175046. lajstromszámú szabadalom • Eljárás klavulánsav-származékok előállítására
5 175046 6 hidrát vagy amoxicillin-trihidrát is alkalmazható. A készítményben jelenlevő antibiotikumok súlyát az elméletileg rendelkezésre álló antibiotikum mennyiségében kifejezve, és nem az „elővegyület” súlyára vonatkoztatva adjuk meg. 3-(2-Dibenzil-amino-etilidén)-7-oxo-l-azabiciklo[3,2,0]heptán-2-karbonsav- 5 -metilészter (e3 vegyület) 2. példa 1. példa 3-(2-Dibenzil-amino-etilidén)-7-oxo-1 - 10-azabiciklo[3,2,0]heptán-2-karbonsav-benzilészter (e2 vegyület) A reakciót az A) reakcióvázlat szemlélteti. 5 ml frissen desztillált dimetilformamidban ol- 15 dott 500 mg nyers benzil-klavulanil-szulfát-trimetil-ammóniumsóhoz (el vegyület) 15 perc alatt hozzácsepegtettünk 2 ml dimetilformamidban oldott 450 mg dibenzil-amint. A reakcióelegyet 2 órán át kevertük szobahőmérsékleten, majd 50 ml oldószer- 20 rel hígítottuk, amely etilacetát és 60—80 °C forráspontú petroléter 1 : 1 arányú elegye volt. Az oldatot szilikagélen kromatografáltuk, és az elúció során először a dibenzil-amino-dezoxi-klavulánsav-benzilészter (e2 vegyület) távozott. 84 mg világossárga 25 olajat kaptunk. Az ismételt kromatografálás 38 mg tiszta cím szerinti vegyületet szolgáltatott színtelen olaj formájában. Az el kiindulási vegyület előállítását a 30 2 616 087 számú NSzK közrebocsátási irat ismerteti. MMR spektrum: (CDC13) 3,00 (1H, dublett, J=17Hz. Ó/J-CH), 3.20 (2H. 35 dublett, J = 8 Hz, CH2N), 3,52 (1H, kettős dublett, J=17Hz, 6a-CH), 3.57 [4H. szingulett. N(CH2- Ph)2], 4,84 (1H, széles tripiett. J = 8 Hz, olefin CH), 5,13 (1H, széles szingulett, 3—CH), 5.25 (2H, szingulett, C02 CH2 Ph), 5,69 (1H. dublett. 40 J = 2,5Hz, 5—CH), 7,416 (15H, szingulett, aromás gyűrűk protonjai). Az 1. példában leírt módon előállított vegyületet megvizsgáltuk a 827 926 számú belga szabadalmi 45 leírásban ismertetett beta-laktamáz-gátló teszten néhány enzimmel szemben, és az alábbi Iso gátlási értékeket kaptuk: A reakciót a B. reakcióvázlat szemlélteti 100 mg e2 vegyületet 5 ml tetrahidrofuránban oldottunk, es az oldatot 1 órán át hidrogéneztük környezeti hőmérsékleten és atmoszférikus nyomáson 50 mg 10%-os palládium/szén katalizátor jelenlétében. Az oldatot szűrtük, az oldószert lepároltuk, a maradékot 10 ml etilacetátban oldottuk és 4x10 ml vízzel extraháltuk. A víz lepárlásával kapott gumiszerű anyagot 5 ml metanolban oldottuk és feleslegben vett diazometánnal kezeltük 0 °C hőmérsékleten. Az oldószer lepárlásával és kromatografálással a cím szerinti vegyületet kaptuk színtelen gumiszerű anyag formájában. Termelés körülbelül 50%. Infravörös spektrum: (CHC13) 1800, 1755. 1700 cm-1 MMR spektrum: (CDC13) 2,94 (1H. dublett, i = 17 Hz, 60-CH). 3,17 (2H, dublett, J = 7 Hz. =CH-CH2), 3,41 (1H, kettős dublett, J = 17 Hz, J1 = 2,5 Hz, 6a-CH), 3.53 (4H, szingulett, N(CH2CéH5)2], 3,74 (3H, szingulett, CO2CH3), 4,78 (1H, széles tripiett. J = 7 Hz. =CH-CH2). 5,01 (1H, széles szingulett. 3-CH), 5.60 (1H. "dublett. J = 2.5 Hz, 5-CH), 7,305 [ 10H. szingulett, N(CH2C6Hs)2]. [a]p5 =0,4° (c = 0,81. metanol). 3. példa 3-[ 2-N-Benzil-N-( 2-hidroxi-etil)-amino-etilidén]-7-oxo-l-azabiciklo[3.2,0]heptán-2-karbonsav-benzilészter (N-benzil-N-2-hidroxi-etil-amino-dezoxi-klavulánsav-benzilészter) (e5 vegyület) Közelítő Enz'm Iso érték. _____________ mg/ml Escherichia coli JT4 0,02 Escherichia coli JT10 0,24 Klebsiella aerogenes AE70 0,40 Staphylococcus aureus (Russell) 0,06 Pseudomonas aeruginosa 0,14 Citrobacter mantio 0,15 50 A reakciót a C) reakcióvázlat szemlélteti. 0,5g klavuladién-benzilésztert (e4 vegyület) 10 ml acetonitrilben oldottunk, és az oldatot 0°C-ra hűtöttük. 0.36 g N-benzil-2-hidroxi-etil-amint adtunk hozzá, és a reakcióelegyet 2,5 órán át ke- 55 vertük. 100 ml etilacetátot adtunk az elegyhez, és kis térfogatúra bepároltuk. A maradékot oszlopkromatográfiának vetettük alá, az eluálószer etilacetát volt. A cím szerinti vegyületet kaptuk. Termelés körülbelül 5%. 6° infravörös spektrum: (folyadékfilm) 3400 (kiszélesedés, -OH), 1800 (beta-laktám C=0), 1740 (észter C=0), 1700 (C=C), 695 cm'1 (aromás protonok). Az MMR spektrum megfelelt 65 az e5 vegyület szerkezetének. 3
