175151. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fenilglicint tartalmazó, gasztrin hatású peptidek előállítására

13

175151

14

Elemzési eredmények a C33H42OgNéS összegképlet (molekulasúly: 682,81) alapján:

számított: C = 58,05%, H = 6,20%,

N =12,31%, S =4,68%,

talált: C =58,05%, H =6,21%,

N = 12,64%, S =4,77%.

8. lépés

L-Triptofil-L-metionil-L-aszparagil-L-fenil-glicinamid

4,4 g (6,33 mmól) BOC—Trp—Met—Asp—L—Phg-NH2 -bői (2. példa, 7. lépés) indulunk ki és az 1. példa 8. lépése szerinti módon járunk el. így 2,90 g (76,5%) H—Trp—Met—Asp—L—Phg—NH2-ot kapunk, olvadáspont 210 °C (bomlik), R/ =0,30.

9. lépés

2-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)-acetil-L-triptofil-L-metionil-L--aszparagil-L-fenil-glicin-amid

A D-diasztereomerhez hasonlóan készítjük (1. példa, 10. lépés) 1,0 g (1,71 mmól) H-Trp—Met—Asp-L-Phg-NH2-ból (2. példa, 8. lépés) kiindulva. A nyerstermék tisztítását szilikagél oszlopon a 10. futtatóeleggyel végezzük. így 0,48 g (37,2%) BOC—OGly—Trp—Met—Asp—L—Phg—NH2 - -ot kapunk, olvadáspont 169—170 °C (bomlik), R| =0,35, [a]D=+8,2° (c = l,0, dimetilformamidban).

Elemzési eredmények a C35H4SO10N7S összegképlet (molekulasúly: 755,86) alapján:

számított:

C =55,62%,

H =6,00%,

N =12,97%,

S =4,24%,

talált:

C =55,11%,

H =6,23%,

N = 13,04%,

S =4,10%.

3. példa

1. lépés

2-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)-propionsav-(pentaklór-fenil)-észter

4,10 g (20 mmól) BOC-D-OAla-OH-t és 5,32 g (20 mmól) pentaklórfenolt feloldunk: 20 ml dimetil-formamidban, az oldatot 0 °C-ra hűtjük, és 4,12 g (20 mmól) DCC-t adunk hozzá. A reakcióelegyet fél órán át 0 °C-on keverjük, majd éjszakán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A kivált diciklohexil-karbamid kiszűrése után a szűrletet vákuumban bepároljuk, és a kristályos maradékot vízmentes éterrel való eldörzsölés után szűrjük. A

6,25 g súlyú nyersterméket etanolból kristályosítjuk. így 5,80 g (64%) BOC-D-OAla-OPCP-t kapunk, olvadáspont 123—124 °C, R| =0,85, [a]D=+68,95° (c = 1,0, dioxánban).

Elemzési eredmények a C14H14O5NCI5 összegképlet (molekulasúly: 453,537) alapján:

számított: C =37,10%, H =3,10%,

Cl =39,10%,

talált: C =37,16%, H =3,29%,

Cl =39,01%.

2. lépés

D-2-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)-propionil-L-triptofil-L-metionil-L--aszparagil-D-fenil-glicin-amid

81,50 g (2,57 mmól) H-Trp-Met-Asp-D-Phg—NH2-ot (1. példa, 8. lépés) feloldunk 50 ml DMF-ban, majd az oldathoz 2,26 ml (5,14 mmól) trietilamint és 1,24 g (2,73 mmól) BOC—D—OAla—OPCP-t (3. példa, 1. lépés) adunk. A reakcióelegyet 5 óra elteltével vákuumban bepároljuk, és a maradékot éterrel eldörzsölve izoláljuk. Az 1,90 g súlyú nyersterméket 100 ml 96%-os etanolból átkristályosítjuk, így 1,06 g (53,5%) kromatográfiásan egységes BOC-D-OAla-Trp-Met-Asp-D-Phg—NH2 -ot kapunk, olvadáspont 200—204 C (bomlik), Rf =0,15,

R| = 0,30, [a]D = -24,9° (c = 1,0, dimetilformamidban).

Elemzési eredmények a C3íH470ioN7S összegképlet (molekulasúly: 769,89) alapján:

számított: C =56,16%, H =6,15%,

N= 12,74%, S =4,16%,

talált: C = 56,33%, H = 5,88%,

N =12,70%, S =4,09%.

4. példa

D-2-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)-propionil-L-triptofil-L-metionil-L--aszparagil-L-fenil-glicin-amid

1,0 g (1,71 mmól) H-Trp-Met-Asp-L-Phg-NH2-ot (2. példa, 8. lépés) feloldunk. 30 ml DMF-ban, majd az oldathoz hozzáadunk 0,24 ml (1,71 mmól) trietilamint és 0,85 g (1,88 mmól) BOC-D—OAla-OPCP-t (3. példa, 1. lépés). A reakcióelegyet másnap vákuumban bepároljuk, a maradékot vízmentes éterrel izoláljuk. Az 1,45 g súlyú nyersterméket 7 ml 10. futtatóelegyben oldva 100 g szilikagélből készült 2 cm átmérőjű oszlopra visszük, és 15 ml/óra sebességgel a 10. futtatóeleggyel eluáljuk. így a tiszta frakciókból 0,74 g (56%) BOC — D—OAla—Trp —Met—Asp—L—Phg—NH2-ot kapunk, olvadáspont 167—168 °C, Rf = 0,30, [a]D = +29,8° (c = 1,0, dimetilformamidban).

Elemzési eredmények a C3<H4 70ioN7S összegképlet (molekulasúly: 769,89) alapján:

számított: C =56,16%, H =6,15%,

N= 12,74%, S =4,16%,

talált: C =56,40%, H =6,31%,

N= 12,65%, S =4,01%.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

7