175512. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hipfizis szövetekből származó protein hormonok izolására és kinyerésére
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 175512 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Bejelentés napja: 1977. VII. 28 Dániai elsőbbsége: 1976. VII. 30. (3468/76) Közzététel napja: 1980. II. 28. Megjelent: 1981. III. 31. (NO-220) Nemzetközi osztályozás: C 07 G 15/00, A 61 K 37/36, 37/32 ( \ :*i.' *» i Feltaláló: Pedersen Erik gyógyszerész, JÖlstykke, Dánia Szabadalmas: Nordisk Insulinlaboratorium, Gentofte, Dánia Eljárás hipofízis szövetekből származó protein hormonok izolálására és kinyerésére 1 A találmány tárgya új eljárás hipofízis szövetekből származó protein hormonok izolálására és kinyerésére fehérje hormonokat tartalmazó vizes extraktum kicsapószerrel történő frakcionált kicsapásával oly módon, hogy a vizes extraktumot $ 10— 17súly% koncentrációjú 3000—6000 molekulasúlyú polietilénglikollal keverjük össze, az oldat pH-ját a keverés előtt vagy után 4—6 értékre, előnyösen 4,5—5,0-re állítjuk a kicsapódott emberi növekedési hormont (HGH)-t izoláljuk és 10 kívánt esetben tovább tisztítjuk és adott esetben további 20—30 súly%-os polietilénglikolt adunk az anyalúghoz, és a kicsapódott tüszőstimuláló hormont (FSH) és a luteinizáló hormont (LH) izoláljuk. A találmány tárgya közelebbről különösen a 15 tiszta növekedési hormon izolálása hipofízis szövetekből származó extraktumokból. A találmány szerint a növekedési hormont szelektív elválaszthatjuk a többi fehérje hormontól és szennyeződésektől. Ily módon a növekedési hor- 20 mont igen tiszta állapotban és jó kitermeléssel sikerül kinyerni. A találmány szerinti egyszerűsített eljárás révén más hipofízis szövetből származó fehérje hormont is izolálunk és kinyerünk. 25 Ismeretes a növekedési hormon izolálása hipofízis szövetek extrakciójával és az extraktumból való kicsapásával kicsapószer segítségével. Az emberi növekedési hormon kinyerését a következő publikációkban írják le: 30 2 1. Biochemica et Biophysica Acta 1963, 74. 525—531 és 2. Acta Endocrinologica 1971, 66, 478 —490. A hipofízis hormon keverékek elválasztására szolgáló eljárást írnak le a 230 807 sz. svájci szabadalmi leírásban és a 3 415 804, 3 652 530, 3 763 135 és 3 808 189 sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírások szerint polietilénglikolt alkalmaznak kicsapószerként proteinek frakcionálására. Ebből azonban nem lehetett előre látni, hogy a polietilénglikol alkalmas hipofízis hormonok frakcionálására vagy a növekedési hormon szelektív kicsapására adott körülmények között. Bizonyos blokk kopolimerek alkalmazását írják le a 3 850 903 sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírásban. Litvinova, T., Tr. 1 (Pervogo) Mosk. Med. Inst. (1968) 61. 102—5 cikkben fehérjeelegyek kicsapását és pl. elektroforízissel történő frakcionálását írták le általánosságban. Az irodalom szerint az emberi növekedési hormon kinyerésére szolgáló eljárásokban a legnagyobb termelést úgy érték el, hogy kiindulási anyagként mélyhűtött agyfüggelék-mirigyet használnak és enyhe extrakciós és kicsapási körülményeket alkalmaznak. Általában a következő módszert követik: 1. a mélyhűtött hipofízis mirigyeket semleges vagy bázikus pufferrel extrahálják, 17551")
