174643. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új nonapepti-származékok előállítására
7 174643 8 Ezt a vegyületet a 3. példa szerint állítjuk elő, de kiindulási anyagként a 12. példa szerint előállított tripeptidet használjuk. 14. példa Ben z ilocikarbonil -oj-nitroarginil-prolil-glutaminil-izoleucil -prolii -prolin-amid Ezt a vegyületet a 4. példa szerint állítjuk elő, de kiindulási anyagként a 13. példa szerint előállított tetrapeptidet használjuk. 15. példa Benziloxikarbonil-triptqfil-prolii-arginil-prolil-glutaminil -izoleucil -prolii -prolin-amid Ezt a vegyületet az 5. példa szerint állítjuk elő, de kiindulási anyagként a 14. példa szerint előállított hexapeptidet használjuk. 16. példa Pi rogl u t amil-triptofil-prolil-arginil-prolil-glutaminil-izoleucil -prolii -prolin-amid Ezt a vegyületet a 6. példa szerint állítjuk elő, de kiindulási anyagként a 15. példa szerint előállított oktapeptidet használjuk. 17. példa ftnziloxikarbonil-triptofil-prolil -arginil-prolil -glutaminil-izoleucil-prolii-prolin-terc-butilészter 9.42 g (10 mmól) benziloxikarbonil-nitroarginil-prolin-glutaminil-izoleucil-prolil-prolin-terc-butilésztert 135 ml vízmentes etanol és 20 ml n sósav elegyében oldunk, az oldathoz hozzáadunk 1,9 g, 10 'á palládium tartalmú szenet, és a reakciókeveréket 0.5-1 att hidrogénnyomáson 22 óra hosszat keverjük. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk, és a szüredéket vákuumban szárazra pároljuk. A nyers termékként kapott maradékot 50 ml dimetilformamid és 1,4 ml trietilamin keverékében oldjuk. Azonnal hozzáadunk 7,4 g ( 12 mmól) benziloxikarbonil-triptofil-prolil-2.4.5-triklórfenilésztert, majd 30 óra alatt további 1,5 mmól benziloxikarbonil-triptofil-prolil-2,4,5-triklórfenilésztert és 1,5 mmól trietilamint adunk hozzá. 50 óra elteltével a trietilamin-hidrokloridot szűréssel eltávolítjuk, és a szüredéket 1,2 liter, erőteljesen kevert ctilacetátba öntjük. A kivált csapadékot szűréssel elválasztva és etilacetáttal mosva, a cím szerinti vegyületet kapjuk. Kitermelés: 10,64 g. 18. példa Pirogl u tárni I-t riptofil-prolil-arginil-prolil-glutaminil-izoleucil -prolii -prolin-terc-butilészter A 17. példa szerint előállított 10 g (8,5 mmól) peptidet 150 ml vízmentes etanol és 8,5 ml n sósav elegyében oldjuk.az oldathoz katalitikus mennyiségű, 10 '/ palládium tartalmú szenet adunk, és 0,5—1 att hidrogénnyomáson 8 óra hosszat keveijük, majd a reakciókeveréket szűrjük. A szüredéket vákuumban bepárolva, maradékként 9,2 g nyers terméket kapunk. Ezt a maradékot 40 ml dímetilformamidban oldjuk, hozzáadunk 1,14 g (8,5 mmól) 1-hidroxi-benzotriazolt és 1,2 ml (8,5 mmól) trietilamint, és utána azonnal hozzáadunk 3,14 g piroglutaminsav-2,4,5-triklórfenilésztert (20% felesleg). Miután további 0,6 ml trietilamint adtunk hozzá, a reakciókeveréket éjjelen át állni hagyjuk. A csapadékként kivált trietilamin-hidrokloridot szűréssel eltávolítjuk, és a szüredéket 1,1 liter erősen kevert etilacetátba öntjük. A kivált csapadékot 42-es papíron szűréssel elválasztva és etilacetáttal mosva 9,0 g cím szerinti vegyületet kapunk. Aminosavelemzés (mólarányokban kifejezve): talált (számított): NH3 0,85(1,0); Trp 0,66 (1,0); Arg 1,0 (1,0); Gin 2,03 (2,0); Pro 4,0 (4,0); Ile 0,9 (1,0). Kovasavgél vékonyréteglemezen kromatografálva és 30 rész butilalkoholt, 20 rész piridint, 6 rész ecetsavat és 24 rész vizet tartalmazó oldószer-keverékkel kifejlesztve R -értéke 0,58. A tisztítást DEAE Sephadex A—25 gyantát tartalmazó oszlopon jrinatigrafálva végezzük, és az eluálásra 0,005 mólos ammóniumhidrogénkarbonát-oldatot használunk. 19. példa Pirogl u tamil-triptofíl-prolil-arginil-prolii-glutaminil-izoleucil-prolii-prolin-metil észter 1,6 g piroglutamil-triptofil-prolil-arginil-prolil-glutaminil -izoleucil-prolil-prolint 80 ml metanolban oldunk, a kapott oldathoz fölös mennyiségű dietiléteres diazometán oldatot adunk, és az oldatot szobahőmérsékleten 7 óra hosszat állni hagyjuk. Ezután a fölös diazometán elbontására ecetsavat adunk hozzá, és a reakciókeveréket vákuumban szárazra pároljuk. A tisztítást Sephadex G—25 oszlopon 0,01 mólos ammóniumhidrogénkarbonát-oldattal eluálva, majd utána DEAE Sephadex A—25 oszlopon, 0,005 mólos ammóniumhidrogénkarbonát-oldattal eluálva hajtjuk végre, mire 1,1 g cím szerinti vegyületet kapunk. 20. példa Piroglutamil-triptofil-prolil-arginil-prolil-glutaminil-izoleucil-prolil-prolin-amid 1 g piroglutamil-triptofil-prolil-arginil-prolil-gluta-minil-izoleucil-prolil-prolint enyhe melegítés közben 6 ml dimetilszulfoxidban feloldunk. A kapott oldatot szobahőmérsékletre hűtjük, majd hozzáadunk 0,14 ml trietilamint és 0,16 ml klórhangyasav-izobutilésztert. A reakciókeveréket 15 percig keveijük, majd hozzáadunk 1 ml tömény ammóniumhidroxid-oldatot, és 4 óra hosszat állni hagyjuk. Ezután a reakciókeveréket 200 ml, erőteljesen kevert etilacetáthoz lassan hozzáadjuk. A keletkezett csapadékot szűrőn elválasztva és etilacetáttal mosva, 1,375 g szilárd terméket kapunk. Ezt az anyagot 225 ml-es DEAE Sephadex A-25 oszlopon tisztítjuk, és az eluálásra 0,005 mólos ammóniumhidrogénkarbonát-oldatot használunk, mire 924 mg cím szerinti vegyületet kapunk. Aminosav-elemzés (mólarányokban kifejezve): talált (számított): NH3 1,71 (2,0); Arg 0,88 (1,0); Pro 4,13 (4,0); Trp 0,80 ( 1,0); Gin 2,12(2,0); He 0,93 (1,0). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
