174315. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nagytisztaságú,aminoglükozid-tipusú antibiotikumok elkülönítésére
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI 174315 LEÍRÁS SZOLGALATI találmány Nemzetközi osztályozás: Bejelentés napja: 1977. VI. 15. (GO-1374) C 07 H 15/22, C 12 D 9/14 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI Közzététel napja: 1979. V. 28. HIVATAL Megjelent: 1980. VI. 30. Feltalálók: Szabadalmas: Dr. Béidy János oki vegyész, 17,5%, Harsányi Ilona biológus, 8,5%, Kádár Gyógyszerkutató Intézet, Budapest Istvánné vegyészmérnök, 7,5%, Dr. Gyimesi József oki. vegyész, 6,5%, Dr. Széli Valéria vegyészmérnök 4,5%, Bittern Vilmos vegyésztechnikus, 2%, Dr. Hegyaljai Kiss Géza oki. vegyész, 2%, Nagy László okL vegyész, 1,5%, Budapest, Dunka Béláné okL vegyész, 12%, Horkay Sándor okL vegyész, 12%, Jakab Attila oki. vegyész, 7%, Dr. Kovács István gyógyszerész 6%. Dr. Bacsa György gyógyszerész, 5%, André Lajos oki. vegyész, 4%, Dr. Bálint János oki. vegyész, 4%, Debrecen Eljárás nagytisztaságú, aminoglükozid-típusú antibiotikumok elkülönítésére 1 A találmány tárgya eljárás apramicin, kanendomicin, tobramicin és sói előállítására vizes oldatokból karboxil-típusú kationcserélő gyantán történő megkötése, majd ammóniumhidroxid vizes oldatával való leoldása, majd az antibiotikum-bázisok savak- 5 kai végzett reakciója útján. « ismeretes, hogy különféle mikroorganizmus törzsek, így például a Streptomyces tenebrarius vagy a Streptomyces kanamyceticus egyszerre több, egy- 10 máshoz igen hasonló dezoxisztrepanún-típusú antibiotikumot (kanendo micin, karbamoil-tobramicin stb.) termelnek. Ezeknek a gyógyászatilag értékes antibiotikumoknak nagytisztaságú, a gyógyászati követelményeknek megfelelő minőségben történő 15 előállítása igen nagy jelentőségű. Előállításuknál bonyodalmat okoz az a tény, hogy például a Streptomyces tenebrarius törzs által termelt antibiotikumokat izolálásuk után szintetikus úton kell átalakítani a gyógyászatilag alkalmazott- végter- 20 mékké, mivel a mikroorganizmus a kívánt hatóanyagok közül a kanendomicint és a tobramicint karbamo il-származék formájában termeli [ J ■ Antibiot. 26, 745 (1973)]. A streptomyces tenebrarius törzs a következő 25 főbb anyagokat termeli: apramicin (nebramicin-2-, nebramicin faktor II), karbamo il-kanendomi cin (nebra mi cin-4, nebranadn faktor IV), 30 2 karbamoil-tobramicin (nebramicin-5’, nebramicin faktor V*). A nebramicin-5 (kanendomicin) és a nebramicin-6 (tobramicin), melyek egyes izolálási módszereknél kis mennyiségben kinyerhetők, az erjesztéses oldat feldolgozása során keletkező műtermékek. A továbbiakban a fenti öt antibiotikumot összefoglaló néven nebramicin antibiotikumoknak nevezzük. A nebramicin antibiotikumok előállítására eddig ismert eljárások bonyolult és nehézkes módon szolgáltatják a kívánt anyagokat. így az 1 178 489sz. Nagy-Britannia-i szabadalmi leírás szerint a megfelelő mikroorganizmus tenyésztése után először nyers nebramicin (tenebrimicin) komplexet állítanak elő a következő úton: a kénsavval megsavanyított erjesztéses oldatot leszűrik, majd 5,5-ös pH-n a hatóanyagokat ammónium-formájú Amberlite IRC-50 gyantán kötik meg, és ezután az antibiotikumokat 0,1 n kénsavval oldják le. Az eluátumot vákuumban huszadnyi térfogatra párolják be, majd pH-ját 11-re állítva hatszoros térfogatnyi acetonnal kicsapják a szennyezéseket, ezeket kiszűrik, és a szűrlethez kénsavat adva csapják ki a nyers nebramicin-szulfát-sót. A terméket vízben oldják, szűrik, majd Dowex-lXl (OH) gyantán átfolyatva tisztítják meg. Az effluenst vákuumban ismét szárazra párolják. A kapott nebramicin-bázist ezután vízben oldva kén savval szulfáttá alakítják, majd aktívszénnel derítik, és Amberlite IRC-50 gyantán való megkötés után 174315
