175883. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új szukcimid-észterek előállítására
7 175883 8 Az aszimmetrikus (heterodifunkciós) vegyieteknél lehetséges például, hogy a hidroxi-szukcinimid-csoportnak proteinnel végzett kapcsolása után az amido-acetaldehid-acetál-csoportot megsavanyítással szabad aldehiddé lehet alakítani, amit azután egy további, aminocsoport-tartalmú anyaggal reagáltatunk a fentiek szerint. Ezért összekapcsolható például két különböző enzim is, vagy egy enzim és albumin vagy egy antigén és marhaszérumalbumin, vagy egy antigén és poliaminosav, mint polilizin. Kopolimerizációra képes kettőskötéseket tartalmazó vegyületeket például a DT—AS 2 130 913 és DT-OS 2 128 743 szerint lehet protein kopolimerizációra felhasználni. Arra is lehetőség van, hogy ezeket a vegyületeket előbb kopolimerizáljuk, amikor is a választott komonomerektől függően vízben jól vagy kevésbé jól oldódó kopolimerek képződnek. Ezekre, a kívánság szerinti molekulasúllyal előállítható kopolimerekre lehet azután a hidroxi-szukcinimid-észter csoporton át proteineket kötni. Az alábbi kiviteli példák a találmány szerinti eljárást és az eljárással előállított vegyületek alkalmazását személtetik. 1. példa Etilénglikol-bisz(propionsav)-bisz(hidroxi-szukcinimid-észter) 10,3 g etilénglikol-bisz(propionsav) [előállítását lásd: R. V. Christian—R. M. Nixon, J. Am. Chem. Soc. 70, (1948), 1333, Dok.-Nr. 12916] és 12,6 g N-hidroxiszukcinimid 150ml abszolút tetrahidrofuránnal készített oldatához keverés és jéghűtés közben 1 óra alatt 22,7 g diciklohexil-karbodiimid tetrahidrofurános oldatát csepegtetjük. Az oldatot 18 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután 0,3 ml ecetsavat adunk hozzá. Egy további óra múlva 150 ml absz. etil-acetátot adunk hozzá, és a kicsapódott diciklohexil-karbamidot leszűrjük. A szűrletet harmadára pároljuk be, vízzel hidrogénkarbonát-oldattal és ismét vízzel mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. Acetonitrilben vesszük fel, 24 órán át +4 °C-on állni hagyjuk, ezután az ismét kicsapódott karbamidot leszűrjük, és a reakcióelegyet ismét bepároljuk. A visszamaradó olajból a termék többnapos, +4 °C-on való állás után kikristályosodik. Etil-acetátból átkristályosítjuk. Kitermelés: 25%. Olvadáspont: 115 °C. Elemen tár-analízis: a C16H2oN2O10 (Ms = 400,35) alapján számított: C = 47,99%, H = 5,04%, N = 6,99%, talált: C =47,95%, H = 5,04%, N = 6,87%. 2. példa Az 1. kiviteli példában leírttal analóg módon az oxi-bisz(propionsav-hidroxi-szukcinimid-észter)-t állítjuk elő. Kitermelés: 30%. Olvadáspont: 131 °C. 3. példa Oxi-szukcinimid-glutársav-amino-acetaldehid-dimetil-acetál 11,4 g glutársavanhidrid 100 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához egyidejűleg 10,1 g trietil-amint és 13,2 g amino-acetaldehid-dimetil-acetált csepegtetünk, majd a reakcióelegyet 30 percig keverjük. A kapott oldatot +5 °C-ra hűtjük, és 9,5 ml klór-hangyasav-etil-észtert adunk hozzá. Az elegyet még 30 percig -5 °C-on tartjuk. Ezután 0°C-on egyidejűleg 11,5 g hidroxi-szukcinimidet és 14,0 ml trietil-amint csepegtetünk hozzá. 5 órás, 25 °C-on végrehajtott reakció után a kicsapódott trietil-ammónium-kloridot leszűrjük, a reakcióelegyet bepároljuk, etil-acetátban újra feloldjuk, vízzel, hidrogén-karbonát-oldattal, majd ismét vízzel mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A terméket forró etil-acetátból kristályosítjuk át. Kitermelés: 45%. Olvadáspont: 70 °C. Elementár-analízis: a C] 3 H2 0N2 O7 (Ms= 316,3) képlet alapján számított: C = 49,60%, H = 6,38%, N = 8,85%, talált: C =49,34%, H =6,37%, N = 8,81%. 4. példa a) Metakrilolil-co-hidroxi-karbonsav-oxi-szukcinimid-észter (b/ eljárásváltozat) A metakrilolil-Gj-oxi-karbonsavakat a „Makromd. Chem.” 176, 3017 (1973>ban leírttal analóg módon állítjuk elő. 500 ml-es 3 nyakú lombikba a mindenkori metakrilolil-hidroxisav 0,1 mól-nyi mennyiségét és 0,11 mól N-hidroxi-szukcinimidet töltünk, abszolút metilénklorid és abszolút tetrahidrofurán elegyében készült oldatban, majd a reakcióelegyet +5 °C-ra hűtjük. Keverés közben 0,11 mól diciklohexil-karbodiimid 50 ml abszolút metilén-kloriddal készített oldatát csepegtetju hozzá. A reakcióelegyet további 12 órán át keverjük, miközben hőmérséklete +25 °C-ra emelkedi A kicsapódott diciklohexil-karbamidot ezután le szűrjük, és a szűrletet bepároljuk. A képződöt dajat acetonitrilben ddjuk fel, és több órán a hűtőszekrényben állni hagyjuk. Az ismét kicsapó karbamidot leszűrjük, és az acetonitrilt elpárologtatjuk. A terméket daj alakjában kapjuk meg-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
