174114. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új aminosav-származékok előállítására
15 174114 16 8 órán át extraháljuk. A vizes fázist vákuumban bepároljuk. A termék 1,68 karbobenziloxi-7-(a-benzil)-L-glutamil-honiotaurin. 16. példa Az előző példa során nyert anyag teljes mennyiségét (1,68 g) feloldjuk 10 ml 50%-os vizes etanolban, hozzáadunk 0,3 g 10%-os palládium-csontszén katalizátort, majd a szuszpenzión 4 órán át hidrogén-gázt buborékoltatunk át. Ezután az oldatot szűrjük és vákuumban bepároljuk. A maradékot 1-2 ml vízben oldjuk és a trietilamin eltávolítása céljából egy H+-ciklusban levő, 1 x 35 cm-es Dowex 50 x 2 oszlopra visszük fel, majd vízzel eluáljuk. 50 ml eluátumot gyűjtünk, melyet vákuumban bepárolunk. A maradék 440 mg 7-L-glutamil-homotaurin (82%). A nyers termékben pH = 6,5-nél végzett papírelektroforézissel kevés neutrális és savas karakterű szennyező anyag (homotaurin, illetve glutaminsav) mutatható ki. Tisztítása többek között préparai ív eíektroforézissel történhet. Az anyag pH = 6,5-ös és 1,8-as papírelektroforéziskor egyaránt a katód felé vándorol. Ciszteinsavra vonatkoztatott relatív mozgékonysága pH = 6,5-nél 0,68, pH = 1,8-nál 0,50. Rf-érték (n-butanol-piridin-jégecet-víz 15 :10 : 3 : 12) = 0,19. 17. példa 1,083 g (2,2 mM) karbobenziloxi-L-glutaminsav-(a-benzil)-7-(p-nitrofenilésztert) reagáltatunk 278 mg (2 mM) n-metil-taurinnal a 15. példával megegyező módon. A termék 1,59 g karbobenziloxi-7-(a-benzil)-L-glutamil-N-inetil-taurin. 18. példa Az előző példa során nyert anyag teljes mennyiségét (1,59 g) katalitikus hidrogénezésnek vetjük alá a 16. példa szerint. A termék 423 mg 7-L-glutamil-N-metil-taurin (79%). Az anyag pH = 6,5-ös és 1,8-as papírelektroforéziskor egyaránt a katód felé vándorol. Ciszteinsavra vonatkoztatott relatív mozgékonysága pH = 6,5-nél 0,68, pH = 1,8-nál 0,49. Rf-érték (n-butanol-piridin-jégecet-víz 15:10:10:3:12) =0,16. 19. példa 2,87 g (6,6 mM) karbobenziloxi-L-glutaminsav-(a-benzil)-7-(p-nitrofenilésztert) feloldunk 20 ml piridinben. Hozzáadunk 1,25 g (6 mM) L-ciszteinsav-monohidrátot, melyet előzetesen 17 ml víz és 17 ml piridin elegyében oldunk fel. Az elegyhez hozzáadunk 2,6 ml (18,6 mM) trietilamint és 72 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Az oldatot ezután 30 °C-on vákuumban bepároljuk. A maradékot feloldjuk 20 ml vízben, tömény sósavval megsavanyítjuk, majd 15 x 10 ml éterrel kirázzuk. A vizes fázist vákuumban 35 °C-on bepároljuk. A termék karbobenziloxi-7-(a-benzil)-L-glutamil-L-ciszteinsav. 20. példa A 19. példa során nyert terméket feloldjuk 20 ml vízben, hozzáadunk 0,3 g 10%-os palládium-csontszén katalizátort és a szuszpenzión 3 órán keresztül hidrogén-gázt buborékoltatunk át. A reakdóelegyet a 16. példa szerint dolgozzuk fel. A termék 7-L-glutamil-L-ciszteinsav. Op.: 187 °C, pH = 6,5-ös papírelektroforéziskor ciszteinsavra vonatkoztatott relatív mozgékonysága 1,21, pH = 1,8-nál 0,54. 21. példa 526 mg (1,1 mM) karbobenziloxi-L-aszparaginsav-(a benzil)-$-(p-nitrofenilésztert) [Chem. Bér. 97: 1789, (1964)] feloldunk 5 ml piridinben, az elegyet 0 °C-ra hűtjük és kis részletekben 125 mg (1 mM) taurin 2 ml vízzel készített oldatát, majd 0,28 ml (2 mM) trietilamint adunk hozzá. Ezután az elegyet szobahőmérsékleten 48 órán át állni hagyjuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot 5 ml vízben feloldjuk és a kezdetben sárga oldat elszíntelenedéséig 1 n sósav-oldatot csepegtetünk hozzá. Az oldatot 10 x 5 ml éterrel rázzuk ki a p-nitrofenil eltávolítása céljából. A vizes fázist vákuumban bepároljuk. A termék 478 mg karbobenzilo;d-0-{a-benzil)-L-aszpartil-taurin. 22. példa Az előző példában nyert anyag teljes mennyiségét feloldjuk 6 ml 50%-os vizes etanolban, 100 mg 10%-os palládium-csontszén katalizátort adunk hozzá, majd a szuszpenzión 4 órán át hidrogéngázt buborékoltatunk át. Szűrés és vákuum-bepárlás után a visszamaradó anyagból a trietilamint eltávolítjuk a 7-L-glutamil-homotaurin (16. példa) előállításakor már ismertetett ioncserés eljárás segítségével. A termék 172 mg 0-L-aszpartil-taurin (71%). Az anyagot kevés taurin szennyezi, amelytől többek között elektroforézis segítségével tisztítható meg. Az anyag pH = 6,5-ös és 1,8-as papírelektroforéziskor egyaránt a katód felé vándorol. Ciszteinsavra vonatkoztatott relatív mozgékonysága pH = 6,5-nél 0,77, pH = 1,8-nál 0,58. Rf-érték (n-butanol-piridin-jégecet-víz 15:10:3:12) =0,16. 23. példa 526 mg (1,1 mM) karbobenziloxi-L-aszparaginsav-(a-benzil)-0-(p-nitrofenilésztert) és 139 mg 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
