg sebességű levegőztetés és 150 fordulat/perc sebességű keverés közben végezzük. Az így kapott tenyészetet (szuszpenziót) körülbelül 500 literes részletekre osztjuk, és az egyes részleteket kettős dobszárítóban szárítjuk. A dobszárító felületi hőmérsékletét olyan értékre állítjuk be, hogy a dobfelülettel érintkező vékony szuszpenzió-réteg hőmérséklete rendre 65 °C, 80 °C, 90 °C, 110 °C és 145 °C legyen. Az egyes szuszpenzió-részleteket 20%-osnál kisebb nedvességtartalom eléréséig szárítjuk. A szárított anyag nedvességtartalmát a 2. táblázatban közöljük. A kapott szárított anyagokat 250 liter forró vízzel elegyítjük, 3 órán át 95 + 1 °C-on extraháljuk, majd lehűtjük, és a micélium-maradékokat csigás dekantáló berendezés és tányéros centrifugálszeparátor felhasználásával elválasztjuk az extraktumtól. A szuszpenzió látszólagos viszkozitását és a centrifugálás időigényét a 2. táblázatban közöljük. A kapott extraktumokat HF-típusú ultraszűrő (gyártja az Amicon Co.) PM-5 típusú membránján bocsátjuk át, és így az extraktumból eltávolítjuk az 5000-nél kisebb molekulasúlyú komponenseket. Az egyes műveletekben körülbelül 100 liter finomított extraktumot kapunk, amely körülbelül 1% terméket tartalmaz. Az extraktumot a porlasztva szárítást lehetővé tevő koncentrációig betöményítjük. A betöményítés során az extraktum gélesedik. Azt a koncentrációt, ahol még a porlasztva szárítást megnehezítő gélesedés nem lép fel, kritikus koncentrációnak nevezzük, és értékét a 2. táblázatban közöljük. A porlasztva szárítás időigényét és a kapott poliszacharid mennyiségét ugyancsak a 2. táblázatban adjuk meg. összehasonlítás céljából a fenti eljárást megismételjük úgy, hogy a tenyészetet 45 5C-on, illetve 160°C-on szárítjuk, vagy egy kísérletben nem alkalmazunk szárítást. E kísérletek eredményeit „összehasonlító kíséiietek” címszó alatt ugyancsak a 2. táblázatban közöljük. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
