173914. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ismert és új rifamicin-tipusú antibiotikumok előállítására
5 173914 6 Táptalaj Növekedés A micélium színe Oldható pigment Bennett-agar + kálcium-karbonát jó növekedés, sík felszín, némi érdességgel Világos narancsszínű (közel a 4 pa-hoz) Világos sárga Emerson-agar + kálcium-karbonát jó növekedés, domborzatos, érdes, redőzött Világos narancsszínű (5 pa-tól 5 pc-ig) Barna Paradicsompép-zabliszt agar + kálcium-karbonát jótól-kitűnőig értékelhető növekedés, sík, sima felszín Narancsszínű (4 pa-tól 5 pa-ig) Enyhén barna Glükóz-élesztőkivonatos agar + kálcium-karbonát Mérsékelttől—jóig értékelhető növekedés, sík vagy domborzatos és érdes felszín Narancsszínű (4 pa-tól 5 pa-ig) Barna Szacharózos Czapek agar Lényegében nincs növekedés Tirozinos agar Lényegében nincs növekedés Burgonya szelet jó növekedés, érdes vagy vékony, sík felszín Vöröses narancsszínű (5 pc-től 6 pa-ig) Nincs Zselatinos agar Mérsékelttől-jóig értékelhető növekedés, sík, vékony felszín Halványsárgás narancsszínű (közel a 3 pe-hez) Nincs Sárgarépa darabok Nincs növekedés Halványsárgás narancsszínű (közel a 3 pe-hez) Nincs Keményítő agar A 6a és 6b táptalajokon lényegében nincs növekedés, viszont jó növekedés a 6c és 6d táptalajokon ammónium-szulfátot, kálium-foszfátot és az ásványi nyomelemeket, így a vasat, magnéziumot, cinket, kobaltot és a mangánt is. Amennyiben a fermentáció során túlzott habzás lépne fel, a fermentációs táptalajhoz habzásgátlószereket, így növényi olajokat vagy szilikonokat is adhatunk. A fermentáció során a pH általában meglehetősen állandó marad, ha mégis változások lépnének fel, úgy a táptalajhoz puffereket, így például kalcium-karbonátot is keverhetünk. A táptalajt a süllyesztett fermentáció megvalósítására alkalmazott fermentorokban levegőztetjük. A táptalajon áthajtott levegő mennyiségét előnyösen a kb. 0,5—2 térfogat levegő per térfogat táptalaj per perc értéken tartjuk. A keverést a fermentációs iparban általában használatos keverőberendezések segítségével végezzük. A mikroorganizmus bevitele és növekedése idején természetesen fertőző anyagoktól mentes feltételeket kell biztosítanunk. Az antibiotikum-keverék előállításához szükséges inokulumot az M. lacustris törzsek ferde tenyészeteiről kaphatjuk. A ferde tenyészetekhez például a már említett 172-es jelzésű ATCC táptalajt használhatjuk. E tenyészetet felhasználhatjuk rázott tenyészetek vagy inokulum fermentorok beoltására, de eljárhatunk úgy is, hogy az inokulum fermentorokat a rázott tenyészettel oltjuk be. A míkro- 45 organizmus növekedése maximuma elérésének sebességét azonban természetesen befolyásolják az alkalmazott berendezésben, a levegőztetésben, a keverés sebességében stb. végrehajtott változások. A fermentációt általában addig folytatjuk, amíg a 50 táptalaj jelentős antibiotikus aktivitást nem mutat. A legtöbb gyakorlati cél szempontjából ehhez a kb. 4 napig terjedő idő elegendő. Az antibiotikum termelésének folyamatát a fermentáció során biológiai értékméréssel követhetjük 55 célszerűen nyomon, oly módon, hogy a fermentációs lé antibiotikus aktivitását az antibiotikumra érzékeny mikroorganizmussal, egy Staphylococcus aureus törzzsel szemben vizsgáljuk. E tesztben a biológiai értékmérést a papírkorong módszerrel 60 végezzük, amelynél a fermentációs lével átitatott szűrőpapír korongot körülvevő gátlási zónát alkalmazzuk az antibiotikus aktivitás mértékeként. Miután a fermentációs lé megfelelő antibiotikus aktivitást ért el, a pH rendszerint kb. 7,5-8,5 65 értékű. Ekkor szűréssel vagy centrifugálással eltávo-3
