175652. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L-piroglutamil -L-hisztidin -származékok előállítására
175652 4 pentaklór-fenoxi-) vagy azidocsoportot jelent és B jelentése hidrogénatom vagy védőcsoport, például benziloxikarbonilcsoport — kapcsolunk, a képződött dipeptidben azután az Y csoportot peptidkötés létesítésére reakcióképes csoporttá, például hidroxil- vagy azidocsoporttá alakítjuk és ezt követően a dipeptidet valamely IV általános képletű vegyülettel — ahol R1, R2, R3 és R4 jelentése az I általános képletnél megadott — reagál tatjuk, végül pedig az adott esetben jelenlevő védőcsoportokat lehasítjuk. Ha a kapcsolási reakcióban karboxilcsoport vesz részt, azaz például a II általános képletben X jelentése hidroxilcsoport vagy a dipeptidben Y jelentése hidroxilcsoport, akkor a kapcsolási reakciót valamilyen kondenzálószer, például N.N’-diciklohexil-karbodiimid és előnyösen valamilyen, racemizálódást inhibitáló anyag, például hidroxi-benzotriazol jelenlétében végezzük. Alternativ módon eljárhatunk úgy is, hogy a peptidkémiában a peptidkötések kialakítására ismert módszerek valamelyikével valamely II általános képletű vegyületet — ahol R jelentése az I általános képletnél megadott, A a peptidkémiában szokásosan alkalmazott N-védőcsoportot (például terc-butoxikarbonil- vagy benziloxikarbonilcsoportot) jelent és Y jelentése peptidkötés létesítésére reakcióképes csoport, például hidroxil-, helyettesített fenoxi- vagy azidocsoport — valamely IV általános képletű vegyülettel — ahol R1, R2, R3 és R4 jelentése az I általános képletnél megadott — reagáltatunk, amikor egy megfelelő dipeptidet kapunk. Ezután az N-védőcsoportot ismert módon lehasítjuk és az így kapott vegyülethez a peptidkémiában a peptidkötések kialakítására ismert módszerek valamelyikével valamely III általános képletű vegyületet — ahol X jelentése peptidkötést létesíteni reakcióképes csoport, például hidroxil-, helyettesített fenoxi- vagy azidocsoport vagy klóratom és B hidrogénatomot vagy védőcsoportot, például benziloxikarbonilcsoportot jelent — kapcsolunk. végül pedig az adott esetben jelenlevő védőcsoportokat lehasítjuk. Ha a kapcsolási reakcióban szabad karboxilcsoport vesz részt, azaz X vagy Y hidroxilcsoportot jelent, akkor a kapcsolási reakciót valamilyet* kondenzálószer, például N,N’-diciklohexil-karbodiimid és előnyösen valamilyen, racemizálódást inhibitáló anyag, például Udroxi-benztriazol jelenlétében végezzük. A kiindulási anyagként használt IV általános képletű vegyületeket úgy állíthatjuk elő, hogy először a megfelelő, alk il csoporttal helyettesített prolin-származékok iminocsoportját például terc-butoxikarbonil- vagy benziloxikarbonilcsoporttal megvédjük, ezután a karbonilcsoportot a peptidkémiában ismeretes módszerek valamelyikével (például a vegyes anhidrides vagy az aktivált észteres módszered) aktiváljuk, az aktivált vegyületet alkalmas oldószerben ammóniával vagy egy aminnal reagáltatjuk és végül a peptidkémiában ismert módszerek valamelyikével az N-védőcsoportot lehasítjuk. A találmányt közelebbről az alábbi kiviteli példákkal kívánjuk megvilágítani. 1. példa L-Piroglutamil-L-hisztKÜl-transz-ï-metil-L-prcrfinamid (olyan I általános képletű vegyidet, ahol R hid- i «Dgénaíomot, Rl transz-3-metil csoportot, R2, R3 és R4t pedig hédrogétatomot jelemmel# előállítása j A) lépés — L-N-terc-Butoxikarbonil-transz-3-metil-prolin 1,25 g L-transz-3-metil-prolin 12 ml terc-butanol és 8 ml víz elegyével készült oldatához 3,5 ml trietil-amint és 3,5 g terc-butoxi-2,4,5-triklór-fenil-karbonátot adunk, majd a reakcióelegyet 2 órán át 60 °C-on tartjuk, ezután bepároljuk, a maradékot feloldjuk 50 ml 1 n vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatban és a kapott oldatot dietiléterrel mossuk. Az oldathoz ezután fölöslegben vett szilárd citromsavat adunk, majd etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és bepároljuk, amikoris 1,6 g mennyiségben kristályos nyers terméket kapunk. Ezt azután etil-acetát és 40—60 °C forráspontú petroléter elegyéből átkristályosítjuk, amikoris 1,33 g mennyiségben a 146—150 °C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek optikai forgatóképessége [oifg= — 60,1° (c=l, kloroform). B) lépés — L-N-terc-Butoxikarbonil-transz-3-metil-prolinamid —20 °C-on 1,1 g L-N-terc-butoxikarbonil-transz-3- -metil-prolin 50 ml tetrahidrofuránnal készült oldatához 6,0 ml N-metil-morfolint, majd cseppenként 0,8 g frissen desztillált klórhangyasav-izobutilésztert adunk, a kapott oldatot pedig ugyanezen a hőmérsékleten 10 percen át keveijük. Ezután az oldathoz 5 ml tömény vizes ammónium-hidroxid-oldatot adunk, majd az oldatot 2 órán át keverjük és ezt követően bepároljuk. A kapott maradékot 100 ml etil-acetáttal felvesszük, az oldatot 10%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd nátrium-klorid-oldattal mossuk és vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk. Az oldatot ezután bepároljuk, amikoris 1,0 g nyers kristályos terméket kapunk. Ezt azután etil-acetát és 40—60 °C forráspontú petroléter elegyéből átkristályositjuk, amikoris 0,91 g mennyiségben a 100—101 °C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek optikai forgatóképessége [«]“ = — 79,7° (c=l kloroform). C) lépés — L-transz-3-Metil-prolinamin-hidroklorid 0,65 g L-N-terc-butoxikarbonil-transz-3-metil-prolinamid 10 ml dioxánnal készült oldatához 5 ml 7,5 n dioxános sósavoldatot adunk, majd 2 óra elteltével a kivált kristályos csapadékot kiszűrjük, ezután etanol és dietiléter elegyéből átkristályositjuk, amikoris 0,47 g mennyiségben a 235—237 °C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek optikai forgatóképessége [a]“=-14,8° (c= 1, víz). D) lépés — L-Piroglutamil-L-hisztidil-transz-3-metil-L-prolinamid 0,50 g L-transz-3-metil-prolinamid-bidroklorid 5 ml dimetil-formamiddal készült oldatát adjuk —20 °C-ob 0,9 g megfelelő hidrazidból készült L-piroghitamil-L-hisztidin-azid 15 ml dimetil-fonnamiddal készült oldatához, majd a kapott elegybez 0,45 ml trietil-amint adunk. A reakcióelegyet ezután szobahőmérsékleten 12 órán át állni hagyjuk, majd szűijük. 'bcpáraljuk ês-iaf maradékot fclaidfak 10 ml 1%-os vialea pnádsa-oldatban. Az ígykapott oldatot ezután felvisszük „Sulphoe-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 66 2
