173662. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ovulációt serkentő új nonapeptidamid-származékok előállítására
7 173662 8 redukció vitán palládiumkatalizátor jelenlétében vagy pedig hidrogén-fluoriddal, amikor is egy I általános képletű nonapeptidamid-származékot kapunk. A fentiekben említett kondenzációt foganato- 3 síthatjuk valamilyen oldószer jelenlétében. Oldószerként olyan oldószereket használhatunk, amelyek ismert módon alkalmasak peptidkondenzációnál. Így például használhatunk vízmentes vagy vizes dimetil-formamidot, dimetil-szulfoxidot, piri- 10 dint, kloroformot, dioxánt, diklór-metánt, tetrahidrofuránt vagy ezek elegyeit. A kondenzációs reakciót a peptidkötések kialakítására ismert reakciókhoz alkalmazható hő- 15 mérséklettartományba eső valamelyik alkalmas hőmérsékletértéken végezhetjük, így rendszerint mintegy —20 °C és +30 °C közötti hőmérsékleten dolgozunk. Az I általános képletű vegyületek előállításához használható kiindulási anyagok (vé- 20 dett peptidek) szintén ismert módon, rendszerint szilárdfázisú szintézisek útján állíthatók elő. így például a B reagens előállítására Fujino és munkatársai ismertetnek módszereket a Journal of Medicinal Chemistry, 16, 1144—1147 (1973) 25 szakirodalmi helyen, de az A reagens is hasonló módon állítható elő. A kondenzáció reakció foganatosítása után — amennyiben a kapót termék védőcsoportot hordoz — a védőcsoportot vagy -csoportokat 30 önmagában ismert módon lehasítjuk. E célra alkalmazhatjuk például a palládiumkorom, szénhordozóra felvitt palládium vagy platina jelenlétében végzett katalitikus redukálást, hidrogén-fluoriddal vagy trifluor-ecetsawal végzett hidrolizálást vagy 33 cseppfolyós ammóniában fémnátriummal végzett redukálást. Az így előállított I általános képletű peptidek a reakcióelegyből ismert módon, például extrahálás, megosztás vagy oszlopkromatografálás útján külö- 40 níthetők el. Az I általános képletű peptidek elkülöníthetők savaddíciós sóik formájában is. Egy I általános képletű pepiiddel sót képző savak közül megemlíthetünk szervetlen savakat, így 43 például a sósavat, hidrogén-bromidot, perklórsavat, salétromsavat, tiociánsavat, kénsavat, vagy a foszforsavat, valamint szerves savakat, így például a hangyasavat, ecetsavat, propionsavat, glikolsavat, tejsavat, piroszőlősavat, oxálsavat, malonsavat, 30 borostyánkősavat, malein savat, fumár savat, antranilsavat, fahéjsavat, naftalin-szulfonsavat vagy a szulfanilsávat. A találmány szerinti eljárással előállítható I általános képletű peptidek, valamint savaddíciós 33 sóik LH—RH (luteinizáló hormont kiválasztó hormon) hatásúak, és így képesek serkenteni az LH (luteinizáló hormon) és az FSH (follikulust stimuláló hormon, vagy más néven a tüszőérést serkentő hormon) kiválasztását. így az 1 általános képletű vegyületek felhasználhatók gyógyszerek hatóanyagaként nőknél, valamint állatoknál (például patkányoknál, juhoknál, sertéseknél, szarvasmarháknál, kancáknál, fürjeknél vagy tyúkoknál) az ovuláció serkentésére. A peptidek természetesen felhasználhatók más gyógyászati célokra is, éspedig olyan célokra, amelyekre hagyományos LH—RH, LH és FSH-készítményeket alkalmaznak. Tekintettel arra, hogy az I általános képletű peptidek LH-RH aktivitása közel húszszorosa és természetben előforduló LH—RH aktivitásának, adagolási dózisok minden egyes esetben a fenti összefüggés figyelembevételével állapítandó meg, bár más tényezőket (így a kezelés célját vagy a betegség jellegét) is figyelembe szükséges venni. így célszerű dózis választható meg naponta testsúlykilolgrammra számítva mintegy 2 ng és 2 pg között. Az I általános képletű peptideket elsősorban nem-orális úton, így injektálás vagy rektális vagy vaginális úton adjuk be, bár bizonyos esetekben beadhatók orálisan is. Az I általános képletű peptidek szokásos gyógyászati készítményekké, így például injekciókká, kúpokká, pesszáriumokká és porokká készíthetők ki gyógyszergyártásban szokásosan használt hordozó és/vagy segédanyagokkal. Injekciós készítmények például úgy készíthetők, hogy valamely I általános képletű pepiidből mintegy 10 y és 100 y közötti mennyiséget feloldunk 1 ml fiziológiás konyhasóoldatban. Valamely I általános képletű peptid mannittal liofilizált anyagot tartalmazó ampullák formájában is gyógyszerkészítményként forgalomba hozható. A találmány szerinti eljárásban alkalmazott kiindulási peptidek — mint említettük - ismert módon állíthatók elő. Az I általános képletű peptidek ovulációt serkentő hatását az alábbi kísérletben vizsgáljuk: A vizsgálatot Sprague-Dawley fajtájú, a ciklus negyedik napjában levő nőstény patkányokon végezzük. A kísérleti vegyületeket szubkután a diösztrusz napján 14 óra 30 perckor adjuk be, és a következő nap reggelén megvizsgáljuk, hogy a petevezeték ampullájába lökődött-e le petesejt vagy sem (a vizsgálatot részletesen lásd Fujino korábban említett cikkében). A kapott eredményeket (EDS0) az LH-RH hatásával (ED50) hasonlítjuk össze. Az alábbi eredményeket kapjuk. Kontroll (Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 (természetes LH-RH) 100% I általános képletű peptid Rí r2 Rs Ra His Tyr Leu etilcsoport 6100% His Tyr Leu n-propilcsoport 4800% 4
