173603. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-28086 jelű antibiotikumok előállítására
47 173603 48 11-15. példa A 10. példában megadott eljárást 500 mg A 28 086 A antibiotikummal és telített báriumhidroxiddal megismételjük, amikor 369 mg, 188—190°C olvadáspontú A 28 086 A-báriumsót kapunk. A 10. példában megadott eljárást 500 mg A 28 086 A antibiotikummal és 5 n káliumhidroxiddal megismételjük, amikor 363 mg, 165-167 C olvadáspontú A 28 086 A-kálium-sót kapunk. A 10. példában megadott eljárást 500 mg A 28 086 A antibiotikummal és 1 n céziumhidroxid oldattal megismételjük, amikor 540 mg, 190°C és 210°C közötti hőmérsékleten olvadó A 28 086 A-céziumsót kapunk. A 10. példában megadott eljárást A 28 086 B antibiotikummal és 5 n nátriumhidroxid oldattal megismételjük, amikor A 28 086 B-nátriumsót kapunk. 16. példa Az A 28 086 antibiotikum-komplex előállítása Streptomyces aureofaciens NRRL 8092 törzzsel rázott tenyészetben Streptomyces aureofaciens NRRL 8092 törzs tenyészetét készítjük el, a törzset az alábbiakban megadott összetételű ferdeagaron tartjuk fent. dikálium-hidrogén-foszfát 2 g magnézium-szulfát-heptahidrát 0,25 g ammónium-nitrát 2 g kálcium-karbonát 2,5 g vas(II)-szulfát-heptahidrát 0,001 g mangán(II)-klorid-heptahidrát 0,001 g cink-szulfát-heptahidrát 0,001 g Glükóz 10 g Agar 20 g Desztillált víz 1 literre A táptalaj pH-ja beállítás nélkül: 7,7. A ferdeagart a Streptomyces aureofaciens NRRL 8092 törzzsel oltjuk, majd 7 napon át 30°C hőmérsékleten inkubáljuk a tenyészeteket. Steril marhaszérumot adunk az érett ferdeagar tenyészethez, majd spóra- és nücéliumszuszpenzió készítésére steril kacs segítségével kapargatjuk a felszínét. A szuszpenzióból legfeljebb hat liofilezett készítményt állítunk elő. Egy fagyasztva szárított készítménnyel 50 ml, a következőkben megadott összetételű vegetatív táptalajt oltunk. Glükóz Szójaliszt 2,0% 1,5% Kukoricalekvár 1,0% Kálcium-karbonát 0,2% Csapvíz 1 literre A táptalaj pH-ját híg nátriumhidroxid oldattal 6,5-re állítjuk be. A beoltott vegetatív tenyészetet 250 ml-es Erlenmeyer-lombikban, percenként 5,1 cm kitéréssel 250-et forduló körkörös rázóasztalon 48 órán át, 30°C hőmérsékleten inkubáljuk. A kinőtt, a fentiekben megadott módon előállított vegetatív tenyészet 0,5 ml-ével (1%) 50 ml, az alábbiakban megadott összetételű fermentációs táptalajt oltunk: Tápióka dextrin+ 6,00% Enzimesen hidrolizált kazein** 0,60 g Enzimesen hidrolizált kazein*** 0,20% Kálcium-karbonát 0,20% Magnézium-szulfát-heptahidrát 0,05% Melasz 1,50% Finomított szójaolaj 0,50% Csapvíz 1 literre A táptalaj pH-ja (beállítás nélkül) 6,6. *Staley Dextrin 11, A.E. Staley Co., Decatur, ++IU-** Amber EHC, Amber Laboratories, Juneau, Wise. WNZ Amine A, Sheffield Chemical Co., Norwich, N.Y. 17. példa Az A 28 086 antibiotikumok előállítása Streptomyces aureofaciens NRRL 8092 törzzsel tankfermentorban A 16. példában megadott rázott tenyésztést ismételjük meg az A 28 086 fermeníorban való előállítására. Nagyobb mennyiségű inokul um előállítására 10 ml inkubált vegetatív tenyészettel 400 ml, az előzővel azonos összetételű második vegetatív táptalajt oltunk. A második vegetatív tenyészetet 2 literes Erlenmeyer-lombikokban, 5,1 cm körkörös kitéréssel percenkénti 250-et forduló rázóasztalon 24 órán át 30°C hőmérsékleten tenyésztjük. 800 ml kinőtt második vegetatív tenyészettel 100 liter steril, az alábbiakban megadott összetételű fermentációs táptalajt oltunk: 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 24
