174643. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új nonapepti-származékok előállítására
9 174643 10 Kovasavgél vékonyréteglemezen kromatografálva és kifejlesztőszerként 30 rész butilalkoholt, 20 rész piridint, 6 rész ecetsavat és 20 rész vizet tartalmazó oldószerkeveréket használva Rf-értéke 0,53. 21. példa Az I50 értékeket (ug/ml-ben kifejezett peptidkoncentráció, amely az angiotenzint átalakító enzim 10 50 %-os gátlását idézi elő) a következő módon határozzuk meg: 12 db, 100 ml térfogatú kémcsövekben lévő 100 mmólos, 7,5 pH-jú káliumfoszfát-pufferoldatot, 30 mmól angiotenzint tartalmazó 0,25 ml oldathoz 15 különböző koncentrációkban hozzáadjuk a 19. példa szerint előállított pepiidet. Az enzimes reakciót enzim hozzáadásával indítjuk meg, és a kémcsöveket 37°-on inkubáljuk. A 19. példa szerint előállított peptidnek azt a koncentrációját, amely az angio- 20 tenzin 1 átalakulását angiotenzin I(-vé 50%-ban gátolja, 7 /igjml-nek találtuk; ezzel szemben a H—Pyr-Trp-Pro-Gln-Ile-Pro-Pro-OH szabad peptid I50 értéke 0,9 pg/ml. Ez az in vitro vizsgálat világosan mutatja, hogy a 19. példa szerint előállított peptid az 25 angiotenzin l-nek angiotenzin 11-vé való átalakításának in vitro gátlásában a kontrollként használt szabad peptidnél lényegesen kevésbé hatékony. 22. példa A 19. példa szerint előállított peptidet és a kontrollként használt H-Pyr-Trp-Pro-Arg- Profin -Ile-Pro-Pro-OH peptidet atropinnal érzéstelenített két olyan hím patkányba adtuk be, amelyek pentolinium infúziót, majd 0,10 pglkg angiotenzin I injekciót kaptak. Az angiotenzin I által kiváltott vérnyomás emelkedés gátlása alapján megállapítottuk, hogy a 19. példa szerint előállított peptia in vivo hatékonysága lényegében azonos a kontrollként használt szabad peptid hatékonyságával. SZABADALMI IGÉNYPONT Eljárás az H-Pyr-Trp-Pro-Arg-Pro-Gln-Ile-Pro-Pro - Y I általános képletű peptidek előállítására - ebben a képletben Y aminocsoportot vagy -OR általános képletű csoportot jelent, ahol R 1-10 szénatomos alkilcsoport - azzal jellemezve, hogy a megfelelő aminosavakat vagy peptid-fragmenseket vagy reakcióképes származékaikat a peptidszin tézisben önmagában ismert módon összekapcsoljuk, és a peptid kialakítása során vagy után a terminális Pro-csoportot észterezzük vagy amidáljuk. A kiadásért felel: m OTH Kiadói Osztályának vezetője 80036. OTH, Budapest
