173782. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-hodroxi-szteroidok és/vagy 3-oxo-szteroidok elkülönítésére
3 173782 4 ?77al az oldószerrel készített szteroid-oldathoz adjuk (ddószerelegyeknek az alkalmazása visszanyerés tekintetében technikailag mindig költségesebb, mint csak egyetlen oldószer használata), nem kapunk mennyiségi vagy közel mennyiségi kicsapódást. Más vizsgált ketonokban (például acetonban, metiletilketonban, dietilketonban, diizobutilketonban vagy metilizopropilketonban) a kalciumbromid olyan nehezen oldódik, hogy ezek a ketonok nem alkalmasak arra, hogy az említett szteroidokat egy primer homogén fázisból kicsapják. Nem-poláros oldószerek, így például benzol, szintén alkalmasak, mivel a kalciumbromid oldhatósága ezekben az oldószerekben ugyancsak nagyon csekély. Más adduktképzésre képes fémsók alkalmazása a kísérletek tanúsága szerint szintén nem vezet olyan jó eredményekhez, mint a találmány szerinti eljárás során használt kalciumbromid, amelynek vagy az az oka, hogy ezek a fémsók metilizobutilketonban, illetve metil-n-amilketonban nagyon kevéssé oldódnak (így például a kalciumklorid) vagy az az oka, hogy a képződött adduktok ezekben a ketonokban túlságosan jól oldódnak. A találmány szerinti eljárást például úgy valósítjuk meg, hogy az elegyet metilizobutilketonban, illetve metil-n-amilketonban oldjuk, az oldat szteroidtartalmát körülbelül 0,5% és 50%, vagy előnyösen 5% és 50% közé állítjuk be és ehhez 0°C és 50 C közötti hőmérsékleten, előnyösen szobahőmérsékleten, kalciumbromidot (előnyösen hidrát alakjában) adunk vagy az oldatot körülbelül 5%-tól, előnyösen 10%-tól körülbelül 35%-ig terjedő töménységű metilizobutilketonos, illetve metil-n-amilketonos kalciumbromid-oldattal (ahol a kalciumbromidot előnyösen hidrát alakjában alkalmazzuk) kezeljük. A képződött adduktot a kicsapás megtörténte után szokásos módon elkülönítjük (például szűréssel) és hasítjuk (például vízbe vagy adott esetben alkoholokba, így metanolba vagy etanolba, való bevitel útján. A reakcióban előnyösen 2—10 mólegyenértéknyi kalciumbromidot alkalmazunk 1 mól kicsapandó szteroidra. A szteroidmentes metilizobutil-, illetve metil-n-amilketon-oldatból a felesleges kalciumbromidot vízzel való extrahálással egyszerű módon eltávolíthatjuk. A vizes kalciumbromid-oldatokat ezután betöményítés és a maradék extrahálása után metilizobutilketonos, illetve metil-n-amilketonos kalciumbromid-oldatokká alakítjuk. A találmány szerinti eljárás segítségével egyszerű módon fitoszterinek (így például kampeszterin, sztigmaszterin, szitoszterin, dioszgenin, brassicaszterin, ergoszterin vagy hekogenin) kinyerhetők ezeket a vegyületeket tartalmazó növénykivonatokból, ezek maradékaiból és hidrolizátumaiból. A találmány szerinti. eljárás segítségével ugyancsak elkülöníthetünk szteroidalkaloidokat (így például szolaszodint) vagy zooszterineket (így koleszterint) ezeket a vegyületeket tartalmazó lipidfrakciókból, illetve ezek állati eredetű hidrolizátumaiból. A találmány szerinti eljárás nagy jelentőségű továbbá azért is, mert felhasználható 3-oxo-szteroidok (így például 4-androsztén-3,17-dion, 1,4-androsztadién-3,17-dion, tesztoszteron, hidrokortizon, kortizon, progeszteron, 17a-hidroxi-progeszteron, prednizolon, 17a-acetoxi-progeszteron és hasonlók) mikrobiológiai átalakulások során keletkező szteroid-kivonatokból vagy ilyen kivonatok koncentrátumaiból való elkülönítésére. A következő példák a találmány szerinti eljárás bemutatására szolgálnak. A példákban szereplő, tisztasági fokra vonatkozó adatok az eljárás során kapott termékek gázkromatográfiás vagy vékonyrétegkromatográfiás elemzésén alapszanak. 1. példa a) 53,5 g zsírsavdesztillációs maradékot, amelyeknek a szteroidtartalma 26,4% (és kampeszterin, sztigmaszterin, valamint szitoszterin alkotja) 140 ml metilizobutilketonban oldunk és az oldathoz keverés közben 60 ml 30%-os metilizobutilketonos kalciumbromid-dihidrát-oldatot adunk. Az elegyet 16 óra hosszat szobahőmérsékleten állni hagyjuk, a csapadékot szűréssel elkülönítjük, diizopropiléterrel mossuk és vákuumban szárítjuk, ily módon 20,0 g szterin-adduktot kapunk. b) 20,0 így előállított adduktot 200 ml vízbe viszünk, az elegyet 1 óra hosszat keverjük, a kivált szterin-elegyet szűréssel elkülönítjük, vízzel mossuk és 60 °C-on vákuumban szárítjuk. Dy módon 14,6 g elegyet kapunk, amely kampeszterinból, sztigmaszterinből és szitoszterinből áll, tisztasági aránya pedig 87,5% (kitermelés az elméleti hozam 90,3%-a). 2. példa a) 60 ml metilizobutilketonban oldott 75,0 g szójaolajfrakcióhoz, amelynek a szterintartalma 6,8% (kampeszterin, sztigmaszterin, szitoszterin) hozzáadunk 25 ml 30%-os metilizobutilketonos kalciumbromid-dihidrát-oldatot. Az elegyet éjszakán át állni hagyjuk, a kivált adduktot szűréssel elkülönítjük, diizopropiléterrel mossuk és vákuumban szárítjuk, ily módon 7,70 g szterin-adduktot kapunk. b) 7,70 g ily módon előállított adduktot az 1. példában leírt körülmények között hasítunk és feldolgozunk, így 4,67 g kampeszterinból, sztigmaszterinből és szitoszterinből álló elegyet kapunk, amelynek a tisztasága 95,0% (kitermelés az elméleti hozam 86,4%-a). 3. példa a) 89,5 g szójaolajfrakció oldatához, amelynek a szterintartalma 6,8% (kampeszterin, sztigmaszterin és szitoszterin) hozzáadunk 32 g kalciumbromid-dihrdrátot és az elegyet 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a kivált szterin-adduktot szűréssel elkülönítjük, diizopropiléterrel mossuk, vákuumban szárítjuk és így 8,95 g szterin-adduktot kapunk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
