175474. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás 12ß-hidroxil-csoportot tartalmazó kardenolid vegyületek előállítására mikrobiológiai úton
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY 175474 Bejelentés napja: 1978. V. 23. (GO-1405) Nemzetközi osztályozás: C 07 J 19f00 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1980. II. 28. Megjelent: 1981. II. 28. Feltalálók: Natonek Mária gyógyszerész 23%, Albrecht Károly gyógyszerész 23%, dr. Szeleczky Zoltán biológus 9%, dr. Szarka Ernő vegyészmérnök 5%, dr. Szentirmai Attila _ mikrobiológus 5%, dr. Udvardy-Nagy Istvánná orvos 5%, Trinn Mária vegyészmérnök 5%, Nagy Lajos mikrobiológus 4%, Budai Miklós vegyészmérnök 4%, Trompler Árpád vegyész 4%, Kiss János vegyész 3%, dr. Balogh Tibor vegyészmérnök 3%, Tölgyesi László vegyésztechnikus 4%, Ila Lajos vegyész 3%, Budapest Szabadalmas: Gyógyszerkutató Intézet, Budapest Új eljárás 12/3-hidroxil-csoportot tartalmazó kardenolid vegyületek előállítására mikrobiológiai úton 1 A találmány tárgya új eljárás 12/?-helyzetben hidroxil-csoportot tartalmazó I általános képletű kardenolid vegyületek - ahol R jelentése hidrogénatom vagy III általános képletű csoport, ahol Rí jelentése hidrogénatom vagy acetil-csoport, X pedig hidrogénatomot vagy hidroxil-csoportot jelent - előállítására mikrobiológiai úton. Ismeretes, hogy a kereskedelmi forgalomban hozzáférhető lanatozid-C, acetildigoxin és digoxin szívgyógyszereket a Digitalis lanata leveleiből állítják elő. A drog lanatozid-A, -B, -C és -D glükozidok keverékét tartalmazza. A jelenlevő hidrolizáló enzimek hatására azonban a glükóz és az acetil-csoport lehasadása is bekövetkezik, aminek az a következménye, hogy a primer glükozidokon kívül az előbbieknek megfelelő négy szekunder glükozid, a digitoxin, a gitoxin, a digoxin és a diginatin is jelen van a drogban. A primer és szekunder glükozidok aránya a termesztés körülményeitől függően változik, ami az előállítási technológia szempontjából nem előnyös. A 120-helyzetben hidroxil-csoportot tartalmazó, gyógyszerként alkalmazható glükozidok előállítása során a lanatozid-A felhasználhatatlan melléktermékként marad vissza. A 12-dezoxi-szívglükozidok aglükonjának hidroxilezésére az irodalmi adatok szerint különböző mikroorganizmusok alkalmazhatók. így például Fusarium lini [Helv. Chim. Acta 41, 297 (I960)], Gbberella fujikuroii és Helicostylum piriforme [Nature 184, 469 (1959)], Gibberella saubinetti 2 [Chem. Pharm. Bull. 8, 530 (I960)], Calonectria decora és Nigrospora sphaerica [Abstr. Symposium on the Chem, of Digitalis Cardiac Clycosides, 114 (I960)]. A gyógyászatilag alkalmazható szívglü- 5 kozid (digitoxin) hidroxilezésével azonban csak egy japán munkacsoport foglalkozott, amely sikerrel alkalmazta digoxin előállítására a Streptomyces owashiensis, a Streptomyces diastatochromogenes, a Mortierella isabellina, a Trichocladium asperum és 10 a Circinella muscae törzseket [Agr. Bioi. Chem. 29, 783 (1965)]. A találmány célja egyszerű és iparilag gazdaságosan alkalmazható új eljárás kidolgozása a 12/J-hidroxil-csoportot tartalmazó, gyógyászatilag ér- 15 tékes szívglükozidok előállítására. A találmány azon alapszik, hogy erdei talajból sikerült egy olyan sugárgomba törzset kitenyésztenünk, amely aerob fermentáció során képes a 12-dezoxi-szívglükozidok aglükon részébe bevezetni 20 a 12/3-hidroxil-csoportot. A törzset rendszertanilag az alábbiakban részletesen leírt tulajdonságai alapján Streptomyces praecox-nak tekintjük [Waksman: The Actinomycètes. Vol. 2, (1961)], és a Mikroorganizmusok Nemzeti Gyűjteményében MNG 127 25 számon letétbe helyeztük. Rendszertani leírás Morfológiai: a légmicélium hifáiről eredő spóra- 30 tartók monopodiális elágazásúak, az egyes ágak 175474
