173065. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-védett aminosavak extrakciójára
3 173065 4 szerben jelenlévő egyéb reakcióképes anyagok, így víz alkileződnek, hanem a diazoalkán az N-védett aminosav karboxil-csoportjával reagál. Azt találtuk, hogy a diazoalkánnal a találmány szerinti extraktiv észterezés során csak igen kevés mellékreakció játszódik le. A találmány tárgya tehát eljárás N-védett aminosavak extrakciójára vizes oldatból. A találmány szerinti eljárás lényege az, hogy az N-védett aminosav oldatát vízzel nem elegyedő oldószer jelenlétében diazoalkánnal kezeljük, és ilyen módon az N-védett aminosav észterének szerves oldószerben készült oldatát állítjuk elő. A találmány tárgyát képező eljárásban észterezőszerként az (I) általános képletű diazoalkánokat alkalmazhatjuk. A képletben R! fenil-csoportot, 1-4 szénatomos alkil-csoportot, naftil- vagy tienil-csoportot jelent, mely csoportok adott esetben 1-4 szénatomos alkil-vagy alkoxicsoporttal lehetnek szubsztítuálva, R2 jelentése azonos az R! meghatározásában felsoroltakkal, vagy hidrogénatom. Különösen előnyösen alkalmazhatók azok a diazoalkánok, amelyekben Rj és R2 úgy van megválasztva, hogy az R^^H— általános képletű észtercsoport a rövidszénláncú (például 1 -6 szénatomos) alkilcsoport 1 -es helyzetű at omjához kapcsolódóan 1 vagy 2 karbociklusos vagy heterociklusos arilcsoportot tartalmazó aralkilcsoport, így benzil-, 1 -feniletil-, difenilmetil-, naftilfenilmetil-, di-(tien-2-il)-metil-, fenil-(tien-2-2il)-metilcsoport vagy e csoportok szubsztituált származéka, például fenil-(o-tolil)-metil- vagy (p-metoxifenil)-fenilmetilcsoport. E csoportok alkalmazása azért előnyös, mivel a belőlük származó észtercsoportok egy további lépésben könnyen lehasíthatók. A fenti csoportokat minden korlátozó értelem nélkül soroltuk fel. A találmány szerinti eljárással az alábbi N-védett aminosavakat extrahálhatjuk: i) II általános képletű vegyületek, ahol Z jelentése =S vagy -S—0 csoport, X jelentése (a) vagy (b) általános képletű kétértékű csoport, amelyben Y metilcsoportot vagy -CH2Y’ általános képletű szubsztituált metil-csoportot jelent, mely utóbbiban Y’ jelentése nukleofíl csoport, előnyösen acetoxi-, hidroxivagy karbamoiloxi-csoport, vagy Y jelentése egy telítetlen csoport, előnyösen vinil- vagy szubsztituált vinil-csoport, és a (b) általános képletben feltüntetett szaggatott vonal azt jelenti, hogy a 2- és 3-helyzetű vagy a 3- és 4-helyzetű szénatom között kettős kötés van, R jelentése 1—20 szénatomos karbonsav-acilamido-csoport vagy egy protonált NH3+ amino-csoport, Ra jelentése hidrogénatom vagy 1 -4 szénatomos allai-, alkoxi- vagy alkiltio-csoport, vagy ii) R3(CH2)n—CH(R)—COOH általános képletű aminosavak, ahol R jelentése 1-20 szénatomos karbonsav-acilamido-csoport, R3 jelentése hidrogénatom, merkapto-, hidroxil-, amino-, karboxialkil-, alkiltio-, aril- vagy aralkil-csoport vagy egy heterociklusos csoport, és n értéke 0 vagy 1 és 5 közötti egész szám, vagy iii) N-védett peptidek. A találmány szerinti eljárással extrahálható N-védett aminosavakra az alábbi példákat említjük meg: egyszerű aminosavak N-védett származékai, így glicin, cisztein, metionin, aszparaginsav, glutaminsav, fenilalanin, triptofán és L-dopa N-védett származékai; N- védett peptidek, így fermentlevekben, növényi és állati extraktumokban és peptidszintézis során keletkező vizes reakcióelegyben előforduló peptidek, így glutation; természetes és félszintetikus penicillin- és cefalosporin-származékok és a vegyületek bomlástermékei, így fermentációval és egyéb enzimmel katalizált eljárással előállított penillkarbonsav és penicillkarbonsav. Az N-védett aminosavak extraktiv észterezésre szánt vizes oldata adott esetben kis mennyiségben (azaz legfelejebb 30 súly%-ban) egy vagy több koszolvenst, azaz az N-védett aminosavak vizes közegben történő oldódását elősegítő vízzel elegyedő szerves oldószert is tartalmazhat. Ilyen oldószerek például a rövid szénláncú alkanolok (például metanol), ketonok (például aceton), észterek (például etilacetát), N,N-diszubsztituált amidok (például dimetilacetamid) és éterek (például gyűrűs éterek, így dioxán). Abban az esetben azonban, ha az N-védett aminosavak rendkívül rosszul oldódnak vízben, akkor vizes oldatként az N-védett aminosav szilárd, még feloldatlan termékkel egyensúlyban álló telített oldatát is alkalmazhatjuk. Az „N-védett aminosav vizes oldata” kifejezést tehát a leírásban általános értelemben használjuk, a szerves oldószert tartalmazó vizes oldatokat és a fenti szuszpenziókat is értjük alatta. A találmány szerinti eljárás segítségével, extraktiv észterezéssel elkülöníthető (n) általános képletű penicillin- és cefalosporin-származékokban R karbonsavacilamidocsoportot jelent, akkor az acilcsoport a penicillin- és cefalosporin-származékok acilezésére alkalmazott számos csoport közül bármelyik lehet. Ilyen acilcsoportokra — a teljesség igénye nélkül — az alábbi példákat soroljuk fel: (i) RuCnH2nCO- általános képletű csoportok, mely képletben Ru arilcsoportot (karbociklusos vagy heterociklusos arilcsoportot), cikloalkilcsoportot, szubsztituált arilcsoportot, szubsztituált cikloalkilcsoportot, cikloalkadienilcsoportot vagy nem aromás heterociklusos vagy mezoionos csoportot jelent, n 0-4 közötti egész számot jelent. Ezekre az acilcsoportokra az alábbi példákat adjuk meg: fenilacetil-; szubsztituált vagy szubsztituálatlan tien-2- és tien-3-ilacetil-; 3- és- 4-izoxazolilacetil-; piridilacetil-; tetrazolilacetil-; és szindonacetilcsoport. Ha n értéke nullától különbözik, különösen, ha n értéke 1, az acilcsoport a-szénatomja például az alábbi szubsztituenseket hordozhatja: hidroxilcsoport, észterezett hidroxilcsoport (például rövid szénláncú alkanoiloxi-, így acetoxicsoport), védett aminocsoport (például a fenti csoportokkal védett aminocsoport), hidroxiliminocsoport, aciloxiiminocsoport (például rövid szénláncú alkanoiloxiiminocsoport, így acetoxiiminocsoport vagy halogénatommal szubsztituált rövid szénláncú alkanoiloxiiminocsoport, így monovagy diklóriminocsoport), éterezett oxíiminocsoport (például rövid szénláncú alkoxiiminocsoport, így metoxiimino- vagy terc-butoxiiminocsport, rövid szénláncú cikloalkiloxiiminocsport, így ciklopentiloxiimino- vagy ariloxiiminocsoport, például fenoxiiminocsoport). Ilyen a-szubsztituált acilcsoportokra példaként a 2-hidroxi-2-fenilacetilcsoportot, az N-védett 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
