175202. lajstromszámú szabadalom • Eljárás diszulfidkötéses gyűrűt tartalmazó peptidek előállítására
175202 képletü lazac-kale it onint állitjuk elő. . , j_ A találmány szerinti eljárás az oxitocin szintézisében is igen előnyösen alkalmazható. A 9 aminosay-egységből álló peptid-láncot a glicintől kezdve êi-itjuk fel; a S}icJ-n%k0^olicin formájában kapcsoljak a benziiidrilamin-polisztirol /^HA/ o7®ntához. Ezután az 1. táblázatban felsorolt reagensek felhasználásával kiépítjük a peptid-láncot. A gyanta savas kezelese elött kapott termék a C6Ii5 SE ÏÏ GH2-06%-/p/0GH3 a-GIfríH-GLY-LiiTJ-PEO-GYS -AS N-GLN-IL'i-TYR-CYS -II képletnek fűlel meg /ahol fi, B és \; jelentése a fenti/, azaz az'n-alkiltio-védőcsopoxtot horodzó cisatein-reazt a 5-os, a BZ-védőccoportot hordozó cisztein-részt pedig aa 1-es tielyzetben tartalmazza. A gyanta savas kezelese után kapott termek a SB IÍ-CYS-TYB-ILE-GLií-ASlí-CYS -PRO-LEÜ-GCiY-IIHg képletnek felel meg, azaz az n-alkiltio-védőczoportot változatlanul a 6-os helyzetű cisztein-rész hordozza. Ez apeotid oldószeres közegbenf célszerűen 6,0 és 8,5 közötti pH-értéken tartva intramolekularis átrendeződést szenved, és H—GYE—l'i B—XLm—GJjIT—OYb —jEBC—Jj--ű—GLlf—I1H2 képletü omitocinná alakul. A találmány szerinti eljárást az oltalmi kör korlátozása nélkül az alábbi példákban részletesen ismertetjük. A. példa Oxitocin szintézise A gyanta aktiválása: Schwartz-líann tipusu peptidszintetizáló berendezés /forgalomba hozza a Schwartz-Mann, Inc. cég. Orangeburg, ITev; York, Amerikai Egyesült Államok/ reakcióedény ebe 5 g benzhidrilami ngyantát/BHA-gyantát//amintartalom: 0,43 milliekvivalena/g/ mérünk be, és a gyantát egymás után a következő oldószerekkel kezeljük: 20 ml metilénklorid /kezelési idő: 2 perc/, 2-szer 20 ml kloroform /kezelési idő: 2-2 perc/, 2-szer 20 ml 1:9 arányú trietilamin:kloroform elegy /kezelesi idő: 5-5 perc/, 20 ml kloroform /kezelési idő; 2 perc/ és 3-szor 20 ml metilénklorid /kezelési idő: 2-2 perc/. Minden kezelési lépés után szűréssel eltávolítjuk az oldószert. 9. ciklus: s ^ Kapcsolás: A fenti módon előkezelt BHA-gyantához 20 ml metilenklorxdot es 0,75 g /0,0043 mól/ BOC-gliöint adunk, éli a szuszpenziót 10 percig keverjük. Ezután a reaktorba 4,3 ml metilénklóridős diciklohexil-karbodiimid-oldatot /diciklohexilkarhódiimid-tartalom: 1 milliekvivalens/ml/ mérünk be, és a rendszert 6 o^fn^át keverjük. Ezután a szilárd anyagot kiszűrjük, és a gyantát, amelynek amino-csoportjaihoz BOC—glicil-csoportok kapcsolódnak, egymás után 2-szer 20 ml metilénkloriddal, 20 mi met9Do1}-fl/ea 2-szer 20 ml metilénkloriddal mossuk. «A?o?SJ^fSim0SaS^ léPésl?®n 2 P?íoiS kezeljük a gyantát a mosói olyadekkal, majd a mosofolyadekot szűréssel eltávolítjuk. Acetilezes: A fenti lépésben kapott gyantához 1,6 ml ecetsavanhidridet, 2,4 ml trietilamint és 20 ml kloroformot 12
