175202. lajstromszámú szabadalom • Eljárás diszulfidkötéses gyűrűt tartalmazó peptidek előállítására

175202

fóriástól függően bizonyos mértékig ‘Jpa?»1®wfce551®T.

azete« forrásokból /például emberek, háziállatok, halak, békák

!«'’hüffimSeí&V eltólönite«, fen«

közös jellemzője azonban az, hogy mindegyikük tartalmaz ai

szulfid-kötéses gyűrűt. Néhány ismert, a*2}?jHea?7ivlentid k°" zott diszulfid-kötést tartalmazó, biológiailag aktiv peptid szerkezetét az alábbiakban mutatjuk be.

Oxitocin: H-ÔYS -TYR-ILE-GEN-AsH

yS -PRO-LZU-GRY-NEg

Vazopresszint H~QYS-0?YB-m^^H--AGlÆfS->PRO--AHG-GDY--IiH2_______t

Szómatosztatin: H—ARA—GLY—CYS—LYS —ASN—PHE—TRP—LYo —TIlR —PHE—TIÍR—-SITR-^YB-OH___________________

Lazac—kalcitonin: H-CYS-GER-ASN-LIIU-SER—THR-CYS—VAL-LEU—GLa —-LYS -LEU-G ER-GLN-GLU-LEÜ-HIS -LYS -liEU-GLN-TIíR-TYR-P3G-A EG-THR-AS H-TBR-GLY -S ER-GLY-THR-PEO-IÎH2

Emberi

kalcitonin:

II-CYS—GLY-ASIT-LEU-SEH-THR-CYS-LIET-LSU-GLY—TIíR-TYR-TKR-GüjII-ASP-HíE-ASII-LYS -PHX-HIS -THR-PHE-PRO-GLB-THR-ALA -ILE-GLY-VAL-GLY-ALA -PRG-NHp

Sértés- 1---------------------------------------\-kalcit onin : H-CYS-S ER-AS1Î-LEU-31ÎR-THR-CYS-VAL-LEU-SER-ALA -TYE-TRP-ARG-ASH-LSH-ASH-ASH-HG-HIG -ARG-PIIE-S ER-GLY-MET-GLY-PHE-GLY -PRO-GLU -THR-PR 0-HHL

Szarvasmarha- r~—----------------------------------»

-kalcitonins H-CYS-SER-ASN-LEU-GSR-THR-GYS-VAL-LEU-SER-ALA-TYR-TRP-LYS -AS P-LEU—ASN-ASN-TYR-HIS-A RG-PHE-S ER-GLY-ÍIET-GLY-PHíí-GLY-PR 0-GLU-THR-PR O-NH^

A fenti szerkezetű, diszulfid-kötéses gyűrűt tartalmazó peptideket az ismert módszerek szerint úgy állították elő, hogy első lépésben kialakították a megfelelő, nem—gyűrűs aminoaavláncot, majd ezt a peptidet oxidalósserekkel kezelték. Ez utóbbi kezelés hatására a cisztein-caoportok között diszulfid-kötés alakult ki t£atsoyannis: »The Chemistry of Polypeptides” 60- 85» oldal /Plenum Press, 1974/C7. Az ismert eljárás hátránya a— zónban az, hogv a viszonylag instabil peptid-lánc oxidálószerek hatás ara károsodhat, ami a termék inaktiválódásával, azaz a biológiailag aktiv vegyület hozamának csökkenésével jár. Igen nagy szuteég van tehát olyan módszerekre, amelyek oxidalószer használata nélkdl teszik lehetővé a cisztein-caoportok közötti raSvonatkozik^8 ^ia^a^tósat. ^ találmány e feladat megoldásá—

vni-itehát eljárás a cisztein-caoportok kö^talmazó, SY^üa peptidek előállításáig /nÍJiSííÍ“'7 ér0elmeben úgy járunk el, hogy először a megfejt !^í“2!írszekve2ciá0,u» a a z alf id-köt és b en részt vevő en^alkiltio^védôcoïnÎÎi-n?UÍfhJdíÎ1“03°?0it^ A-4 szénatomos/ nedieszabld hotáoz$* * masik cisztein-csoporton

tidif Íii??int Síhi^^“ca2poj:tot tartalmazó, aciklikua pépti et állítjuk elő, majd ezt a vegyületet oxigénmentes oldószer-2