173603. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-28086 jelű antibiotikumok előállítására
43 173603 44 A 28 086 jelű vegyületeket ezért előnyösen használhatjuk a csirkék, sertések, szarvasmarhák és juhok enteritiszes megbetegedésének kezelésére vagy gátlására. Az A 28 086 jelű vegyületek ezenfelül használhatók a kérődzők enterotoxémiá- 5 jának kezelésére is. A találmány szerinti eljárást a továbbiakban példákkal szemléltetjük. 1. példa tenyészetet oltunk. Ezt a második vegetatív tenyészetet 2 literes lombikban, percenként 250-et forduló, 5,1 cm kitérésű rázóasztalon, 24 órán át, 30°C hőmérsékleten tenyésztjük. 1 liter második vegetatív tenyészettel 100 liter, a következő összetételű steril termelő-táptalajt oltunk. Tápióka dextrin 6,00% 10 Enzimesen hidrolizált kazein 0,80% A) Az A 28 086 antibiotikum-komplex előállítására Streptomyces aureofaciens NRRL 5758 törzzsel rázott tenyészetben kivitelezett fermentációval 15 A Streptomyces aureofaciens NRRL 5758 tenyészetét készítjük el, a törzset összetételű ferdeagaron tartjuk fent: a következő Agár 20 g Dextrin 10 g Enzimesen hidrolizált kazein 2 g Húskivonat 2 g Éleszt őkivonat 2g Desztillált víz 1 literre. Streptomyces aureofi ciens NRRL 5758 törzzsel oltjuk a ferdeagart, a tenyészeteket 30 °C hőmérsékleten inkubáljuk, 6-10 napon át. Az érett 35 tenyészethez hússzérumot adunk, majd steril kacs -'eeítségével lekaparjuk a spórákat. A húskivonatos apóra- és micéliumdarab-szuszpenziót hat részletben fagyasztva szárítjuk. Egy fagyasztva szárított készítménnyel 50 ml, a 40 következőkben megadott összetételű vegetatív táptalajt oltunk. Melasz 1,50% Magnezium-szulfát-heptahidrát 0,05% Kálcium-karbonát 0,20% Finomított szójaolaj 0,50% Desztillált víz 100 ml-re A táptalajt 30 percen át, 120°C hőmérsékleten 6,8—9,1 atmoszféra nyomáson autoklávban sterilezzük, pH-ja a sterilezés után 6,7. A beoltott termelő-táptalajt 165 liter térfogatú fermentorban 10 napon át, 29°C hőmérsékleten fermentáljuk. A táptalajon percenként a táptalaj térfogatára számítva 0,4 térfogat steril levegőt buborékoltatunk át. A táptalajt hagyományos keverővei keverjük, amely percenként 250-et fordul. 2. példa Az A 28 086 antibiotikum előállítására megismételjük az 1. példában megadott eljárást, a77a! a különbséggel, hogy az alábbi összetételű táptalajt használjuk a rázott tenyészetek termelő táptalajaként: Glükóz 20 g Szójadara 15 g Kukoricalekvár 10 g Kálcium-karbonát 2 g PVÍZ 1 literre Glükóz 1,0% Ehető melasz 2,0% Pepton 0,5% Kálcium-karbonát 02% Csapvíz 100 ml-re A beoltott vegetatív táptalajt 250 ml térfogatú Erlenmeyer-lombikban 72 órán át, 30°C hőmérsék- 55 létén inkubáljuk, olyan rázóasztalon, amely percenként 250-et fordul 5,1 cm-es kitéréssel. B) Az A 28 086 antibiotikum-komplex előállítása Streptomyces aureofaciens NRRL 5758 törzzsel, 60 fermentorban Nagyobb térfogatú inokulum előállítására 10 ml, az előzőekben megadott eljárással készített, inkubált vegetatív tenyészettel 400 ml, a vegetatív táptalajjal azonos összetételű második vegetatív 65 3. példa A Streptomyces aureofaciens NRRL 5758 törzs által termelt A 28 086 antibiotikum-komplex elkülönítése Az 1. példában megadott szerint előállított, 132 liter térfogatú teljes tenyészlevet szűrési segédanyag (Hyflo Super-cel, Johns-Mansville Products Corp.) jelenlétében szűrünk, amikor 97 liter szűrletet kapunk. Ezt közelítőleg azonos térfogatú etil-acetáttal extraháljuk. Elkülönítjük a vizes 22
