172446. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-[L-(-)-gamma-amino-alfa-hidroxi-butiril]-kanamicin A előállítására

17

172446

18

8. példa

10. példa

Az L-(-)-7-benziloxikarbonilamino-a-hidroxi-vajsav N-hidroxi-szukcinimid-észtere 5

10,6 g (0,042 mól) V képletű vegyület és 4,8 g (0,042 mól) N-hidroxi-szukcinimid1 200 ml etilacetáttal készített oldatát 0C°-ra lehűtjük, és az oldathoz

8,6 g (0,042 mól) diciklohexilkarbodiimidet adunk. A 10 reakciókeveréket éjszakán át hűtó'szekrényben tartjuk.

A kivált diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, és a szűrletet csökkentett nyomáson 50 ml-re koncentráljuk. A cím szerinti vegyületet színtelen kristályok alakjában kapjuk, amelyeket szűréssel elkülönítünk. A 15 hozam 6,4 g, a termék olvadáspontja 121-122,5 C°. A szűrletet vákuumban szárazra pároljuk, és a kristályos maradékot benzol-n-hexán keverékének 20 ml-ével mossuk, így kapjuk a cím szerinti vegyület második hozamát. Az összes kitér- 20 mêlés 13,4g (92%). [a]D: 1,5° (c=l, kloroform).

IR spektrum (KBr): vc-0 1810, 1755, 1740, 1680 cm"1.

25

MMR spektrum (aceton-dfi) (6-értékek ppm-ben, tetrametilszilán): 2,0 (2H, m), 2,83 (4H, s), 3,37

(2H, d-d, J

= 6,5

és 12,5 Hz),

4,56 (1H, m), 4,99

30

(2H, s), 6,3

(2H,

széles), 7,23

(5H, s).

Az analízis a C

ííHi8N2O7

összegképletre:

35

Számított:

C =

54,85%,

H =

5,18%,

N =

8,00%,

Talált:

C =

54,79%,

H =

5,21%,

N =

8,14%,

40

C =

54,70%,

H =

5,20%,

N =

8,12%.

1 G.W. Anderson és tsai: J. Am. Chem. Soc., 86, 45 1839 (1964).

9. példa

N-(Benziloxikarboniloxi)-szukcinimid

23 g (0,2 mól) N-hidroxi-szukcinimidet 9 g 55 (0,22 mól) nátriumhidroxid 200 ml vízzel készített oldatában feloldunk. Az oldathoz vízhűtés és keverés közben 34 g (0,2 mól) benziloxikarbonilkloridot csepegtetünk, és a reakciókeveréket szobahőmérsékleten éjszakán át keverjük. A termék 60 benziloxikarbonil-származéka kiválik, ezt kiszűrjük, vízzel mossuk és levegőn szárítjuk. A hozam 41,1 g (82%). A terméket benzol-n-hexán 10:1 keverékéből átkristályosítva színtelen prizmákat kapunk, amelyek olvadáspontja 78-79 C°. 65

42,5 ml (90 mmól) kanamicin A szabad bázist 450 ml víz és 500 ml dimetilformamid elegyében oldva 9 C° alatti hőmérsékletre lehűtünk, és az oldatot erélyesen keverjük. Az oldathoz kb. 2 óra alatt hozzácsepegtetjük 22,4 g (90 mmól) N-(benziloxikarboniloxi)-szukcinimid 500 ml dimetilformamiddal készített oldatát. A reakciókeveréket éjszakán át -10 és 0C° közötti hőmérsékleten, majd 1 napig szobahőmérsékleten keverjük. A reakciókeveréket ezután 50 C° alatti hőmérsékleten, csökkentett nyomáson bepároljuk. Az olajos maradékot 500 ml víz és 500 ml butanol keverékében feloldjuk, a keveréket megszűrjük, így az oldhatatlan anyagot eltávolítjuk, és a szűrletet 2 fázisra elkülönítjük. A butanolos és vizes fázisokat 2 x 500 ml butanollal telített vízzel és 2 x 500 ml vízzel telített butanollal kezeljük az ellenáramú megoszláshoz hasonló technikát alkalmazva. A három vizes fázist egyesítjük, és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. Olajos maradékot kapunk, amelynek egy része szobahőmérsékleten állva kikristályosodik. A kristályokat tartalmazó maradékhoz kb. 100 ml metanolt adunk, amely az olajat oldja, és azt a kristályoktól elkülöníti. A keverékhez 300 ml etanolt adunk, és éjszakán át szobahőmérsékleten tartjuk. Kristályos masszát kapunk, amelyet megszűrünk. A kiszűrt termék súlya 44 g, a vékonyrétegkromatogram szerint (n-propanol-piridin-ecetsav-víz 15:10:3:12 oldószerrendszer és ninhidrines előhívás) a termék kismennyiségű kanamicin A vegyületet tartalmaz.

6’-Benziloxikarbonil-kanamicin A (II)

A nyersterméket 300 ml vízben feloldjuk, és CG-50 ioncserélő gyantát (NH4 + típus, 500 ml) tartalmazó oszlopon kromatografáljuk. Az oszlopot 0,1 n ammóniumhidroxid-oldattal eluáljuk, és az eluátumot 10 ml-es frakciókba gyűjtjük. A célterméket a 10—100. csövek tartalmazzák, a visszakapott kanamicin A a lassabban mozgó frakciókban van, és a termék helyzeti izomerjeit a gyorsabban mozgó frakciók tartalmazzák. A 10-110. frakciókat egyesítjük, és csökkentett nyomáson bepároljuk. 24,6 g (45%) színtelen terméket kapunk ez a 6’-benziloxikarbonil-kanamicin A (II) (6’-CBz-kanamicin A), amely olvadni és színesedni kezd 204C°-on és gázfejlődés közben bomlik 212C°-on. [a]D: + 106° (c = 2, víz). A vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat (szilikagél lemez F254, ninhidrin) eredményei a következők:

A vékonyrétegkromatogram egyik oldószerrendszerével végezve a vizsgálatot, a végterméket látszólag két kisebb komponens kíséri, a végterméket azonban további tisztítás nélkül használtuk az I képletű vegyület (BB-K8) előállításához.

9