173395. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ösztrén-3,17-dion-származékok előállítására
5 173395 6-szulfoxónium-metilid-oldatot az I általános képletű vegyülettel kezeljük. Eddig még nem volt ismert az a tény, hogy a 0-hidroxi-ketonok szulfonsavészterei az említett körülmények között ciklopropán-származékokká alakíthatók át. Lehetőség nyílik arra, hogy magukat a ketálokat használjuk fel közbenső termékekként gyógyászatilag hatékony szteroidok előállítására, amint azt a 170-hidroxi-18-metil-17a-etinil-15/3,160-metilén-4- -ösztrén-3-on szintézisének példáján a következőkben leírt alkalmazási példa keretében még részletesebben megvilágítjuk. A találmány szerinti eljárás foganatosítását a következő példák világítják meg részletesebben. A. Példák a találmány szerinti eljárás jobb megvilágítására: 1. példa a) 2 literes Erlenmeyer-lombikba 500 ml, 30 percig 120 C° hőmérsékleten, autoklávban sterilezett, 3,0% glükózt, 1,0% kukoricalekvárt, 0,2% nátrium-nitritet, 0,1% kálium-dihidrogén-foszfátot, 0,2% dikálium-hidrogén-foszfátot, 0,05% magnézium-szulfátot, 0,002% vas(II)-szulfátot és 0,05% kálium-klór időt tartalmazó táptalajt viszünk, majd ezt a Pénicillium raistrickii (ATCC 10 490) liofilizált tenyészetével beoltjuk, és a rendszert 72 órán át 30 C° hőmérsékleten rotációs rázógépen rázzuk. Ezután ebből az előtenyészetből 250 ml mennyiséget 20 liter térfogatú olyan üvegfermentorba oltunk, amelybe 15 liter mennyiségű, az előbbivel megegyező összetételű és 121 C° hőmérsékleten és 2,1 att nyomáson sterilezett táptalajt töltöttünk. Ezt a rendszert most habzásgátlószerként Silicon SH hozzáadásával, 29,C° hőmérsékleten, 101iter/perc sebességű levegőztetéssel, 1,7 att nyomáson és 220 ford./perc sebességű keveréssel, 24 órán keresztül tenyésztjük. Az előfermentorból most 1,8 liter mennyiségű tenyészlevet steril körülmények között átviszünk 26 liter térfogatú és a fentivel megegyező összetételű és azonos módon sterilezett táptalajra, amelyen a tenyésztést az előfermentor tenyészetével megegyező körülmények között folytatjuk. 12 óra múltán hozzáadjuk 2 liter sterilezett, 120 g 18- -metil-4-ösztrén-3,17-dion desztillált vízben, vizes Tween 80 Bayer jelenlétében finomra őrölt szuszpenzióját és tovább folytatjuk a tenyésztést. A folyamat előrehaladását a fermentorból kivett próbák metil-izobutil-ketonos kivonatainak vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatával követjük nyomon. Mintegy 70 órás kontaktidő után az átalakulás teljessé válik. Ezután kiszűrjük a gomba-micéliumot és a fermentlevet két ízben, egyenként 20 liter metil-izobutil-ketonnal extraháljuk. Ezzel párhuzamosan a leszűrt micéliumot több ízben elkeverjük és extraháljuk metil-izobutil-keton, aceton és víz elegyével, és ezt addig ismételjük, amíg a kivonatban szterőid anyag már nem mutatható ki. A szerves kivonatokat egyesítjük, és az oldatot vákuumban, 50 C*os fürdőhőmérsékleten szárazra pároljuk. A barna kristályokból álló maradékot a szilikonolaj eltávolítására hexánnal több ízben mossuk, majd szárítjuk, és aktívszénnel végrehajtott kezelés után etilacetátból átkristályosítjuk, amikor is 97,3 g (az elméleti hozam 76,5%-a) 175—177 C®-on olvadó tiszta 15a-hidroxi-18-metil-4-ösztrén-3,17-diont kapunk. b) 32 g 15a-hidroxi-18-metil-4-ösztrén-3,17-diont 240 ml diklór-metánban és 64 ml o-hangyasav-etilészterben elkeverünk 96g 2,2-dimetil-l,3-propándiollal, és 320 mg p-toluolszulfonsawal, és a reakciókeveréket 30 percig nitrogénáramban 50 C°-on keverjük. A rendszert ezután dietil-éterrel hígítjuk, nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és vízzel mossuk, szárítjuk, majd bepároljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk. Olaj alakjában ily módon 37 g 15a-hidroxi-3,3-(2*,2 ’-dimetil-l’,3’-propilén-dioxi)-18-metil-5(6)- illetve -5(10)-ösztren-17-on-t kapunk. c) 37 g 15a-hidroxi-3,3-(2’,2’-dimetil-] ’,3’-propilén-dioxi)-18-metil-5-, illetve -5(10)-ösztren-17-ont 370 ml piridinben, jéghűtés alkalmazásával elkeverünk 27,1 ml metánszulfonil-kloriddal és a reakciókeveréket 3 órán át jégfürdő hőmérsékletén keverjük. A reakciókeveréket ezután jegesvízbe keverjük, a csapadékot szűrőn leszívatjuk, vízzel alaposan mossuk, majd diklór-metánnal felvesszük és szárítjuk. Ily módon olaj alakjában 40 g 15a-meziloxi-3,3-(2’,2’-dimetil-l ’,3’-propilén-dioxi)-18-metil-5(6)- illetve 5(10)-ösztren-17-ont kapunk. d) 5,0 g trimetil-szulfoxónium-jodidot feloldunk 20 ml dimetil-szulfoxidban, az oldatot elkeverjük 910 mg elporított nátrium-hidroxiddal, és a keveréket 60 percig szobahőmérsékleten keverjük. Ezután nitrogénáramban 5,0 g 15a-mezil-oxi-3,3-(2’,2’-dimetil-l’,3’-propilén-dioxi)-18-metil-5-. illetve -5(10)-ösztren-17-ont adunk hozzá, és a rendszert szobahőmérsékleten további 60 percig keverjük. Jegesvizes kicsapatás után a kivált csapadékot szűrjük, vízzel mossuk, majd felvesszük diklór•metánnal. Bepárlás után 2,7 g 3,3-(2’,2’-dimetil-1 ’.3’-propilén-dioxi)-18-metil-15/3,16/?-metilén-5(6)-illetve -5(10)-ösztrén-17-ont kapunk - olaj alakjában. 2. példa 35 g 15a-mezil-oxi 3,3-(2\2’-dimetü-l ’,3’-propilén-dioxi)-18-metil-5-, illetve -(510)-ösztren-I7-ont 350 mi dimetil-formamidban szobahőmérsékleten 20 órán át keverünk 105 g vízmentes nátrium-acetáttal. A reakciókeveréket ezután jeges vízbe keverjük, a kivált csapadékot szűrőn leszívatjuk, mossuk és felvesszük diklór-metánnal. Bepárlás után 28,9 g nyers 3,3-(2’,2’-dimetil-l ’,3’-propilén-dioxi)-18-metil-5(6)- iletve-5(10y 5-ösztradién-17-ont kapunk. B. Alkalmazási példa a) 4,0 g magnézium forgácsot 110 ml abszolút tetrahidrofuránban 13,1 ml etil-bromiddal etil-magnézium-bromiddá alakítunk. Ezután az így kapott oldatot jéghűtés közben 110 ml olyan abszolút tetrahidrofuránban csepegtetjük, amelyen acetilént 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
