174643. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új nonapepti-származékok előállítására
5 174643 6 keverékében oldjuk, azonnal hozzáadunk 15,7 g benziloxikarbonil-nitroarginil-prolin-2,4,5-triklórfenilésztert és 3,1 g 1-hidroxibenzotriazolt, és a reakciót a ninhidrin-próba negatívvá válásáig folytatjuk. Ezután 5,4 ml dimetilaminopropilamint adunk hozzá, és 2 óra múlva az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. A száraz maradékot etilacetátban oldjuk, és az oldatot semlegesre mossuk. Az etilacetátot vákuumban 70 ml-re ledesztilláljuk, és a maradékot erős keverés közben 1 liter dietiléterbe öntjük. A kivált csapadékot szűrőn elválasztva és szárítva a cím szerinti vegyületet kapjuk. 5. példa Ben z il o xi karbonil-triptofil-prolil-arginil-prolii - glutaminil-izoleucil-prolil-prolin-metilészter A 4. példa szerint előállított 1,8 g hexapeptidet 27 ml vízmentes etanol és 4 ml n sósav elegyében feloldjuk, az oldathoz 0,38 g, 10 % palládium tartalmú szenet adunk, és a reakciókeveréket 0,5—1 att hidrogénnyomáson addig keveijük, amíg a nitroguanidin kromofor ultraibolya abszorpciója már nem mutatható ki. Ekkor a katalizátort szűréssel eltávolítjuk, a szüredéket vákuumban bepároljuk, a száraz maradékot 10 ml dimetilformamid és 0,28 ml trietilamin keverékében oldjuk, és az oldathoz azonnal hozzáadunk 1,5 g benziloxikarbonil-triptofil-prolin-2,4,5-triklórfenilésztert és 0,3 g 1-hidroxibenzotriazolt. A reakciót a ninhidrin-próba negatívvá válásáig folytatjuk. Ekkor a trietilamin-hidroklorid csapadékot szűrőn eltávolítjuk, és a szüredéket 250 ml erőteljesen kevert etüacetátba öntjük. A csapadékot szűrőn elválasztva és szárítva a cím szerinti vegyületet kapjuk. 6. példa Piroglu tamil-trip tofil-prolil-aiginil-prolil-glutaminil-izoleucil-prolil-prolin-metil észter Az 5. példa szerint előállított 10 g oktapeptidet 150 ml vízmentes etanol és 9 ml n sósav elegyében oldjuk, hozzáadunk 2 g, 10 % palládium tartalmú szenet, és a kapott szuszpenziót 0,5—1 att hidrogénnyomáson addig keveijük, amíg több széndioxid már nem fejlődik. Ekkor a katalizátort szűréssel eltávolítjuk, és a szüredéket vákuumban bepároljuk. A száraz maradékot 40 ml dimetilformamidban oldjuk, és gyorsan egymás után hozzáadunk 1,2 g trietilamint és piroglutaminsav-2,4,5-triklórfenilésztert. A reakciót a ninhidrin-reakció negatívvá válásáig folytatjuk. A trietilamin-hidroklorid csapadékot szűréssel eltávolítjuk, és a szüredéket 1,1 liter, erősen kevert etilacetátba öntjük. A kivált csapadékot szűréssel elválasztva és szárítva a cím szerinti vegyületet kapjuk. Ezt a terméket 0,01 mólos ammóniumhidrogénkarbonát-oldatban Sephadex G 25 gyantán kromatografálással tisztítjuk. Aminosavelemzés (mólarányokban kifejezve): talált (számított): NH3 0,92(1,0); Arg 0,86 (1,0); Pro 4,0 (4,0); Trp 0,78 (1,0); Gin 2,12(2,0); Ile 0,96 (1,0). Kovasavgél vékonyréteglemezen kromatografálva és kifejlesztőszerként 30 rész butilalkohol, 20 rész piridin, 6 rész ecetsav és 24 rész víz keverékét használva Rf-értéke 0,53. 7. példa B e n z i 1 o xikarbonil-izoleucil-prolil-prolin-n-butilészter 4,5 g benziloxikarbonil-izoleucil-prolil-prolin 30 ml kloroformmal készült oldatát lassan hozzáadjuk 1,9 g l-n-butil-3-p-toliltriazén 15 ml kloroformmal készült oldatához. "A szerves fázist elválasztva, vízmentes magnéziumszulfáton szárítva és vákuumban szárazra párolva a cím szerinti vegyületet kapjuk. 8. példa Be n z i 1 oxikarbonil-glutaminil-izoleucil-prolil-prolin-n-butilészter Ezt a vegyületet a 3. példa szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként a 7. példa szerint előállított tripeptidet használva. 9. példa Benziloxikarbonil-co-nitroarginil-prolil-glutaminil-izoleucil-prolii-prolin-n-butilészter Ezt a vegyületet a 4. példa szerint állítjuk elő, de kiindulási anyagként a 8. példa szerint előállított tetrapeptidet használjuk. 10. példa B u t iloxikarbonil -triptofil-prolil-arginil-prolil-glutamunil-izoleucil-prolil-prolin-n-butilészter Ezt a vegyületet az 5. példa szerint állítjuk elő, de kiindulási anyagként a 9. példa szerint előállított hexapeptidet használjuk. 11. példa Piroglutamil-triptofil-prolil-arginil-prolil-glutaminil-izoleucil-prolil-prolin-n-butilészter Ezt a vegyületet a 6. példa szerint állítjuk elő, de kiindulási anyagként a 10. példa szerint előállított oktapeptidet használjuk. 12. példa Benzoloxikarbonil-izoleucil-prolil-prolin-amid 4,5 g benziloxikarbonil-izoleucil-prolil-prolint 30 ml tetrahidrofurán és 1,4 ml trietilamin keverékében feloldunk. Az oldatot -5°-os fürdőben hűtjük, és 1,6 ml klórhangyasav-izobutilésztert adunk hozzá, majd a reakciókeveréket 10 perc alatt szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni, és 10 ml tömény vizes ammóniumhidroxid-oldatot adunk hozzá. A reakciókeveréket szobahőmérsékleten 4 óra hosszat keveijük, majd vákuumban bepároljuk, a maradékot etilacetáttal hígítjuk, és egymás után telített nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, vízzel, 0,1 n sósavval és vízzel mossuk. A szerves fázist vízmentes magnéziumszulfáton szárítva és vákuumban szárazra párolva, a cím szerinti vegyületet kapjuk. 13. példa Benziloxikarbonil-glutaminil-izoleucil-prolii i>rolin-amid 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
